一种液态型凝乳酶制剂的制备方法技术

本发明专利技术公开一种液态型凝乳酶制剂的制备方法。包括以下步骤：（1）以解淀粉芽孢杆菌CCTCC?NO：M2011045或枯草芽孢杆菌CCTCC?NO：M2010259为发酵菌株制备发酵液；（2）板框压滤，固液分离；（3）蒙脱石吸附；（4）微滤；（5）超滤浓缩；（6）向浓缩酶液中添加终浓度20～40%（w/v）的蔗糖或海藻糖，终浓度10～30%（w/v）的甘油或山梨醇以及终浓度0.01～0.05%（w/v）的氯化钙，混匀，制得成品。本发明专利技术方法凝乳酶活力回收率高，同时能有效去除酶液中的蛋白酶等杂质和残留菌体，所制酶制剂具有良好的品质和稳定性，酶专一性强，保存期长，安全无毒。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于生物发酵工程和酶制剂
，具体涉及一种从解淀粉芽孢杆菌或枯草芽孢杆菌发酵液中提取制备液态型凝乳酶制剂的方法。
技术介绍
凝乳酶是乳酪生产中的关键酶，它使原奶凝固的过程分为两个阶段:酪蛋白微胶粒中α-酪蛋白和β-酪蛋白在K-酪蛋白作用下不会自发凝结，首先，凝乳酶专一性地将K-酪蛋白分解成p-κ-酪蛋白和一种巨肽，使酪蛋白的微胶粒失去稳定性；然后，在Ca2+作用下，P-κ-酪蛋白、α-酪蛋白和β-酪蛋白之间形成化学键从而产生沉淀。传统的凝乳酶制备方法是利用牛犊第四胃(皱胃)提取制作，但随着乳酪产业不断扩大，单纯依靠宰杀幼畜来生产凝乳酶已经不能满足现代工业生产的需求。上世纪五十年代以来，国内外研究者一 直努力寻求新的凝乳酶来源，目前除动物凝乳酶外，还发现了植物凝乳酶(无花果树液、菠萝果实等)和微生物凝乳酶(主要来源于真菌、细菌)，其中，微生物的生长特性使得微生物凝乳酶具有广阔的发展前景，得到越来越多研究者的关注。本申请人在前期研究中获得两株凝乳酶高产菌株(参见《一株枯草芽孢杆菌及用该菌株发酵生产凝乳酶的方法》，申请号:CN 201010504167.3 ;《一株解淀粉芽本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种液态型凝乳酶制剂的制备方法，其特征在于包括以下步骤：（1）制备发酵液：以解淀粉芽孢杆菌CCTCC?NO：M?2011045或枯草芽孢杆菌CCTCC?NO：M?2010259为发酵菌株，通过液态发酵制得发酵液；（2）固液分离：将步骤（1）所得发酵液用625~1250目滤布的板框压滤，取滤液，所述压滤速率为3~6吨/小时；（3）蒙脱石吸附：向步骤（2）所得滤液中添加终浓度0.5~5%（w/v）的蒙脱石，充分混匀，室温静置10~30min，离心除去蒙脱石，收集上清液；（4）微滤：将步骤（3）所得上清液经孔径0.5μm或1.0μm微孔滤膜错流过滤，操作压力0.2~0.3MPa，收集滤液；（5）超滤...

【技术特征摘要】
1.一种液态型凝乳酶制剂的制备方法，其特征在于包括以下步骤: (1)制备发酵液:以解淀粉芽孢杆菌CCTCCNO:M 2011045或枯草芽孢杆菌CCTCC NO:M 2010259为发酵菌株，通过液态发酵制得发酵液； (2)固液分离:将步骤(I)所得发酵液用625 1250目滤布的板框压滤，取滤液，所述压滤速率为3飞吨/小时； (3)蒙脱石吸附:向步骤(2)所得滤液中添加终浓度0.5^5% (w/v)的蒙脱石，充分混匀，室温静置l(T30min，离心除去蒙脱石，收集上清液； (4)微滤:将步骤(3)所得上清液经孔径0.5 μ m或1.0 μ m微孔滤膜错流过滤，操作压力0.2 0.3MPa，收集滤液； (5)超滤浓缩:将步骤(4)所得滤液经孔径0.002 μ m超滤膜错...

【专利技术属性】
技术研发人员：丁明亮，王博达，王楠，王清伟，丁重阳，顾正华，张梁，石贵阳，
申请(专利权)人：江南大学，
类型：发明
国别省市：