一种黄酮碳苷提取物及其制备方法技术

本发明专利技术公开了一种高纯度黄酮碳苷提取物的制备方法，其主要步骤如下：选取富含黄酮碳苷的植物药材，采用水或乙醇-水混合溶媒进行提取，并可根据需要进一步分离和纯化，浓缩，获得黄酮碳苷提取物浓缩液；该浓缩液稀释溶解于适量酸性水或含醇水溶液中进行酸水解反应，所得提取物水解液根据需要进一步采用大孔树脂等填料进行分离和纯化，获得高纯度(大于60％)黄酮碳苷提取物。本发明专利技术采用控制酸水解技术，可以将植物中其它黄酮碳苷衍生物转化为相应黄酮碳苷类成分，从而显著提高黄酮碳苷类成分的含量和纯度，工艺简洁、可操作性强，易于实现产业化放大。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及一种黄酮碳苷提取物，本专利技术同时涉及该黄酮碳苷提取物的制备方法，属药品和保健食品领域。
技术介绍
黄酮碳苷是一类由黄酮苷元的6或8位与糖基的I位通过碳键连接而成的黄酮苷类成分，代表性化合物例如牡荆苷、异牡荆苷、荭草苷、异荭草苷等。本类成分具有较好的抗氧化、抗炎等药理活性，是多种药用植物的主要有效成分之一，例如山楂叶、竹叶黄酮、金莲花、荭草、蓝莓等。采用大孔树脂精制、柱层析或高速逆流层析等分离技术制备该类天然产物的报道已经很丰富。但 由于植物中黄酮碳苷及其它共存成分组成复杂，其制备工艺复杂、产品纯度和总转移率较低，影响了该类成分的实际应用。本专利技术人长期从事金莲花总黄酮的研制工作。前期研究证实金莲花总黄酮主要含有荭草苷和牡荆苷及其酯类衍生物等成分，建立了该类成分的大孔树脂精制工艺，参见刘江云等“一种黄酮碳苷组合物及其制备方法和用途”(专利申请号CN201110055655.5)。在进一步研制过程中，首次发现采用控制酸水解技术，可以将其它黄酮碳苷衍生物转化为相应黄酮碳苷类成分，从而显著提高黄酮碳苷类成分的含量和纯度。经进一步深入研究，完成了本专利技术。
技术实现思路
本专利技术的目的是提供一种高纯度的黄酮碳苷提取物。本专利技术提供的制备黄酮碳苷提取物的方法包括以下工艺步骤:(I)选取含有黄酮碳苷的植物原料，采用水或乙醇-水混合溶媒进行提取；并可根据需要进一步采用大孔树脂、聚酰胺、硅胶、反相硅胶等填料进行分离和纯化，浓缩，获得富含黄酮碳苷的提取物浓缩液。(2)选取(I)所得提取物浓缩液，稀释溶解于适量水或含醇水溶液中，用适量酸调节溶液酸度，在60-100°C反应1-24小时，用适量碱溶液中和至PH4-7，得提取物水解液。(3)选取(2)所得提取物水解液，根据需要进一步采用大孔树脂、聚酰胺、硅胶、反相硅胶等填料进行分离和纯化，获得高纯度黄酮碳苷提取物。所述工艺步骤(I)中含有黄酮碳苷的植物原料为任意一种植物，如山楂叶、竹叶黄酮、金莲花、荭草、蓝莓等，特征在于该植物中含有所需的目标黄酮碳苷类成分和/或其衍生物，所述目标黄酮碳苷类成分为荭草苷、异荭草苷、牡荆苷、异牡荆苷中的任意一种以上。提取溶媒可采用常规的水或乙醇-水(30-95%)混合溶媒提取，提取液合并，浓缩，得所需提取物浓缩液。为进一步提高提取液中黄酮碳苷含量，可根据需要，运用文献报道或公知的方法，采用大孔树脂、聚酰胺、硅胶、反相硅胶等填料的一种或多种进行分离和纯化，浓缩，获得富含黄酮碳苷的提取物浓缩液。所述工艺步骤(2)中提取物浓缩液稀释溶解于适量水或含醇水溶液中，所述醇可为甲醇、乙醇或丙醇，其中优选乙醇，更优选乙醇浓度为20-70%。所述酸可选用盐酸、硫酸等强酸，所述溶液酸度范围为0.1-3.0M，优选0.5-2.0M范围。所述反应温度范围60-100°C，更优选65-85°C范围。所述反应时间根据具体反应条件设定，以目标产物含量达到最高值、同时副反应较低为宜，一般反应时间1-24小时，更优选反应时间2-8小时。所述中和反应的碱优选氢氧化钠。所述工艺步骤(3)中所得提取物水解液可根据需要，采用文献报道或公知的方法，采用大孔树脂、聚酰胺、硅胶、反相硅胶等填料进行分离和纯化，浓缩，干燥，获得高纯度黄酮碳苷提取物，特征在于所述黄酮碳苷单体成分或其组分物含量采用液相检测大于60%。植物中的黄酮碳苷类成分常以多种黄酮氧苷、黄酮碳苷酯等其它类似物共存，因而其分离提纯难度大、相对含量较低。本专利技术在对金莲花总黄酮研究过程中，发现酸水解后荭草苷、牡荆苷等黄酮碳苷类组分含量显著升高，同时其它杂质成分显著减少，显著提高了该类组分的纯化工作和收率。这是由于黄酮碳苷酯或其寡糖苷衍生物在酸性条件下容易部分水解转化为黄酮碳苷，其它黄酮氧苷在酸性条件下容易水解后纯化除去；黄酮碳苷如荭草苷、牡荆苷一般难以水解，而在较为剧烈的酸性和温度条件下会发生Wessely-Moser重排，相互转化为其异构体混合物。本专利技术通过工艺参数优化，控制反应所需溶剂、温度、酸度和反应时间，可以在获得较高转化率黄酮碳苷组分的同时，减少或避免副反应的发生。根据单体和金莲花总黄酮组分水解研究结果，可以证明该酸水解转化反应同时适用于含有黄酮碳苷组分或其单体衍生物的植物提取物。本专利技术所述酸水解工艺显著提高了含有黄酮碳苷类组分植物资源的利用率，降低了纯化成本，工艺简洁、可操作性强，易于实现产业化放大。本
技术实现思路
是通过大量实验研究和工艺优化分析完成的，以下述具体实施例进行说明。附图说明图1为采用本 专利技术从金莲花中提取的黄酮碳苷提取物TC-A(上图)及其酸水解样品TC-AH(下图)的液相色谱图(检测波长340nm)。图中，色谱峰1_3依次为2"-半乳糖基荭草苷、荭草苷和牡荆苷。图2为采用本专利技术从金莲花中提取的黄酮碳苷提取物TC-B (上图)及其酸水解样品TC-BH(下图)的液相色谱图(检测波长340nm)。图中，色谱峰1_4依次为异荭草苷、荭草苷、牡荆苷和异牡荆苷。具体实施例方式本专利技术所述的黄酮碳苷提取物是按以下实施例所表示的方法制造，所涉及到的方法是本领域的技术人员能够掌握和运用的技术手段。但以下实施例不得理解为任何意义上的对本领域专利技术权利要求的限制。实施例1:黄酮碳苷单体酸水解反应考察对照品异荭草苷、异牡荆苷为市售品。对照品2"-半乳糖基荭草苷、荭草苷、牡荆苷为自制，其纯化工艺参见:李胜银，金莲花化学成分研究，苏州大学硕士研究生论文，2008。酸水解反应:称取各对照品5mg，分别加入10mL2M HC1，分别于60°C和80°C两种温度水浴反应6h，用4M NaOH中和至pH5-7。HPLC法分析水解产物中荭草苷和牡荆苷等成分，色谱分析条件=ODS色谱柱(4.6X250mm);乙腈-0.1 %乙酸-水为流动相梯度洗脱(0-5min, 13 % 乙腈；5_25min，13-15 % 乙腈；25_30min，15-18 % 乙腈；30_50min，18-28 %乙腈；50-60min, 28-40 %乙腈；60-65min,40 %乙腈);检测波长340nm ;柱温30 °C ;流速1.0mT,/mi η η结果:2"-半乳糖基荭草苷在60°C反应产物中仅有荭草苷，同时有少量2"-半乳糖基荭草苷；在801:反应产物中同时有荭草苷和少量异荭草苷。荭草苷、牡荆苷在80°C反应产物中同时有异荭草苷/荭草苷、异牡荆苷/牡荆苷异构体存在；异荭草苷、异牡荆苷在80°C反应产物中也同时有异荭草苷/荭草苷、异牡荆苷/牡荆苷异构体存在。结果表明，2"-半乳糖基荭草苷在60°C反应时可转化为荭草苷，在更激烈的水解条件下本类成分会发生异构化反应。通过控制反应条件，可以将2"-半乳糖基荭草苷选择性转化为荭草苷。实施例2:金 莲花组分TC-A酸水解工艺考察金莲花组分TC-A中主要含有2"-半乳糖基荭草苷(含量30.85%)、荭草苷(含量50.49% )和少量牡荆苷(含量12.67% )，其纯化工艺参见:刘江云等.一种黄酮碳苷组合物及其制备方法和用途.专利申请号CN201110055655.5。主要工艺流程为:称取干燥的金莲花药材100g，用IOOOmL的水加热回流(1.5h)提取2次，提取液合并减压浓缩至1.5g生药/mL，加入等体积的95%的本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种黄酮碳苷提取物的制备方法，其特征在于所述制备方法如下：(1)选取含有黄酮碳苷的植物原料，采用水或乙醇?水混合溶媒进行提取；并可根据需要进一步采用大孔树脂、聚酰胺、硅胶、反相硅胶等填料进行分离和纯化，浓缩，获得富含黄酮碳苷的提取物浓缩液；(2)选取(1)所得提取物浓缩液，稀释溶解于适量水或含醇水溶液中，用适量酸调节溶液酸度，在60?100℃反应1?24小时，用适量碱溶液中和至pH4?7，得提取物水解液；(3)选取(2)所得提取物水解液，根据需要进一步采用大孔树脂、聚酰胺、硅胶、反相硅胶等填料进行分离和纯化，获得高纯度的黄酮碳苷提取物。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：刘江云，孙燕，苑红燕，郝丽莉，蔡金娜，蔡培烈，杨世林，
申请(专利权)人：苏州大学，
类型：发明
国别省市：