一种用于转基因抗虫玉米基因特异性检测的质粒分子及其制备和应用方法技术

技术编号:8932125 阅读:248 留言:0更新日期:2013-07-18 00:00
本发明专利技术涉及一种用于转基因抗虫玉米基因特异性检测的质粒分子及其制备和应用方法,质粒分子以pMD19-T为载体,通过连接酶连接PCR扩增产物,PCR扩增产物包括含转基因玉米MIR162Vip3Aa20基因特异性序列和玉米内标基因zSSIIb特异性序列;其构建需先设计引物,然后进行PCR扩增获得含转基因玉米MIR162Vip3Aa20基因特异性序列和玉米内标基因zSSIIb特异性序列的DNA片段,将得到的PCR产物连接到pMD19-T载体上,转化至大肠杆菌DH5α培养后提取质粒得到质粒分子pVZ。本发明专利技术构建的质粒分子pVZ可用于检测玉米及其相关产品中转基因玉米MIR162含量,其适用性强,稳定性好,具有极高的应用价值与市场前景。

Plasmid molecule for gene specific detection of transgenic insect resistant maize and preparation and application method thereof

The invention relates to a method for plasmid molecule and its preparation and application method of transgenic maize gene specific detection of plasmid with vector pMD19-T amplification products were detected by ligase PCR, PCR amplification products containing genetically modified maize MIR162Vip3Aa20 gene specific sequence and maize endogenous gene zSSIIb specific sequence; its construction must first design the primers, then amplified by PCR containing genetically modified maize MIR162Vip3Aa20 gene specific sequence and maize endogenous gene zSSIIb specific sequences of DNA fragments, the PCR products get connected to the pMD19-T vector, transformed into E.coli DH5 after culture plasmid pVZ was extracted by. The plasmid pVZ of the invention can be used for detecting the MIR162 content of transgenic maize in maize and related products, and has the advantages of strong applicability, good stability, high application value and market prospect.

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于分子生物学领域,涉及转基因玉米MIR162Vip3Aa20基因质粒分子pVZ的构建及其在转基因玉米定量检测中的应用。
技术介绍
截至2011年,全球转基因种植面积已达到1.6亿公顷,其中转基因玉米种植面积居第一位。作为我国最重要的粮食作物之一,国内转基因玉米研发工作进展也较为迅速,目前有多个转基因玉米优良品系进入环境释放阶段,申请商业化种植,其中转植酸酶玉米已经获得安全评价证书。转基因作物迅猛发展的同时,也伴随着人们对其环境安全和食用安全的关注和质疑。研究、制定转基因作物及其产品成分检测标准,对于加强转基因作物安全管理,防止转基因作物未经安全批准进入生产流通环节;保障转基因生物安全和人类健康,保护消费者利益;消除公众对于转基因作物安全性的疑虑,营造良好的转基因作物产业化氛围具有重要意义。质粒分子( Plasmid Molecule)作为一种新的DNA标准物质具有容易获得、使用方便、纯度易控制和均匀性好等优点,被越来越多的应用在转基因产品定量检测中。研究、构建转植酸酶基因玉米阳性质粒分子,对于加强该品种的安全管理,保护消费者利益,消除公众对于转基因作物安全性的疑虑,营造本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种用于转基因抗虫玉米基因特异性检测的质粒分子,其特征是,以pMD19?T为载体,通过连接酶连接PCR扩增产物,PCR扩增产物包括含转基因玉米MIR162Vip3Aa20基因特异性序列和玉米内标基因zSSIIb特异性序列。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员:孙红炜杨淑珂张广远高瑞徐晓辉李凡路兴波
申请(专利权)人:山东省农业科学院植物保护研究所
类型:发明
国别省市:

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