本发明专利技术公开的是从毛蚶中提取甾体化合物的方法。目前，对毛蚶的研究多集中在活性多糖、多肽及蛋白质等方面，迄今尚未见有从毛蚶中提取甾体化合物的技术披露。本发明专利技术通过（1）从毛蚶中提取醇溶性提取物；（2）制备毛蚶萃取物；（3）毛蚶甾体化合物提取；（4）对三个纯化合物的理化性质和波谱数据进行分析等技术步骤，对毛蚶提取物中的萃取液的正丁醇相进行分离纯化，得到了胆甾醇、胆甾烷醇和孕甾酮，测定三个甾体化合物，均对杀灭卤虫有良好的活性，在浓度为50?g/ml时对卤虫的致死率分别为65.0%、58.3%、和60%，并且随着浓度的升高杀虫率也升高，表现出浓度依赖性，本发明专利技术的应用可以大大缩短新药创制的周期，对新药的研发具有重要意义。
【技术实现步骤摘要】
【技术保护点】
从毛蚶中提取甾体化合物的方法，其特征是所述方法的主要技术步骤是：（1）从毛蚶中提取醇溶性提取物：取鲜毛蚶洗净、去壳、取肉，于组织捣碎机中匀浆，于毛蚶浆中加入毛蚶浆体积1?2倍的90?95%的乙醇，在室温或4℃状态下，采用超声提取、微波提取、冷浸、渗漉、高压提取或回流提取的方式，提取1?4次，每次2?24小时，收集合并提取液，过滤，滤液用100–300hPa大气压减压浓缩至40℃热时测相对密度是1.2?1.3，得到毛蚶浸膏备用；（2）制备毛蚶萃取物：于毛蚶浸膏中以1：6.8?7.2的重量比加入水并充分混悬，然后分别用等体积的石油醚、乙酸乙酯、正丁醇萃取，得到三种萃取液，三种萃取液分别经100–300hPa大气压减压浓缩至40℃热测时相对密度是1.2?1.3，分别得到石油醚相，乙酸乙酯相、正丁醇相和水相备用；（3）毛蚶甾体化合物提取：将正丁醇相用甲醇以1：1的体积比溶解，先用Sephadax?LH?20凝胶柱层析，氯仿/甲醇1︰1洗脱，点板合并馏分，然后经40℃、100–300hPa大气压减压浓缩至干，将凝胶显红色馏分用2?3ml甲醇溶解，然后再用RP?18反相硅胶柱层析，经甲醇水30%、50%、70%、90%和100%梯度洗脱，最后用高效液相，90%甲醇水洗脱，得到3个纯化合物；（4）对三个纯化合物的理化性质和波谱数据进行分析：化合物的物理常数和波谱数据为：化合物(1):无色针状结晶;1H?NMR(CDCl3,600MHz):5.35(1H,d,J=5.5Hz,H?6),3.52(1H,m,H?3),1.00(3H,s,H?19),0.95(3H,d,J=6.5Hz,H?21),0.87(3H,d,J=6.5Hz,H?27),0.86(3H,d,J=6.5Hz,H?26),0.68(3H,s,H?18);13C?NMR(CD3COCD3,150MHz):38.2(CH2,C?1),32.4(CH2,C?2),71.6(CH,C?3),43.3(CH2,C?4),142.3(C,C?5), 121.5(CH,C?6),32.5(CH2,C?7),32.5(CH,C?8),51.8(CH,C?9),37.2(C,C?10),21.3(CH2,C?11),40.5(CH2,C?12),43.3(C,C?13),57.0(CH,C?14),24.9(CH2,C?15),28.9(CH2,C?16),57.6(CH,C?17),12.2(CH3,C?18),19.8(CH3,C?19),36.6(CH,C?20),19.1(CH3,C?21),36.2(CH2,C?22),24.5(CH2,C?23),40.2(CH2,C?24),28.6(CH,C?25),23.0(CH3,C?26),22.8(CH3,C?27);ESI?MS?m/z387[M+H]+；经与标准品对照确定为胆甾醇；化合物(2):白色无定型粉末，经与标准品TLC对照得以确定为胆甾烷醇；化合物(3):白色无定型粉末;1H?NMR(CDCl3,600MHz):5.79(1H,m,H?20),4.97(1H,s,H?21),4.96(1H,m,H?21),1.02(3H,s,H?19),0.61(3H,s,H?18);ESI?MS?m/z301[M+H]+；经与标准品对照确定为孕甾酮；三者结构式如下所示：FDA00003293339500021.jpg...
【技术特征摘要】
【专利技术属性】
技术研发人员：徐艳，孙雪萍，童万平，王志成，
申请(专利权)人：广西壮族自治区海洋研究所，
类型：发明
国别省市：
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