一种喜旱莲子草石油醚提取物的制备方法及运用技术

本发明专利技术涉及一种喜旱莲子草石油醚提取物的制备方法及应用，属于医药技术领域。本发明专利技术所述方法以喜旱莲子草为原料，依次采用超声溶剂提取法、溶剂萃取法等工艺，并结合减压浓缩干燥、真空干燥、常压浓缩干燥等干燥方法，制备成喜旱莲子草石油醚提取物，将制成的喜旱莲子草石油醚提取物作为抗癌活性成分，使之在癌症治疗中进行应用。本发明专利技术这种对环境危害较大的喜旱莲子草提供了一种新的途径，同时也为开发中草药的抗癌活性研究提供了一定的实验基础以及一种新的思路，选用中草药的不同萃取物进行抗癌活性筛选。

【技术实现步骤摘要】
一种喜旱莲子草石油醚提取物的制备方法及运用
本专利技术涉及一种喜旱莲子草石油醚提取物的制备方法及运用，属于医药

技术介绍
喜旱莲子草，别名空心莲子草、革命草、水花生等，是苋科的一种植物。这种植物原产巴西，1930年传入我国，被列为中国首批外来物种。该植物生命力极强，适应水生和陆生环境，生长繁殖迅速，人为的引种扩散又使其滋生蔓延，已经成为了我国大部分地区的恶性杂草，因此该植物也被认为是一种危害极大的入侵物种。已有研究发现，该植物含有蒽醌类、甾醇类、黄酮类、三萜类等等化合物。现代药理学研究表明该植物清热解毒、凉血，可用于治疗病毒感染而致的疾病，以及流行性乙型脑炎早期、流行性出血热初期、麻疹等疾病。但是，迄今为止，对喜旱莲子草的抗癌作用的研究还比较少，其中2007年中国台湾的方金帛等对喜旱莲子草的乙酸乙酯提取物进行了抗癌作用的研究，发现其对人宫颈癌细胞Hela细胞以及小鼠成纤维细胞L929进行了抗癌作用研究，发现喜旱莲子草的乙酸乙酯提取物对这两种细胞具有一定的生物活性。癌症是当今社会发病率高，死亡率高的一种顽疾，目前尚未有能够治愈率较高的药物报道。本专利技术人在寻找中草药抗癌活性成分的过程中，发现喜旱莲子草的石油醚提取物具有良好的抗肿瘤活性。这为后期这种植物提取物的抗癌或辅助治疗作用研究奠定了一定的基础，也对开发利用这种有危害的入侵物种起到了一定的推动作用。
技术实现思路
本专利技术的目的是提供一种喜旱莲子草石油醚提取物的制备方法，为喜旱莲子草在抗癌药物研究中的应用奠定了一定的基础，同时为综合治理这种有危害的入侵物种提供了一定的途径。本专利技术所述喜旱莲子草石油醚提取物的制备方法以喜旱莲子草为原料，依次采用超声溶剂提取法、溶剂萃取法等工艺，并结合减压浓缩干燥、真空干燥、常压浓缩干燥等干燥方法，制备成喜旱莲子草石油醚提取物，将制成的喜旱莲子草石油醚提取物作为抗癌活性成分，使之在癌症治疗中进行应用。本专利技术所述喜旱莲子草石油醚提取物的制备方法具体包括以下步骤：（1）按喜旱莲子草和乙醇体积比为1:2~1:5的比例将喜旱莲子草浸入乙醇溶液中，通过超声提取法，提取至乙醇溶液颜色较淡或无色为止；（2）收集提取液，采用减压蒸馏浓缩乙醇超声提取物至无醇味；（3）收集得到的乙醇超声提取物，按超声提取物与蒸馏水的体积比1:1~1:2，在超声提取物中加入蒸馏水混匀得到混合溶液，按混合溶液与石油醚的体积比为1:1~1:2的比例在混合溶液中加入石油醚进行多次萃取，直到石油醚萃取相无色；（4）收集石油醚萃取物，减压蒸馏浓缩萃取物后，萃取物用无水乙醇溶解，然后进行初步常压干燥，初步干燥后的石油醚萃取物进行真空干燥后得到干燥石油醚萃取物。本专利技术所述喜旱莲子草为新鲜采集或者经过干燥的根茎、枝叶、果实中的一种或多种。本专利技术步骤（2）中所述的减压蒸馏选用旋转蒸发仪，条件为43℃~48℃，真空度为0.04~0.06Mpa。本专利技术步骤（4）中所述的减压蒸馏选用旋转蒸发仪，条件为43℃~48℃，真空度为0.04~0.06Mpa。本专利技术步骤（4）中所述的常压干燥过程中，干燥温度为40℃~50℃，干燥时间为8~12h，真空干燥过程中，干燥温度为40℃~50℃，干燥时间为8~12h，真空度为0.06~0.08Mpa。本专利技术所述乙醇的质量百分比浓度为90%~98%。本专利技术所述喜旱莲子草石油醚提取物在制备抗癌药物中的运用。喜旱莲子草的石油醚提取物制备工艺简单实用，同时具有良好的抗癌活性。为综合利用这种对环境危害较大的入侵物种提供了一种新的途径，同时也为开发中草药的抗癌活性研究提供了一定的实验基础以及一种新的思路即选用中草药的不同萃取物进行抗癌活性筛选。附图说明图1实施例1喜旱莲子草石油醚提取物抑制MCF-7细胞生长时间效应曲线；图2实施例1喜旱莲子草石油醚提取物抑制A549细胞生长时间效应曲线；图3实施例1喜旱莲子草石油醚提取物抑制MCF-7细胞IC50曲线；图4实施例1喜旱莲子草石油醚提取物抑制A549细胞IC50曲线。具体实施方式下面结合附图和具体实施方式，对本专利技术作进一步详细说明，但本专利技术的保护范围并不限于所述内容。实施例1本实施例所述述喜旱莲子草石油醚提取物的制备方法，具体包括以下步骤：（1）按喜旱莲子草和乙醇体积比为1:3的比例将喜旱莲子草浸入乙醇溶液中，通过超声提取法，提取至乙醇溶液颜色较淡或无色为止；（2）收集提取液，采用旋转蒸发仪在温度为47℃，真空度为0.05Mpa的条件下对提取液进行减压蒸馏，浓缩乙醇超声提取物至无醇味；（3）收集得到的乙醇超声提取物，按超声提取物与蒸馏水的体积比1:1.5，在超声提取物中加入蒸馏水混匀得到混合溶液，按混合溶液与石油醚的体积比为1:1.5的比例在混合溶液中加入石油醚进行多次萃取，直到石油醚萃取相无色；（4）收集石油醚萃取物，选用旋转蒸发仪在温度为45℃，真空度为0.04Mpa的条件下对石油醚萃取物进行减压蒸馏对萃取物进行浓缩，浓缩后的萃取物用无水乙醇溶解得到混合溶液，将混合溶液在常压下、温度为40℃的条件下干燥12h，最后在真空度为0.06Mpa、干燥温度为40℃的条件下干燥10h后得到干燥石油醚萃取物。本实施例制备得到的喜旱莲子草石油醚提取物的体外抗癌实验，具体包括以下步骤：（1）准备以下细胞株，试剂以及仪器：人非小细胞肺癌A549，人乳腺癌MCF-7；DMEM培养液（GIBCO），胎牛血清（GIBCO），胰蛋白酶（GIBCO），DMSO（分析纯，Amresco），青霉素(Sigma)，链霉素（Sigma），MTT（Amresco），96孔板，细胞培养箱（Thermo），酶标仪（Tecan），生物操作台（吴江市绿岛净化设备厂）。（2）肿瘤细胞培养：基础培养基1640+10%FBS（胎牛血清）+1%双抗青链霉素，培养条件为37℃，5%CO2浓度及饱和湿度；当细胞生长至对数期时，用胰蛋白酶消化细胞，洗涤吹散细胞，以每孔3×103个细胞100μl接种于96孔板，以备MTT实验。（3）细胞增殖实验（MTT法）：取本实施例制备得到的喜旱莲子草石油醚提取物溶于DMSO溶液，分别配置浓度为100mg/ml、50mg/ml、25mg/ml、12.5mg/ml、6.25mg/ml、3.125mg/ml、1.5625mg/ml、0.78125mg/ml，共8个浓度每个浓度2倍稀释；每孔加入1μl各浓度石油醚提取物，并补加100μl培养基，混匀，使得喜旱莲子草石油醚提取物的每孔终浓度为500μg/ml、250μg/ml、125μg/ml、62.5μg/ml、31.25μg/ml、15.625μg/ml、7.8125μg/ml、3.90625μg/ml；放入培养箱继续培养24h、48h、72h。每孔加入20μlMTT溶液，继续培养4h；培养4h后抽出每孔溶液后每孔加入100μlDMSO溶液，酶标仪下测定每孔的吸光度；以加入DMSO溶液1μl培养的细胞为对照组，每个浓度梯度设5个平行组，分别计算细胞抑制率；按照以下公式计算抑制率：抑制率=(1-(实验组吸光度/对照组吸光度))×100%。表1.不同浓度喜旱莲子草石油醚提取物对MCF-7细胞生长的抑制作用表2.不同浓度喜旱莲子草石油醚提取物对A549细胞生长的抑制作用实施例2本实施例本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种喜旱莲子草石油醚提取物的制备方法，其特征在于，具体包括以下步骤：（1）按喜旱莲子草和乙醇体积比为1:2~1:5的比例将喜旱莲子草浸入乙醇溶液中，通过超声提取法，提取至乙醇溶液颜色较淡或无色为止；（2）收集提取液，采用减压蒸馏浓缩乙醇超声提取物至无醇味；（3）收集得到的乙醇超声提取物，按超声提取物与蒸馏水的体积比1:1~1:2，在超声提取物中加入蒸馏水混匀得到混合溶液，按混合溶液与石油醚的体积比为1:1~1:2的比例在混合溶液中加入石油醚进行多次萃取，直到石油醚萃取相无色；（4）收集石油醚萃取物，减压蒸馏浓缩萃取物后，萃取物用无水乙醇溶解，然后进行初步常压干燥，初步干燥后的石油醚萃取物进行真空干燥后得到干燥石油醚萃取物。

【技术特征摘要】
1.喜旱莲子草石油醚提取物在制备抗癌药物中的运用，所述抗癌药物用于抑制MCF-7乳腺癌细胞和A549非小细胞肺癌细胞；所述喜旱莲子草石油醚提取物的制备方法，具体包括以下步骤：（1）按喜旱莲子草和乙醇体积比为1:2~1:5的比例将喜旱莲子草浸入乙醇溶液中，通过超声提取法，提取至乙醇溶液颜色较淡或无色为止；（2）收集提取液，采用减压蒸馏浓缩乙醇超声提取物至无醇味；（3）收集得到的乙醇超声提取物，按超声提取物与蒸馏水的体积比1:1~1:2，在超声提取物中加入蒸馏水混匀得到混合溶液，按混合溶液与石油醚的体积比为1:1~1:2的比例在混合溶液中加入石油醚进行多次萃取，直到石油醚...

【专利技术属性】
技术研发人员：赵扬，李拓，梁超，潘卉，冯阳，
申请(专利权)人：昆明理工大学，
类型：发明
国别省市：云南;53