一种重金属低积累的转基因植物的培育方法技术

本发明专利技术涉及转基因植物的培育，具体提供了一种重金属低积累的转基因植物的培育方法，通过异源表达酵母中重金属外运通道蛋白以培育低积累重金属安全农作物。所述培育方法具体通过根表皮细胞膜特异性启动子驱动酵母Ycf1p基因在农作物根系的细胞膜中异源表达，使得植物能够将进入植物根系的重金属经细胞膜上的金属外向转运蛋白排出到植物体外，获得重金属低积累的农作物，从而达到在重金属污染的土壤上，通过种植低吸收、低积累重金属的作物品种，生产符合安全标准的农产品的目的。其中，所述酵母Ycf1p基因的核苷酸序列如SEQ ID No.1所示，Prp1启动子的核苷酸序列如SEQ ID No.2所示。

【技术实现步骤摘要】
一种重金属低积累的转基因植物的培育方法
本专利技术涉及转基因植物的培育，具体地说，涉及一种重金属低积累的转基因植物的培育方法。
技术介绍
在我国，随着工农业生产的发展，土壤重金属污染问题已经越来越突出。土壤是植物生长需要营养物质的储存库，因而土壤中重金属元素含量的多少在很大程度上决定了农作物受污染的程度。重金属污染农田的治理是目前国际上难点和热点研究领域之一。科学家们利用固定、过滤、离子交换及不溶化固定等多种理化学方法，试图净化重金属污染的土壤，但这些技术的应用需要高价的装备和技术。况且像农耕土壤一样，污染轻微且污染面积大的地方很难实际应用。近几年，对于重金属污染农田治理的研究工作主要集中在用于植物修复的超级累植物筛选，这些植物大部分是野生的，生长速度慢，生物量低，修复时间长，田间应用存在不确定性和种植难度。实际生产中投入到重金属污染土壤中的超积累植物的净化效果远不如实验室条件下取得的效果。鉴于我国实际国情，将大面积中-轻度污染的农田停止农作，进行长时间的植物修复或其它成本昂贵工程修复显然是不现实的。2006S.Herbette等人提出了污染安全的品种pollution-safecu本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种重金属低积累的转基因植物的培育方法，其特征在于，包括如下步骤：(1)重组表达载体的构建：将酵母Ycf1p基因克隆到农杆菌植物双元表达载体上，在限制性内切酶的作用下连接含有Prp1启动子的T载体，得到在Prp1启动子驱动下表达Ycf1p基因的表达载体；(2)转基因植株的构建：将所得表达载体转入植物愈伤组织中，用含诱导剂和农杆菌的培养液进行转化，转化后的材料经过共培养‑筛选‑分化‑生根‑转基因苗的锻炼和移栽，筛选转基因阳性植株；其中，所述酵母Ycf1p基因的核苷酸序列如SEQ ID No.1所示，Prp1启动子的核苷酸序列如SEQ ID No.2所示。

【技术特征摘要】
1.一种重金属镉低积累的转基因水稻的培育方法，其特征在于，包括如下步骤：(1)重组表达载体的构建：将酵母Ycf1p基因克隆到农杆菌植物双元表达载体上，在限制性内切酶的作用下连接含有Prp1启动子的T载体，得到在Prp1启动子驱动下表达Ycf1p基因的表达载体；(2)转基因植株的构建：将所得表达载体转入植物愈伤组织中，用含诱导剂和农杆菌的培养液进行转化，转化后的材料经过共培养-筛选-分化-生根-转基因苗的锻炼和移栽，筛选转基因阳性植株；其中，所述酵母Ycf1p基因的核苷酸序列如SEQIDNo.1所示，Prp1启动子的核苷酸序列如SEQIDNo.2所示。2.根据权利要求1所述的培育方法，其特征在于，所述步骤(1)具体为：用内切酶SacI与SalI将Ycf1p克隆到中间载体pGEM-5Z上得到pYcf1p-5Z，将pYcf1p-5Z用SalI和SpeI酶切后，回收Ycf1p基因片段，再经T4连接酶连接到经SalI和SpeI酶切后的植物表达载体pCAMBIA1301上，再由BamHI酶切表达载体pCAMBIA1301和含有Prp1启动子的T载体，连接后...

【专利技术属性】
技术研发人员：栾云霞，陆安祥，王纪华，李成，付海龙，
申请(专利权)人：北京农业质量标准与检测技术研究中心，
类型：发明
国别省市：北京;11