微生物酶转化棘白菌素B的方法技术

本发明专利技术提供一种微生物酶转化棘白菌素B的方法，包括以下步骤：1)微生物发酵获得棘白菌素B脱酰酶；2)发酵完成后，往发酵液中添加磷酸盐，进行超声，离心取上清液，即为棘白菌素B脱酰酶粗酶液；3)纯化粗酶液，得到棘白菌素B脱酰酶酶液；4)将棘白菌素B溶于乙醇中，与脱酰酶酶液混合并搅拌使其转化为棘白菌素B母核，转化完成后，过滤，取滤液；5)滤液过大孔吸附树脂，棘白菌素B母核吸附于树脂上，用有机溶剂将棘白菌素B母核洗脱下来。本发明专利技术方法的摩尔转化率高，转化时间短，产物易于分离纯化，且ECB脱酰酶能够重复使用。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及生物制药领域，更具体地，本专利技术涉及通过微生物酶将棘白菌素B转化为棘白菌素B母核的方法。
技术介绍
上世纪70年代以来，真菌感染无论是其发生频率还是感染种类都在不断地增加，特别是在免疫抑制患者包括HIV感染者、器官移植者、肿瘤患者以及那些患有其它疾病而正进行免疫治疗的患者中。直到20世纪80年代末和90年代咪唑类及三唑类抗真菌药物的研发成功，临床方能有效而安全地控制真菌感染。虽然这些药物对控制临床深部真菌感染起到了重要的作用，但由于这些药物选择性差、耐药真菌的出现以及对诸如曲霉和白色念珠菌等真菌的敏感性不强等原因，深部真菌感染疾病的死亡率仍居高不下。因此，寻找一种新的安全有效的抗真菌药物就显得尤为重要。众所周知，真菌细胞具有细胞壁而哺乳动物细胞没有细胞壁。因此，真菌细胞壁是新型抗真菌药物的理想靶点。棘白菌素类药物是20世纪70年代发现的一组天然产物，由相似的环状多肽核心和不同的脂肪酸侧链组成，该脂类侧链通过非竞争性作用机制抑制β-(1，3)- -葡聚糖的合成，从而导致细胞壁葡聚糖的排空、渗透不稳定以及真菌细胞的溶解而发挥其抗真菌作用。其作用机制独特，不良发应率低，且本文档来自技高网...

【技术保护点】
将棘白菌素B转化成棘白菌素B母核的方法，包括以下步骤：1)微生物发酵获得棘白菌素B脱酰酶；2)发酵完成后，往发酵液中添加磷酸盐，进行超声，离心取上清液，即为棘白菌素B脱酰酶粗酶液；3)纯化粗酶液，得到棘白菌素B脱酰酶酶液；4)将棘白菌素B溶于乙醇中，与脱酰酶酶液混合并搅拌使其转化为棘白菌素B母核，转化完成后，过滤，取滤液；5)滤液过大孔吸附树脂，棘白菌素B母核吸附于树脂上，用有机溶剂将棘白菌素B母核洗脱下来。

【技术特征摘要】
1.将棘白菌素B转化成棘白菌素B母核的方法，包括以下步骤: 1)微生物发酵获得棘白菌素B脱酰酶； 2)发酵完成后，往发酵液中添加磷酸盐，进行超声，离心取上清液，即为棘白菌素B脱酰酶粗酶液； 3)纯化粗酶液，得到棘白菌素B脱酰酶酶液； 4)将棘白菌素B溶于乙醇中，与脱酰酶酶液混合并搅拌使其转化为棘白菌素B母核，转化完成后，过滤，取滤液； 5)滤液过大孔吸附树脂，棘白菌素B母核吸附于树脂上，用有机溶剂将棘白菌素B母核洗脱下来。2.根据权利要求1所述的方法，其中所述步骤I)中的发酵所用菌株为天然产酶菌或基因工程菌。3.根据权利要求1所述的方 法，其中所述步骤I)中的发酵所用菌株为犹他游动放线菌(Actinoplanes utahensis)。4.根据权利要求1所述的方法，其中所述步骤2)所述超声持续l_2h。5.根据权利要求1所述的方法，其中所述步骤2)中往发酵液中添加磷酸盐，使得磷酸盐的浓度为0.05M-0.15M。6.根据...

【专利技术属性】
技术研发人员：李继安，陈详，阮建昌，林慧敏，陈代杰，沈剑锋，阮霞琴，石飞燕，董华成，
申请(专利权)人：上海医药工业研究院，浙江震元制药有限公司，
类型：发明
国别省市：