本发明专利技术提供了同时检测独一味中环烯醚萜苷、苯乙醇苷、黄酮、咖啡酰类成分的方法。本发明专利技术检测方法中，出峰数量较多，分离度良好，基线平稳，能够对独一味进行有效检测，为保障药材质量提供给了新的选择。本发明专利技术首次在同一色谱条件下检测了上述环烯醚萜苷、苯乙醇苷、黄酮及咖啡酰4类成分，共指认了7个具体化合物，可更全面更准确地用于独一味药材的质量控制。
【技术实现步骤摘要】
【专利摘要】本专利技术提供了。本专利技术检测方法中，出峰数量较多，分离度良好，基线平稳，能够对独一味进行有效检测，为保障药材质量提供给了新的选择。本专利技术首次在同一色谱条件下检测了上述环烯醚萜苷、苯乙醇苷、黄酮及咖啡酰4类成分，共指认了7个具体化合物，可更全面更准确地用于独一味药材的质量控制。【专利说明】同时检测独一味中环婦離瞄音、苯乙醇音、黄鋼、咖啡醜类 成分的方法
本专利技术涉及同时检测独一味中环帰離聰巧、苯己醇巧、黄丽、咖啡醜类成分的方 法。
技术介绍
独一味Lamio地IomiS rotata炬enth. ) Kudo系唇形科独一味属植物，是重要的青 藏高原药用植物和常用大宗藏药，为一级瀬危藏药品种W，《四部医典》和《晶珠本草》中记 载本品有强筋骨，干黄水，止痛之功。现代临床用于活血止血、巧风止痛，广泛治疗跌打损 伤、风湿瘍痛、外科手术后的刀口疼痛、出血等症，对癌症疼痛亦有很好的抑制作用，且无成 癒性，开发前景极为广阔。我国现有生产含独一味及其提取物的现代制剂逾20种，如独一 味胶囊、奇正消痛贴等知名品种。独一味药材来源全部依靠野生资源，近年来由于需求量剧 增，连年过度采收造成可采资源急剧下降，为了保护日益减少的独一味野生资源，2010年版 中国药典将其入药部位由全草修订为地上部分 。 现代研究表明，独一味的活性成分主要有3类成分：环帰離聰巧，具有很好的镇痛 6^、止血、促凝血作用W ;苯己醇巧和黄丽均具有镇痛活性然而，现有关于独一味药材 质量控制的报道多为采用HPLC法测定其中1?2类成分。如药典标准只测定了独一味地 上部分中山檐巧甲醋和8-0-己醜山檐巧甲醋该2种环帰離聰巧的含量;潘正W等同时 测定了独一味根中4种环帰離聰巧和2种苯己醇巧；何映霞W等同时测定了独一味地上部 分中2种苯己醇巧和2种黄丽。尚未见同时测定独一味中3类W上成分的报道。
技术实现思路
为了进一步完善独一味的质量控制标准，本专利技术拟采用HPLC法建立独一味的多 指标含量测定方法，同时测定环帰離聰巧、苯己醇巧、黄丽及咖啡醜4类成分中部分化合物 的含量，希望此方法能弥补现有研究的不足，进一步完善独一味的质量控制标准，为该药材 的合理利用提供科学依据。 本专利技术提供了同时检测独一味中环帰離聰巧、苯己醇巧、黄丽、咖啡醜类成分的方 法，它包括如下操作步骤： [000引 （1)取待检药材，W甲醇或含水甲醇提取，制备供试品溶液； (2)选择山檐巧甲醋、8-0-己醜山檐巧甲醋、绿原酸、连翅醋巧B、麦角留巧、芦了 和木犀草巧为对照品，制备对照品溶液； (3)分别将对照品、供试品溶液注入高效液相色谱仪中，根据外标法检测独一味中 上述7种成分即可，色谱条件如下： 色谱柱：十八焼基键合娃胶为填料 检测波长；山檐巧甲醋、8-0-己醜山檐巧甲醋检测波长为238nm ;绿原酸、连翅醋 巧B和麦角留巧检测波长为330nm ;芦下和木犀草巧检测波长为350nm ; 流动相：流动相为A ;己膳-B ;0. I %?0. 3 %磯酸水溶液，梯度洗脱程序；0? 15min，12%?12% A ;15 ?20min，12%?20. 5% A ;20 ?30min，20. 5%?20. 5% Ao 本专利技术需要指出，由于独一味中所含的黄丽类成分和苯己醇巧类具有相似的色谱 保留行为，将该两大类成分完全分离具有较大难度，梯度条件变化时，该两类成分的多个色 谱峰相对保留时间变化较大，甚至出现色谱峰位置的互换，因此在同一色谱条件下实现独 一味中的黄丽类成分和苯己醇巧类成分全部达到基线分离，实现对单一成分的含量测定是 难点。本专利技术所建立的方法可同时分离测定连翅醋巧B、芦下、麦角留巧和木犀草巧该4个 较难分离的成分。目前公开的独一味色谱条件，均不能实现同时对本专利技术中的7种成分进 行含量测定。药典条件仅仅测定其中的两个环帰離聰巧类成分；山檐巧甲醋和8-0-己醜山 檐巧甲醋。 进一步地，步骤（1)中，所述含水甲醇中甲醇浓度为50?80 % v/v，优选为60 % v/v。 更进一步地，步骤（1)中，提取的方法选自回流、超声、浸溃或渗漉。 进一步地，步骤（2)中，磯酸水溶液浓度为0. 1%。 [001引 进一步地，所述色谱柱的尺寸为4. 6mmX 250mm，5 Ji m。 更进一步地，色谱柱柱温为30 +2°C。 本专利技术检测方法中，出峰数量较多，分离度良好，基线平稳，能够对独一味进行有 效检测，为保障药材质量提供给了新的选择。本专利技术首次在同一色谱条件下检测了上述环 帰離聰巧、苯己醇巧、黄丽及咖啡醜4类成分，共指认了 7个具体化合物，可更全面更准确地 用于独一味药材的质量控制。 W下通过实施例形式的【具体实施方式】，对本专利技术的上述内容再作进一步的详细说 明。但不应将此理解为本专利技术上述主题的范围仅限于W下的实例。凡基于本专利技术上述内容 所实现的技术均属于本专利技术的范围。 【专利附图】【附图说明】 图1对照品（A)及独一味地上部分样品做色谱图，其中，1.山檐巧甲醋；2.绿 原酸；3. 8-0-己醜山檐巧甲醋；4.连翅醋巧B点芦下；6.麦角留巧；7.木犀草巧 图2对比例条件下的独一味HPLC色谱图，其中，3.胡麻属巧、4.山檐巧甲醋、 5.绿原酸、8.马钱巧、9. 8-0-己醜山檐巧甲醋、10.连翅醋巧B、ll.木犀草巧、12.麦角留巧 【具体实施方式】 实施例1本专利技术检测方法 [002引 （1)取待检独一味药材，W 60% v/v甲醇提取，制备供试品溶液； 似选择山檐巧甲醋、8-0-己醜山檐巧甲醋、绿原酸、连翅醋巧B、麦角留巧、芦下 和木犀草巧为对照品，制备对照品溶液； (3)分别将对照品、供试品溶液注入高效液相色谱仪中，根据外标法检测独一味中 上述7种成分即可，色谱条件如下： 色谱柱：十八焼基键合娃胶为填料 检测波长；山檐巧甲醋、8-0-己醜山檐巧甲醋检测波长为238nm ;绿原酸、连翅醋 巧B和麦角留巧检测波长为330nm ;芦下和木犀草巧检测波长为350nm ; [002引流动相：流动相为A ;己膳-B ;0. 1 %磯酸水溶液，梯度洗脱程序；0?15min， 12%?12% A ;15 ?20min，12%?20. 5% A ;20 ?30min，20. 5%?20. 5% Ao 本实施例所用独一味药材是指符合2010版药典的独一味地上部分。 实施例2方法学考察 1 材料 Utimate 3000高效液相色谱仪（包括四元梯度粟，在线脱气机，自动进样器，柱温 箱，VWD3400紫外检测器，C虹omeleon色谱工作站，德国戴安），Sartorius BS224S电子分 析天平（德国赛多利斯），M比LIQ超纯水机（美国Millipore) 山檐巧甲醋、绿原酸、8-0-己醜山檐巧甲醋、连翅醋巧B、芦下、麦角留巧、木犀草 巧对照品均购自成都曼思特生物科技有限公司（供含量测定用，纯度>98%)。己膳（色 谱纯，Fisher)，水为超纯水，其余试剂为分析纯。 独一味自采对口药材24批，购买5批，共计29批（见表1)，由成都中医药大学古 锐本文档来自技高网...
【技术保护点】
同时检测独一味中环烯醚萜苷、苯乙醇苷、黄酮、咖啡酰类成分的方法，其特征在于：它包括如下操作步骤：(1)取待检独一味药材，以甲醇或含水甲醇提取，制备供试品溶液；(2)选择山栀苷甲酯、8‑O‑乙酰山栀苷甲酯、绿原酸、连翘酯苷B、麦角甾苷、芦丁和木犀草苷为对照品，制备对照品溶液；(3)分别将对照品、供试品溶液注入高效液相色谱仪中，根据外标法检测独一味中上述7种成分即可，色谱条件如下：色谱柱：十八烷基键合硅胶为填料检测波长：山栀苷甲酯、8‑O‑乙酰山栀苷甲酯检测波长为238nm；绿原酸、连翘酯苷B和麦角甾苷检测波长为330nm；芦丁和木犀草苷检测波长为350nm；流动相：流动相为A：乙腈‑B：0.1％～0.3％磷酸水溶液，梯度洗脱程序：0～15min，12％～12％A；15～20min，12％～20.5％A；20～30min，20.5％～20.5％A。
【技术特征摘要】
【专利技术属性】
技术研发人员：古锐，钟世红，
申请(专利权)人：成都中医药大学，
类型：发明
国别省市：四川;51
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