胞壁酰二肽-抗CD20免疫偶联物制备方法及应用技术

本研究以疫苗接种所产生的特异性细胞免疫和单克隆抗体的免疫导向作用为理论依据，将卡介苗(BCG)的有效成分胞壁酰二肽(MDP)与抗淋巴瘤细胞膜抗原CD20的单克隆抗体Rituximab结合制备成胞壁酰二肽-抗CD20免疫偶联物，即MDP-Rituximab，了解经BCG免疫后的免疫活性细胞，在MDP-Rituximab的介导下的体内外抗肿瘤效果。该偶联物保持了MDP的免疫原性，刺激机体产生特异性的T细胞免疫应答，借助Rituximab抗体与淋巴瘤细胞膜CD20分子结合的免疫导向作用，将MDP带到残留的淋巴瘤细胞周围，通过MDP诱导T细胞介导的免疫应答达到清除残存肿瘤的最终目的，这样该方法不仅克服了单用Rituximab药物抗性，而且减少了抗体用量，预示其在恶性淋巴瘤中的应用前景。

【技术实现步骤摘要】
胞壁酰二肽-抗CD20免疫偶联物制备方法及应用
：本专利技术涉及一种具有靶向结合抗原且具有通过刺激免疫活性细胞发挥抗肿瘤作用的胞壁酰二肽-抗CD20免疫偶联物(MDP-Rituximab)，本专利技术公开了其制备方法，及其在淋巴瘤治疗的作用。
技术介绍
：据世界卫生组织统计，淋巴瘤发病率每年增长7.5％，是目前发病率增长最快的恶心肿瘤之一。我国淋巴瘤的发病率大约为2/10万人口，每年新发病例2.5万人，死亡2万人，儿童占全国人口的30％，因此，每年大约有近万新例新发患儿。其死亡率占儿童恶性肿瘤的首位。提高儿童淋巴瘤的诊治水平是广大血液工作者急需解决的问题。90％以上为B细胞淋巴瘤中均有CD20表达，就目前国内外的治疗状况，儿童恶性淋巴瘤(NHL)的治疗首选仍以联合化疗为主，其治疗效果主要取决于治疗反应。尽管儿童恶性淋巴瘤是可治愈性疾病，但是仍有大约50％以上的NHL患儿发生耐药，导致治疗无效或复发。因此，完全缓解后抗复发治疗或停药后清除耐药肿瘤细胞是治疗NHL急需解决的问题。采用单克隆抗体(MAb)的治疗方法具有有效治疗肿瘤的潜力，且已被用于某些肿瘤的治疗。Maloney等首次将抗C本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种胞壁酰二肽(MDP)?抗CD20(Rituximab)免疫偶联物，其特征在于其为式I所示的化合物或其盐，其中为抗CD20单克隆抗体，n3为1、2、3、4、或5，n4为0、1、2、3、4、或5，n1为1、2、3、4、5或6。式I。FSA00000743676900011.tif,FSA00000743676900012.tif

【技术特征摘要】
1.一种胞壁酰二肽MDP-抗CD20Rituximab免疫偶联物的制备方法，其特征在于免疫偶联物为式I所示的化合物或其盐，其中为抗CD20单克隆抗体，n3为3，n4为2，n1为3；制备方法如下：化合物1的制备氩气保护下，在烧瓶中，加入Boc保护的连接臂N-Boc-1，3-丙二胺盐酸盐20mg，用3ml二甲基甲酰胺溶解，加入过量的三乙胺，然后加入N-琥珀酰亚胺-3-(2-吡啶硫基)丙酸酯，室温搅拌反应1h，点板检测反应结束，后经过硅胶柱分离，真空蒸干，得产物化合物1；化合物2的制备氩气保护下，在反应瓶中，加入化合物110mg，加入1.5ml二氯甲烷，冰浴下搅拌10min，缓慢加入1.5ml三氟乙酸，冰浴条件下搅拌反应20min，点板检测反应结束，减压浓缩蒸干，并加入适量纯甲醇，再次蒸干，得到化合物2；化合物3的制备氩气保护下，在10ml反应瓶中，加入胞壁酰二肽5mg、化合物23mg，用2ml二甲基甲酰胺和四氢呋喃溶解，冰浴条件下加入1-...

【专利技术属性】
技术研发人员：孙立荣，王玲珍，
申请(专利权)人：孙立荣，王玲珍，
类型：发明
国别省市：