本发明专利技术涉及sd-rxRNA以及rxRNAori的眼部给予。
【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】
本专利技术涉及RNA干扰(RNAi)领域。本专利技术更具体地涉及具有改进的体内递送特性的核酸分子的眼部给予以及它们在有效基因沉默方面的用途。
技术介绍
互补寡核苷酸序列是前景光明的治疗剂以及在阐明基因功能方面的有用研究工具。然而，现有技术中寡核苷酸分子罹受一些问题，这些问题可以阻碍它们的临床开发，并且频繁地使得在体内使用此类组合物难以达到预期的有效的基因表达(包括蛋白合成)抑制。一个主要问题是这类化合物至细胞与组织的递送。常规的双链RNAi化合物(19-29个碱基长)形成一种高度带负电的大约1.5nm乘10_15nm大小的刚性螺旋。这种杆条式分子不能通过细胞膜并且结果是在体外以及体内具有极其有限的效能。结果，所有常规的RNAi化合物都要求某种类型的递送载体以促进其组织分布与细胞吸收。这被认为是RNAi技术的一个主要限制。已经存在许多 尝试来对寡核苷酸应用化学修饰以改进其细胞吸收特性。此种修饰之一是将一种胆固醇分子附接至该寡核苷酸上。这种方法首先由Letsinger等人在1989年报道。之后，ISIS制药公司(ISIS Pharmaceuticals, Inc.)(卡尔斯巴德,加利福尼亚(Carlsbad，CA))报道了在将该胆固醇分子附接至该寡核苷酸方面的更先进的技术(Manoharan,1992)。随着九十年代后期siRNAs的发现，在这些分子上进行了类似类型的修饰以增强其递送特征曲线(profile)。在文献中出现了共轭至轻度修饰(Soutschek, 2004)以及重度修饰(Wolfrum, 2007)的siRNAs上的胆固醇分子。Yamada等人,2008还报道了进一步改进胆固醇介导的siRNAs吸收的高级连接物化学物质的用途。尽管所有这类努力，在生物流体的存在下这些类型的化合物的吸收似乎受到抑制，导致体内基因沉默的效能高度受限，由此限制了这些化合物在临床环境中的应用。专利技术概述在此描述了用于向眼睛有效地体内给予sd-rxRNA分子的方法以及组合物。出人意料地，sd-rxRNA分子的眼内(例如,玻璃体内以及视网膜下)给予导致该sd-rxRNA在视网膜中所有细胞层的分布与吸收。对于治疗与眼睛有关的失调与病状，这些分子具有广泛应用。本专利技术的多个方面涉及一种用于将核酸递送至对其有需要的受试者的眼睛的方法，这些方法包括以一种有效量向该受试者的眼睛给予一种Sd-rxRNA，该有效量促进该sd-rxRNA在该眼睛中的RNA干扰。在一些实施方案中，该sd-rxRNA的给予是玻璃体内。在一些实施方案中，该方法是用于治疗一种眼部失调。在某些实施方案中，该眼部失调是血管渗漏、新生血管形成、与年龄相关的黄斑变性(AMD)、脉络膜新生血管形成(湿性AMD)、地图状萎缩(晚期干性AMD)、早期至中期干性AMD、术后囊样黄斑水肿(CME)、非增生性糖尿病视网膜病变(NPDR)、糖尿病性黄斑水肿(DME)、视网膜静脉阻塞继发性黄斑水肿(RVO)、增生性糖尿病视网膜病变(TOR)、青光眼、新生血管性青光眼(NVG)、早产儿视网膜病(ROP)、纤维增生性视网膜疾病、增生性玻璃体视网膜病变(PVR)、视网膜前膜/玻璃体黄斑粘连、视网膜退行性疾病、色素性视网膜炎、视网膜血管阻塞性障碍、视网膜静脉阻塞、视网膜动脉阻塞、视网膜母细胞瘤、由于瘢痕的小梁切除术失败或眼色素层炎.在一个实施方案中，该眼部失调是AMD。在另一个实施方案中，该眼部失调是DME。在再另一个实施方案中，该眼部失调是PVR。在又另一个实施方案中，该眼部失调是由于瘢痕的小梁切除术失败。在某些实施方案中，该sd-rxRNA是针对一种为以下各项进行编码的基因:VEGF、MAP4K4、PDGF-B, SDF-U IGTA5、ANG2、CTGF、HIF-1 a、mT0R、SDF-U PDGF-B, SPPl、PTGS2 (COX-2)、TGF ^ UTGF^ 2、补体因子 3 或 5、PDGFRa、PPIB 或 myc,或其组合。在一些实施方案中，该sd-rxRNA是针对一种编码VEGF的基因。在某些实施方案中，该sd-rxRNA是针对一种选自表2中各序列的序列。在一个实施方案中，该sd-rxRNA是针对一种序列，该序列包含一种选自表2中各序列的序列的至少12个连续核苷酸。在另一个实施方案中，该sd-rxRNA包含一种选自表3_8或10中各序列的序列的至少12个连续核苷酸。在再另一个实施方案中，该sd-rxRNA的正义链包含SEQ ID NO: 1317或SEQID NO: 1357的序列的至少12个连续核苷酸。在又另一个实施方案中，该sd-rxRNA的反义链包含SEQ ID NO: 13 18或SEQ ID NO: 1358的序列的至少12个连续核苷酸。在另外的实施方案中，该sd-rxRNA的正义链包含SEQ ID NO: 1317并且该sd-rxRNA的反义链包含SEQ ID NO: 1318。在一个实施方案中，该sd-rxRNA的正义链包含SEQ ID NO: 1357并且该sd-rxRNA的反义链包含SEQ IDNO: 1358 在另一个实施方案中，该sd-rxRNA的正义链包含SEQ ID NO: 1379并且该sd-rxRNA的反义链包含SEQ ID NO: 1380。在再另一个实施方案中，该sd-rxRNA的正义链包含SEQ ID NO: 1397并且该sd-rxRNA的反义链包含SEQ IDNO:1398。在某些实施方案中，该sd-rxRNA是针对一种编码CTGF的基因。在一个实施方案中，该sd-rxRNA的反义链包含SEQ ID N0:948或SEQ ID N0:964的序列的至少12个连续核苷酸。在另一个实施方案中，该sd-rxRNA的正义链包含SEQ ID N0:947或SEQ ID NO:963的序列的至少12个连续核苷酸。在一些实施方案中，将两种或更多种不同的sd-rxRNA给予该受试者的眼，这些sd-rxRNA针对为两种或更多种蛋白进行编码的基因。在一个实施方案中，该sd-rxRNA是针对VEGF以及CTGF。在另一个实施方案中，该sd-rxRNA是针对VEGF以及PTGS2 (C0X-2)。在某些方面，以上实施方案任一个中的sd-rxRNA是经过疏水修饰。在一些实施方案中，该sd-rxRNA连接至一种或多种疏水轭合物上。在某些方面，以上实施方案任一个中的sd-rxRNA包括至少一个5-甲基C或U修饰。本专利技术的其他方面涉及用于将一种核酸递送至对其有需要的受试者的眼睛的方法，这些方法包括以一种有效量向该受试者的眼睛给予一种rxRNAori，该有效量促进该rxRNAori在该眼睛中的RNA干扰。在一个实施方案中，该rxRNAori是针对VEGF。在另一个实施方案中，该rxRNAori是针对一种序列，该序列包含一种选自表2中各序列的序列的至少12个连续核苷酸。在再另一个实施方案中，该rxRNAori的正义链包含SEQ ID NO: 13或SEQ ID NO: 28的序列的至少12个连续核苷酸。在又另一个实施方案中，该rxRNAori的反义链包含SEQ ID NO: 1377或SEQ ID NO: 1378的序列的至少12个连续核苷酸。本专利技术的一些本文档来自技高网...
【技术保护点】
【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】...
【专利技术属性】
技术研发人员：林恩·利伯蒂娜，阿纳斯塔西娅·赫沃罗瓦，威廉·萨洛蒙，琼安·卡门斯，德米特里·萨马尔斯基，托得·M·伍尔夫，詹姆斯·卡尔迪亚，
申请(专利权)人：雷克西制药公司，
类型：
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