本发明专利技术属于天然有机化学领域，涉及一种从大兴安岭野生黄芩里提取黄芩苷的方法，特别是涉及一种采用生物酶解、超声波提取、聚酰胺-大孔树脂联用技术，得到高纯度黄芩苷的新方法。本发明专利技术优点：提取方便快捷，纯化效果明显，可以工业化生产。1、应用生物酶解技术，使细胞内有效成分充分溶出。2、采用超声波提取技术，有效成分受热时间降低，活性损失少，产品生物活性高。3、聚酰胺-大孔树脂联用技术结合使用，使有效成分更加纯化，树脂可重复使用，生产成本大大降低，可以工业化使用。本发明专利技术利用生物酶解技术使有效成分尽可能溶出，再用超声波提取，最后经聚酰胺-大孔树脂二级纯化技术，再经过重结晶，将黄芩苷纯度提高到98.6％。
【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于天然有机化学领域，涉及一种从大兴安岭野生黄芩里提取黄芩苷的方法，特别是涉及一种采用生物酶解、超声波提取、聚酰胺-大孔树脂联用技术，得到高纯度黄芩苷的新方法。
技术介绍
黄芩系高大草本，茎高60-150厘米，有长柔毛。羽状复叶。小叶21-31，卵状披针形或椭圆形有，长7-30毫米，宽4-10毫米，两面有白色长柔毛。叶轴有长柔毛。托叶狭披针形，长约6毫米，有白色长柔毛。总状花序腋生。花下有条形苞片。花萼筒状，长约5毫米，萼齿短，有白色长柔毛。花冠黄白色，旗瓣无爪，较翼瓣和龙骨瓣长，翼瓣、龙骨瓣有长爪。子房有毛，有子房柄。荚果膜质，膨胀，卵状矩圆形，有长柄，有黑色短柔毛。国内一般用水提取，调酸使沉淀，分离沉淀，洗涤干燥生产黄芩苷，存在着提取时间长、得率低等缺点。本专利技术的不同之处在于采用生物酶解、超声波提取法，后期采用聚酰胺-大孔树脂联用技术的新方法。
技术实现思路
本专利技术优点本专利技术主要采用生物酶解、超声波逆流提取技术，采用乙醇做溶剂，先得到浸膏， 再采用聚酰胺-大孔树脂联用技术，重结晶得到黄芩苷。本专利技术方法简单易操作，适合大生产，成本低，选用食品添加剂允许使用的乙醇，无化学残留。为实现上述目的， 本专利技术采用的技术方案是—种采用生物酶解、超声波提取、聚酰胺-大孔树脂联用技术，得到高纯度黄芩苷的新方法，其步骤如下(I)酶解黄芩根粉碎至10-20目，酶用量为底物的O. 5-1%，酶解温度40_50°C，保温沉淀2-4h (2)超声提取加入乙醇，超声波提取，超声频率50-80KHZ，料液比1: 8_10，超声时间50_80min， 薄层层析检测分析，回收乙醇，得粗提液；(3)过滤:将提取液经4°C左右静置4_6h，过滤得上清液；(4)聚酰胺初步精制将所得溶液拌入干燥的聚酰胺粉末，先以水洗去水溶性杂质，再用20%、40%、 60%、80%乙醇依次洗脱，收集洗脱液，得提取液；(5)聚酰胺-大孔树脂联用纯化将提取液水浴蒸至近干，加少量乙醇与1/4-1/6，药材用量的聚酰胺粉拌合，水浴挥去溶剂，将聚酰胺放置底部铺有棉花的渗漉筒中，水洗脱至无色，取出铺在填充于3倍至 5倍于药材用量的大孔树脂上。湿法装柱，树脂柱的高径比为5 1-8 1，流速为3-5BV/ h ；(6)乙醇洗脱在常温常压下，以l_3BV/h流速，用乙醇液洗脱，洗脱体积为5-7BV ；(7)重结晶取纯化的黄芩苷按一定的量加甲醇，加热溶解，趁热抽滤，放置过夜，析出结晶，过滤，分离晶体；将剩余物用如上方法加热溶解，重结晶，如此反复两次，得到精制的黄芩苷， 纯度在98%以上。具体实施例方式实施例1 :一种采用生物酶解、超声波提 取、聚酰胺-大孔树脂联用技术，得到高纯度黄岑苷的新方法，其步骤如下(l)50g黄芩粉碎至10目，采用复合纤维素酶，酶用量为底物的I %，酶解温度 40°C，保温沉淀2h;(2)加入70%浓度的乙醇，超声波提取，超声频率50KHZ，料液比1: 8，超声时间 50min，薄层层析检测分析，回收乙醇，得粗提液；(3)将提取液经4°C左右静置4h，过滤得上清液；(4)聚酰胺初步精制将所得溶液拌入干燥的60目的聚酰胺粉末，先以水洗去水溶性杂质，再用20%、 40%,60%,80%乙醇依次洗脱，收集洗脱液，得提取液；(5)聚酰胺-大孔树脂联用纯化将提取液水浴蒸至近干，加少量乙醇与1/4药材用量的聚酰胺粉拌合，水浴挥去溶剂，将聚酰胺放置底部铺有棉花的渗漉筒中，水洗脱至无色，取出铺在填充于3倍于药材用量的NKA-H大孔树脂上。湿法装柱，树脂柱的高径比为5 I ;上样流速为3BV/h ;(6)乙醇洗脱在常温常压下，以lBV/h流速，先用乙醇液洗脱，洗脱体积为5BV，乙醇浓度为 80% ；(7)重结晶取纯化的黄芩苷按1: 50的量加甲醇，加热溶解，趁热抽滤，放置过夜，析出结晶， 过滤，分离晶体；将剩余物用如上方法加热溶解，重结晶，如此反复两次，得到精制的黄芩苷2.51g，纯度在 983% ο实施案例2 :—种采用生物酶解、超声波提取、聚酰胺-大孔树脂联用技术，得到高纯度黄芩苷的新方法，其步骤如下(I) IOOg黄芩粉碎至10目，酶用量为底物的O. 5%，酶解温度45°C，保温沉淀4h (2)加入75%浓度的乙醇，超声波提取，超声频率60KHZ，料液比1: 9，超声时间 60min，薄层层析检测分析，回收乙醇，得粗提液；(3)将提取液经4°C左右静置5h，过滤得上清液；(4)聚酰胺初步精制将所得溶液拌入干燥的80目聚酰胺粉末，先以水洗去水溶性杂质，再用20%、 40%,60%,80%乙醇依次洗脱，收集洗脱液，得提取液；(5)聚酰胺-大孔树脂联用纯化将提取液水浴蒸至近干，加少量乙醇与1/5药材用量的聚酰胺粉拌合，水浴挥去溶剂，将聚酰胺放置底部铺有棉花的渗漉筒中，水洗脱至无色，取出铺在填充于4倍于药材用量的HPD100大孔树脂上。湿法装柱，树脂柱的高径比为6 I ;上样流速为4BV/h ；(6)乙醇洗脱在常温常压下，以2BV/h流速，先用乙醇液洗脱，洗脱体积为6BV，乙醇浓度为 85% ；(7)重结晶取纯化的黄芩苷按1: 100的量加甲醇，加热溶解，趁热抽滤，放置过夜，析出结晶，过滤，分离晶体；将剩余物用如上方法加热溶解，重结晶，如此反复两次，得到精制的黄芩苷5. 23g，纯度在98. 4% ο实施案例3 一种采用生物酶解、超声波提取、聚酰胺-大孔树脂联用技术，得到高纯度黄芩苷的新方法，其步骤如下(I) IOOg黄芩粉碎至20目，采用复合纤维素酶，酶用量为底物的O. 8%，酶解温度 50°C，保温沉淀3h;(2)加入80%浓度的乙醇，超声波提取，超声频率80KHZ，料液比1: 10，超声时间 80min，薄层层析检测分析，回收乙醇，得粗提液；(3)将提取液经4°C左右静置6h，过滤得上清液；(4)聚酰胺初步精制将所得溶液拌入干燥的60目聚酰胺粉末，先以水洗去水溶性杂质，再用20%、 40%,60%,80%乙醇依次洗脱，收集洗脱液，得提取液；(5)聚酰胺-大孔树脂联用纯化将提取液水浴蒸至近干，加少量乙醇与1/6药材用量的聚酰胺粉拌合，水浴挥去溶剂，将聚酰胺放置底部铺有棉花的渗漉筒中，水洗脱至无色，取出铺在填充于4倍于药材用量的AB-8大孔树脂上。湿法装柱，树脂柱的高径比为7 I ;上样流速为5BV/h ;(6)乙醇洗脱在常温常压下，以3BV/h流速，先用乙醇液洗脱，洗脱体积为7BV，乙醇浓度为 90% ；，(7)重结晶取纯化的黄芩苷按1: 80的量加甲醇，加热溶解，趁热抽滤，放置过夜，析出结晶， 过滤，分离晶体；将剩余物用如上方法加热溶解，重结晶， 如此反复两次，得到精制的黄芩苷 517g，纯度在 986% ο本文档来自技高网...
【技术保护点】
一种采用生物酶解、超声波提取、聚酰胺?大孔树脂联用技术，得到高纯度黄芩苷的新方法，其步骤如下：(1)酶解：黄芩根粉碎至10?20目，采用复合纤维素酶，酶用量为底物的0.5?1％，酶解温度40?50℃，保温沉淀2?4h；(2)超声提取：加入一定体积浓度乙醇，超声波提取，超声频率50?80KHZ，料液比1∶8?10，超声时间50?80min，薄层层析检测分析，回收乙醇，得粗提液；(3)过滤：将提取液经4℃左右静置4?6h，过滤得上清液；(4)聚酰胺初步精制：将所得溶液拌入干燥的聚酰胺粉末，先以水洗去水溶性杂质，再用20％、40％、60％、80％体积浓度乙醇依次洗脱，收集洗脱液，得提取液；(5)聚酰胺?大孔树脂联用纯化：将提取液水浴蒸至近干，加少量乙醇与1/4?1/6，药材用量的聚酰胺粉拌合，水浴挥去溶剂，将聚酰胺放置底部铺有棉花的渗漉筒中，水洗脱至无色，取出铺在填充于3倍至5倍于药材用量的大孔树脂上。湿法装柱，树脂柱的高径比为5∶1?8∶1，流速为3?5BV/h；(6)乙醇洗脱：在常温常压下，以1?3BV/h流速，用乙醇液洗脱，洗脱体积为5?7BV；(7)重结晶：取纯化的黄芩苷按一定的量加甲醇，加热溶解，趁热抽滤，放置过夜，析出结晶，过滤，分离晶体；将剩余物用如上方法加热溶解，重结晶，如此反复两次，得到精制的黄芩苷，纯度在98％以上。...
【技术特征摘要】
1.一种采用生物酶解、超声波提取、聚酰胺-大孔树脂联用技术，得到高纯度黄芩苷的新方法，其步骤如下 (1)酶解 黄芩根粉碎至10-20目，采用复合纤维素酶，酶用量为底物的0.5-1%，酶解温度40-50°C，保温沉淀 2-4h ； (2)超声提取 加入一定体积浓度乙醇，超声波提取，超声频率50-80KHZ，料液比1: 8-10，超声时间50-80min，薄层层析检测分析，回收乙醇，得粗提液； (3)过滤 将提取液经4°C左右静置4-6h，过滤得上清液； (4)聚酰胺初步精制 将所得溶液拌入干燥的聚酰胺粉末，先以水洗去水溶性杂质，再用20 %、40 %、60 %、80%体积浓度乙醇依次洗脱，收集洗脱液，得提取液； (5)聚酰胺-大孔树脂联用纯化 将提取液水浴蒸至近干，加少量乙醇与1/4-1/6，药材用量的聚酰胺粉拌合，水浴挥去溶剂，将聚酰胺放置底部铺有棉花的渗漉筒中，水洗脱至无色，取出铺在填充于3倍至5倍于药材用量的大孔树脂上。湿法装柱，树脂柱的高径比为5 1-8 1，流速为3-5BV/h; (6)乙醇洗脱 在常温常压下，以l-3BV/h流速，用乙醇液洗脱，洗脱体积为5-7BV ； (7)重结晶 ...
【专利技术属性】
技术研发人员：张亚红，姚德坤，姚德利，万莉，焦龙，
申请(专利权)人：大兴安岭林格贝有机食品有限责任公司，
类型：发明
国别省市：
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