一种补加生物素的生产谷氨酸的发酵方法技术

本发明专利技术涉及一种补加生物素的生产谷氨酸的发酵方法，步骤包括：以生物素缺陷型菌株为生产菌株，控制发酵培养基中初始生物素的含量，在发酵过程中补加青霉素和生物素。本发明专利技术发酵方法在发酵过程的中后期添加青霉素和生物素，可以克服“亚适量”工艺发酵后期生物素贫乏的问题，保证了培养基中含有充足的生物素提供菌体的生长和代谢，大大提高了菌体的谷氨酸的合成速度，相较于现有的谷氨酸亚适量发酵工艺，单位菌体的产酸速率提高了10%以上，大大缩短了发酵周期，降低了生产成本。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于生物发酵工程
，涉及谷氨酸的生产，尤其是。
技术介绍
目前，国内大多数的谷氨酸生产企业采用生物素缺陷型菌株，采用生物素“亚适量”或者“超亚适量”的发酵工艺。但是，这两种发酵工艺都要求控制发酵培养基中生物素的含量，不能超过限量水平，从而导致发酵中后期发酵培养基中生物素严重缺乏，菌体活力和产酸速率受限。可见，“亚适量”或者“超亚适量”谷氨酸发酵工艺存在生物素贫乏的问题，是不利于提高发酵产酸速率的。国外很多企业采用高生物素添加青霉素流加糖发酵工艺，在初始发酵培养基中加入大量的生物素，但是必须严格控制好添加青霉素的时间与浓度，否则会严重影响正常产酸。因此，操作要求苛刻，很难把握，国内企业很少采用此方法。谷氨酸发酵菌株是生物素缺陷型菌株，不能自身合成生物素。生物素作为丙酮酸羧化酶的辅酶，催化丙酮酸羧化生成草酞乙酸，并促使草酰琥珀酸转化为α -酮戊二酸，并进而转化为谷氨酸。当生物素过量时，由于细胞内有大量的磷脂质，使细胞壁、细胞膜增厚，不利于谷氨酸的分泌，造成产酸率下降，影响发酵生产的经济效益。只有在生物素限量的情况下，菌体生长与产酸才趋于平衡。但是，在生物素限量的情况下，本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种补加生物素的生产谷氨酸的发酵方法，其特征在于：步骤包括：以生物素缺陷型菌株为生产菌株，控制发酵培养基中初始生物素的含量，在发酵过程中补加青霉素和生物素。

【技术特征摘要】
1.一种补加生物素的生产谷氨酸的发酵方法，其特征在于:步骤包括:以生物素缺陷型菌株为生产菌株，控制发酵培养基中初始生物素的含量，在发酵过程中补加青霉素和生物素。2.根据权利要求1所述的发酵方法，其特征在于:步骤如下: (1)将OD值为0.9^1.2的生物素缺陷型菌株的种子培养液按种子培养液:发酵培养基的体积比为0.05、.2:1的比例接入发酵培养基中，发酵培养基中初始生物素含量为5 μ g/L 65 μ g/L ;发酵温度控制在32 40。。;补充氮源至pH为6.5 7.5，控制通气量为0.1 0.5vvm ； (2)在发酵培养至6 24h的期间先补加青霉素，然后补加生物素；发酵培养至8 14h后，补加葡萄糖至发酵液中终质量浓度为l(Tl40g/L ； (3)继续发酵培养至26 32h后发酵结束，即得谷氨酸。3.根据权利要求2所述的发酵方法，其特征在于:所述种子培养液的活化方法如下: (1)从斜面上接生物素缺陷型菌株于种子培养基中，3(T35°C振荡培养6 10h，OD值为0.6 1.0，得菌株活化 液； (2)将菌株活化液按体积比为0.05、.2:1的比例接入种子培养基中，3(T35°C振荡培养6 10h，得种子培养液； 其中，所述种子培养基 为:葡萄糖2(T35g/L，玉米浆l(T20g/L，糖蜜5 15 g/L,MgSO4.7Η20 0.5 0.9g/L，KCl 1.(Tl.5g/L,MnSO4 0.00025 0.0015g/L,VB1 0.ΟΟΟΓΟ.0005g/L，Na2HPO4 1.5 2.5g/L，纯生物素 0 30 μ g/L。4.根据权利要求2所述的发酵方法，其特征在于:所述步骤⑵中补加青霉素为在...

【专利技术属性】
技术研发人员：俞建良，耿兴山，王晓健，贺玉明，王晓丽，白长胜，
申请(专利权)人：中粮生化能源龙江有限公司，
类型：发明
国别省市：