一种树脂糖苷类化合物的提取方法技术

本发明专利技术涉及一种树脂糖苷类化合物的提取方法，属于中药技术领域。所述树脂糖苷类化合物的提取方法为：将药材样品进行氯仿‑水加热回流提取，接着经甲醇、氯仿依次离心去除沉淀，脱色，经硅胶柱层析、凝胶层析提纯，干燥，即得。本发明专利技术提供了一种可以快速提取旋花科植物中的树脂糖苷的方法，该方法操作简单，溶剂用量少，纯度和收率高，为快速提纯树脂糖苷类化合物提供重要参考。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于中药
，涉及一种树脂糖苷类化合物的提取方法。
技术介绍
树脂糖苷是旋花科牵牛属植物的主要活性成分，是一种非常珍贵的中药物质，组成主要是由有修饰性脂肪酸、寡糖链和脂肪酸形成的大环内酯，组成寡糖链的糖主要有D-葡萄糖(D-glucose)，L-鼠李糖(L-rhamnose)及D-岩藻糖(D-fucose)和D-鸡纳糖(D-quinovose)；脂肪酸包括修饰性脂肪酸(取代糖基的不同位置上)和长链脂肪酸(形成大环内酯)。形成大环内酯的脂肪酸主要有四种，Jalapinolicacid(药喇叭脂酸，即11S-羟基-十六烷酸)，Convolvulinolicacid(旋花醇酸，即11S-羟基-十四烷酸)，Ipurolicacid(3S，11S-双羟基-十四烷酸)及3S，11S-双羟基-十六烷酸。树脂糖苷一般由一个脂肪酸作为苷元与不同数量、种类的单糖形成内酯，由于连接位置的变化以及多种不同取代基酯化位置的变化，使树脂糖苷类化合物结构多样。中国专利CN102766180B公开了虎耳草中两个活性单体化合物的提纯方法及其产品的用途，提纯手段主要是将虎耳草用乙醇提取，提取物依次用石油醚、乙酸乙酯萃取，乙酸乙酯萃取物再采用硅胶柱层析、中压柱层析、凝胶柱层析等分离手段，从虎耳草中分离得到两个单体化合物(槲皮素3-0-β-L-鼠李糖苷、槲皮素5-O-β-D-葡萄糖苷)。该专利技术工艺流程操作单元多，使用极性较小的洗脱剂，提纯速度较慢。国际中医中药杂志2012年11月第34卷第11期中公开了从茑萝种子中分离得到树脂糖苷和一种新的四氢呋喃衍生物的一则快讯，文章中提到的分离方法多次涉及柱色谱分离，操作复杂，工艺流程长等缺点。目前，由于树脂糖苷与黄酮类、生物碱类和蒽醌类等有机物溶解度相差不大，现有的技术分离技术提纯不彻底，工艺较为复杂。因此，研究和开发出一种纯度和收率高的树脂糖苷类化合物的提取方法是当前研究的难题。
技术实现思路
为了解决现有技术的不足，本专利技术的目的是在于提供一种快速提取树脂糖苷类化合物的方法，可以大大的节约试剂和时间，为从旋花科植物中提取树脂糖苷提供了一种操作简单、成本低的通用方法。本专利技术提供了一种树脂糖苷类化合物的提取方法，包括以下步骤：S1粗提纯：将旋花科植物除杂烘干，粉碎至15-25目，得粗粉，用氯仿-水混合液加热回流提取，所述氯仿-水混合液中氯仿体积百分比为80-100％，过滤，将提取液减压浓缩，冷冻干燥得到粗品A；S2沉淀除杂：将粗品A加入甲醇完全溶解后，离心，取上清液减压浓缩，冷却干燥，得细粉，将细粉加入氯仿完全溶解，离心，取上清液B；S3脱色处理：将上清液B进行活性炭脱色处理20-60分钟，过滤，将滤液减压浓缩，冷冻干燥得到粉末C；S4精提纯：将粉末C进行硅胶柱层析，采用氯仿-甲醇混合液或二氯甲烷-甲醇混合液洗脱，收集洗脱液，将洗脱液减压浓缩，冷冻干燥后再进行凝胶层析，采用甲醇洗脱，收集第一和第二柱体积的洗脱液，合并两柱洗脱液，减压浓缩，冷冻干燥，即得。进一步的，所述步骤S1中氯仿-水混合液的用量与粗粉的料液比为2-5ml:1g。进一步的，所述步骤S1中加热回流提取1-3次，每次1-3小时。进一步的，所述步骤S2中的甲醇与粗品A液固比为2-4ml：1g，氯仿与粗品A液固比为2-4ml：1g。进一步的，所述步骤S2中的离心条件为：600-1000转/分钟，离心5-15分钟。进一步的，所述步骤S3中的活性炭粒度为20-50目。进一步的，所述步骤S4中的硅胶柱层析采用干法装柱，所述拌样硅胶与粉末C重量比为1-3:1，装柱硅胶与粉末C重量比为30-100:1，所述硅胶粒度为100-300目。进一步的，所述氯仿-甲醇混合液中氯仿与甲醇的体积比为30：1-5：1。进一步的，所述二氯甲烷-甲醇混合液中二氯甲烷与甲醇的体积比为30：1-5：1。旋花科植物主要包括黄酮类化合物，生物碱类化合物，蒽醌类化合物和树脂糖苷类化合物。经排除试验发现，采用本专利技术提供的树脂糖苷类化合物的提取方法可以快速提取旋花科植物中的树脂糖苷类化合物，而且采用本专利技术提供的树脂糖苷类化合物的提取方法提取的树脂糖苷类化合物的收率大于2.65％，是一种较为理想的树脂糖苷类化合物的提取方法。与现有技术相比，本专利技术提供的树脂糖苷类化合物的提取方法，可以大大的节约试剂和时间，为从旋花科植物中提取树脂糖苷提供了一种操作简单、成本低的通用方法。具体实施方式下面通过实施例来进一步说明本专利技术，但不局限于以下实施例。实施例1、一种树脂糖苷类化合物的提取方法S1粗提纯：将白鹤藤除杂烘干，粉碎至20目，得粗粉，用氯仿-水混合液加热回流提取，所述氯仿-水混合液的用量与粗粉的料液比为4ml:1g，所述氯仿-水混合液中氯仿体积百分比为90％，所述加热回流提取3次，每次2小时，过滤，将提取液减压浓缩，冷冻干燥得到粗品A；S2沉淀除杂：将粗品A加入甲醇完全溶解后，所述甲醇与粗品A液固比为3ml：1g，在800转/分钟的条件下离心10分钟，取上清液减压浓缩，冷却干燥，得细粉，将细粉加入氯仿完全溶解，所述氯仿与粗品A液固比为3ml：1g，在800转/分钟的条件下离心10分钟，取上清液B；S3脱色处理：将上清液B进行活性炭脱色处理40分钟，所述活性炭粒度为40目，过滤，将滤液减压浓缩，冷冻干燥得到粉末C；S4精提纯：将粉末C进行硅胶柱层析，所述硅胶柱层析中拌样硅胶与粉末C重量比为2:1，装柱硅胶与粉末C重量比为70:1，所述硅胶粒度为200目，采用氯仿-甲醇混合液洗脱，收集洗脱液，所述氯仿-甲醇混合液中氯仿与甲醇的体积比为25：1，将洗脱液减压浓缩，冷冻干燥后再进行凝胶层析，采用甲醇洗脱，收集第一和第二柱体积的洗脱液，合并两柱洗脱液，减压浓缩冷冻干燥，即得。实施例2、一种树脂糖苷类化合物的提取方法S1粗提纯：将白鹤藤除杂烘干，粉碎至15目，得粗粉，用氯仿-水混合液加热回流提取，所述氯仿溶液用量与粗粉的料液比为2ml:1g，所述加热回流提取1次，每次3小时，过滤，将提取液减压浓缩，冷冻干燥得到粗品A；S2沉淀除杂：将粗品A加入甲醇完全溶解后，所述甲醇与粗品A液固比为2ml：1g，在600转/分钟的条件下离心15分钟，取上清液减压浓缩，冷却干燥，得细粉，将细粉加入氯仿完全溶解，所述氯仿与粗品A液固比为4ml：1g，在1000转/分钟的条件下离心5分钟，取上清液B；S3脱色处理：将上清液B进行活性炭脱色处理60分钟，所述活性炭粒度为20目，过滤，将滤液减压浓缩，冷冻干燥得到粉末C；S4精提纯：将粉末C进行硅胶柱层析，所述硅胶柱层析中拌样硅胶与粉末C重量比为3:1，装柱硅胶与粉末C重量比为30:1，所述硅胶粒度为100目，采用氯仿-甲醇混合液洗脱，收集洗脱液，所述氯仿-甲醇混合液中氯仿与甲醇的体积比为30：1，将洗脱液减压浓缩，冷冻干燥后再进行凝胶层析，采用甲醇洗脱，收集第一和第二柱体积的洗脱液，合并两柱洗脱液，减压浓缩冷冻干燥，即得。实施例3、一种树脂糖苷类化合物的提取方法S1粗提纯：将白鹤藤除杂烘干，粉碎至25目，得粗粉，用氯仿-水混合液加热回流提取，所述氯仿-水混合液的用量与粗粉的料液比为5ml:1g，所述氯仿-水混合液中氯仿体积百分比为80％，所述加热回流提本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种树脂糖苷类化合物的提取方法，其特征在于，包括以下步骤：S1粗提纯：将旋花科植物除杂烘干，粉碎至15‑25目，得粗粉，用氯仿‑水混合液加热回流提取，所述氯仿‑水混合液中氯仿的体积百分比为80‑100％，过滤，将提取液减压浓缩，冷冻干燥，得粗品A；S2沉淀除杂：将粗品A加入甲醇完全溶解后，离心，取上清液减压浓缩，冷却干燥，得细粉，将细粉加入氯仿完全溶解，离心，得上清液B；S3脱色处理：将上清液B进行活性炭脱色处理20‑60分钟，过滤，将滤液减压浓缩，冷冻干燥，得粉末C；S4精提纯：将粉末C进行硅胶柱层析，采用氯仿‑甲醇混合液或二氯甲烷‑甲醇混合液洗脱，收集洗脱液，将洗脱液减压浓缩，冷冻干燥后再进行凝胶层析，采用甲醇洗脱，收集第一和第二柱体积的洗脱液，合并两柱洗脱液，减压浓缩，冷冻干燥，即得。

【技术特征摘要】
1.一种树脂糖苷类化合物的提取方法，其特征在于，包括以下步骤：S1粗提纯：将旋花科植物除杂烘干，粉碎至15-25目，得粗粉，用氯仿-水混合液加热回流提取，所述氯仿-水混合液中氯仿的体积百分比为80-100％，过滤，将提取液减压浓缩，冷冻干燥，得粗品A；S2沉淀除杂：将粗品A加入甲醇完全溶解后，离心，取上清液减压浓缩，冷却干燥，得细粉，将细粉加入氯仿完全溶解，离心，得上清液B；S3脱色处理：将上清液B进行活性炭脱色处理20-60分钟，过滤，将滤液减压浓缩，冷冻干燥，得粉末C；S4精提纯：将粉末C进行硅胶柱层析，采用氯仿-甲醇混合液或二氯甲烷-甲醇混合液洗脱，收集洗脱液，将洗脱液减压浓缩，冷冻干燥后再进行凝胶层析，采用甲醇洗脱，收集第一和第二柱体积的洗脱液，合并两柱洗脱液，减压浓缩，冷冻干燥，即得。2.根据权利要求1所述的树脂糖苷类化合物的提取方法，其特征在于，所述步骤S1中氯仿-水混合液与粗粉的料液比为2-5ml:1g。3.根据权利要求1所述的树脂糖苷类化合物的提取方法，其特征在于，所述步骤S1中加热回...

【专利技术属性】
技术研发人员：尹永芹，潘洁桃，严优芍，崔红花，郭丽冰，陈艳芬，
申请(专利权)人：广东药科大学，
类型：发明
国别省市：广东;44