一株生产1,3-丙二醇的工程菌及其构建方法技术

本发明专利技术公开了一株生产1,3-丙二醇的工程菌及其构建方法。本发明专利技术利用同源重组、基因插入失活的方法使产1,3-丙二醇的野生型菌株中的磷酸转乙酰酶基因沉默，从而得到乙酸代谢途径被阻断的基因工程菌。用本发明专利技术的工程菌进行1,3-丙二醇的发酵生产，乙酸生产大幅度降低，使得副产物乙酸对细胞的毒害作用大大减少，单位生物量生产速率增强，另外，由于副产物种类减少，也简化了后提取工艺，降低了生产成本。实验证明，将本发明专利技术的工程菌按常规方法发酵28小时，1,3-丙二醇浓度可达55g/L以上。本发明专利技术将在微生物发酵法生产1,3-丙二醇的工业化生产中发挥重要作用，具有广阔的应用前景。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于生物
，具体涉及一株生产1，3-丙二醇的工程菌及其构建方法。
技术介绍
:I, 3-丙二醇(PDO)是一种重要的化工原料，可作为有机溶剂，应用于耐压高润滑齐U、染料、油墨、防冻剂等行业。PDO可用来合成杂环、药物中间体、聚酯和聚氨酯，尤其是可作为聚酯PTT的单体。PTT是继50年代聚对苯二甲酸乙二醇酯(PET)、70年代聚对苯二甲酸丁二醇酯(PBT)之后实现工业规模的新的可成纤聚酯高分子材料，是一种极有发展前途的新型聚酯材料。1998年PTT被美国评为六大石化新产品之一。PTT与PET、PBT相比除具有聚酯的耐化学性外，还具有其它一些更优良的特性。如尼龙的弹性恢复性；在全范围无需添加特殊化学药品即能呈现良好的连续印染特性；抗紫外、臭氧和氮氧化合物的着色性；抗内应力；低水吸附、低静电以及良好的可生物降解性；可循还利用性等。由于PTT的具有以上优良特性，它在地毯工业、服装材料、工程热塑料以及其它众多领域有着很广泛的应用。生产ρττ纤维的关键在于单体原料roo的来源。ρττ占领市场的关键在于价格，而ρττ的价格主要取决于PDo的价格。由于不能廉价制得roo，制约了 ρ本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种敲除乙酸代谢途径基因的工程菌的构建方法，其特征在于，是将产1，3?丙二醇的野生型菌株的磷酸转乙酰酶基因敲除后获得的工程菌。

【技术特征摘要】
1.一种敲除乙酸代谢途径基因的工程菌的构建方法，其特征在于，是将产1，3-丙二醇的野生型菌株的磷酸转乙酰酶基因敲除后获得的工程菌。2.根据权利要求1所述的构建方法，其特征在于，所述的产1，3_丙二醇的野生型菌株为克雷伯氏菌属(Klebsiella)的细菌。3.根据权利要求2所述的构建方法，其特征在于，所述的产1，3_丙二醇的野生型菌株为肺炎克雷伯氏菌(Klebsiella pneumoniae)。4.根据权利要求2所述的构建方法，其特征在于，所述的将克雷伯氏菌的磷酸转乙酰酶基因敲除，具体通过以下方法敲除: a、PCR扩增克雷伯氏菌的磷酸转乙酰酶基因的部分同源序列，将其与自杀载体相连，然后再导入杂交供体菌株中； b、将步骤a获得的携带有磷酸转乙酰酶基因的部分同源序列与自杀载体的供体菌与克雷伯氏菌进行双亲本杂交，利用同源重组、基因插入失活，经筛选后获得磷酸转乙酰酶基因被沉默的敲除乙酸代谢途径基因的克雷伯氏菌。5.根据权利要求4所述的构建方法，其特征在于，当所述的产...

【专利技术属性】
技术研发人员：周胜，秦启伟，魏京广，李莉莉，付静，
申请(专利权)人：中国科学院南海海洋研究所，
类型：发明
国别省市：