用于在大肠中增加双歧杆菌和抑制双歧杆菌减少的试剂制造技术

公开了一种用于在肠中有效增加双歧乳杆菌的方法和手段。具体地，公开了一种在肠中控制双歧乳杆菌增加和/或减少的试剂，所述试剂包含孢子形态的枯草芽孢杆菌；以及在保持孢子形态的同时将所述孢子形态输送至受试者肠的手段。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】
本专利技术涉及一种在大肠中增加双歧杆菌和/或抑制双歧杆菌减少的试剂和方法。更具体地，本专利技术涉及枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)孢子用于在大肠中增加双歧杆菌和/或抑制双歧杆菌减少的用途。
技术介绍
迄今为止，在成人肠中已报道了以下四种优势双歧杆菌菌株青春双歧杆菌(Bifidobacterium adolescentis)、链状双歧杆菌(Bifidobacterium catenulatum)、假链状双歧杆菌(Bifidobacteriumpseudocatenulatum)和长双歧杆菌(Bifidobacteriumlongum)(Matsuki, T.等,Appl. Environ. Microbiol. 70(1) : 167-173，2004)。已证实双歧杆菌不仅对肠调节有效，而且还对免疫调节和血脂水平的改善等有效。因此，已进行了增加肠中的双歧杆菌的尝试。已知包括口服摄入耐胃酸的双歧杆菌作为益生菌(PlObiotiCS)的方法和包括摄入寡糖作为益生元(prebiotics)的方法为增加肠内双歧杆菌的方法。目前，摄取乳酸菌和上述双歧杆菌作为益生菌已变得普遍(JP专利公布2007-091704A)。然而 ，由于个体间有很大的差异，并且摄取菌株的定殖率(colonizationrate)在个体间也是变化的，因此益生菌在所有人中不总是产生类似的结果(KagakutoSerbutsu 47 (2):78-80，2009)。摄取双歧杆菌的生长因子(如，寡糖)作为益生元也变得普遍。已发现此类益生元对于青春双歧杆菌的生长是有效的；然而，并未证实它们对肠中的长双歧杆菌的生长有效(Asano 等，Nippon Nogeikagaku Kaishi, 75(10):1077-1083，2001)。另外，已报道将双歧杆菌制剂与双歧杆菌的生长促进剂组合给药的组合物作为益生菌和益生元的组合制剂(JP专利公布2009-296910A)。有报道称枯草芽孢杆菌对于促进肠细菌如双歧杆菌的生长是有用的(JP专利公布 2009-296910A ;和 Ushijima, Medicine andBiology, 128(1) :9-14, 1994)。据报导，枯草芽孢杆菌的萌发细胞(germinated cell)对于双歧杆菌的生长是有效的(Ushijima, 1994supra)，而枯草芽孢杆菌的孢子在小肠中萌发，以致萌发细胞促进肠细菌的生长(JP专利公布 7-170975 (1995) A)。之前本申请人还报道了通过将孢子直接经口服途径向家畜(如猪和鸡)给药证实枯草芽孢杆菌的孢子具有肠调节作用(参见JP专利2528055B)。
技术实现思路
如上所述,本领域仍需要增加构建小型生物群(microbiota)的双歧杆菌,特别是增加作为小型生物群中主要菌株的长双歧杆菌的方法和手段(mean)。本专利技术的目的为提供用于有效增加大肠中双歧杆菌的手段和方法。作为为了实现上述目的而深入研究的结果，本专利技术人证实某些枯草芽孢杆菌的孢子在经过消化道时萌发。本专利技术人还发现枯草芽孢杆菌的孢子具有促进大肠中双歧杆菌生长的效果，而枯草芽孢杆菌的孢子，特别是与枯草芽孢杆菌(某些为萌发的)相比明显具有更显著的增加长双歧杆菌并抑制长双歧杆菌的减少的效果。基于这些发现完成了本专利技术。具体地，将本专利技术描述如下。[I] 一种用于在大肠中增加双歧杆菌和/或抑制双歧杆菌的减少的试剂，其包括枯草芽孢杆菌的孢子，和在保持所述枯草芽孢杆菌的孢子形态的同时将所述孢子输送至受试者大肠的手段。[2]根据[I]所述的试剂，其基本上无枯草芽孢杆菌的萌发细胞。[3]根据[I]或[2]所述的试剂，其中枯草芽孢杆菌为枯草芽孢杆菌C_3102(FERMBP-1096)或其突变株或衍生株。根据[I]至[3]任一项所述的试剂，其中所述双歧杆菌为长双歧杆菌。根据[I]至[4]任一项所述的试剂，其用于口服给药和/或肠道内给药。根据[I]至[5]任一项所述的试剂，其用于饮食品、饲料或药品。根据[I]至[6]任一项所述的试剂,其用作整肠剂(intestinalregulatory、抗变态反应剂或血脂水平改善剂。一种用于生产功能性饮食品的方法，其包括制备根据[I]至[7]任一项所述的试剂，和将所述试剂引入饮食品中。一种功能性饮食 品，其包含引入其中的根据[I]至[7]任一项所述的试剂。一种用于在受试者大肠中增加双歧杆菌和/或抑制双歧杆菌减少的方法，其agent)包括在保持枯草芽孢杆菌的孢子形态的同时将有效量的枯草芽孢杆菌孢子输送至受试者大肠，或直接将所述孢子给药至受试者大肠。[11]根据[10]所述的方法，其中所述受试者为人类或非人类动物。[12]根据[10]或[11]所述的方法，其中所述枯草芽孢杆菌为枯草芽孢杆菌C-3102(FERM BP-1096)或其突变株或衍生株。[13]根据[10]至[12]任一项所述的方法，其中所述双歧杆菌为长双歧杆菌。[14]根据[10]至[13]任一项所述的方法，其中所述孢子经口服给药和/或肠内给药向受试者给药。[15] 一种用于在大肠中增加双歧杆菌和/或抑制双歧杆菌减少的试剂，其包括枯草芽孢杆菌的孢子，和在保持枯草芽孢杆菌的孢子形态的同时将所述孢子输送至受试者大肠的手段。本专利技术提供具有增加双歧杆菌和/或抑制双歧杆菌减少的优良效果的试剂。本专利技术的试剂使大肠中的双歧杆菌增加和/或抑制其减少，从而有助于促进宿主健康并预防多种疾病。另外，本专利技术的试剂即使在高温处理后也能够保持增加双歧杆菌和/或抑制双歧杆菌的减少。因此，本专利技术的试剂可优选用于功能性饮食品以及饲料。附图说明图1为示出在向大肠模型添加枯草芽孢杆菌的孢子和萌发细胞后通过微阵列分析确定的双歧杆菌菌株增加的图。图2为示出在向大肠模型添加枯草芽孢杆菌的孢子后通过微阵列分析确定的双歧杆菌菌株增加的图。图3为示出在向大肠模型添加枯草芽孢杆菌的孢子后通过实时PCR确定的长双歧杆菌减少的图。具体实施例方式以下详细描述本专利技术。本申请要求对2010年3月12日提交的日本专利申请2010-055816的优先权，将其说明书和/或附图中所记载的部分或全部内容引入于此以作参考。本专利技术涉及枯草芽孢杆菌的孢子用于在大肠中增加双歧杆菌和/或抑制双歧杆菌减少的用途。如下述实施例2所示，证实当将枯草芽孢杆菌的孢子经口服途径直接给药时，某些细胞在经过胃肠道时萌发。此外，如下述实施例3所示，发现与枯草芽孢杆菌的孢子和萌发细胞的混合物不同，枯草芽孢杆菌的孢子具有显著地增加长双歧杆菌的效果。因此，本专利技术意于在保持枯草芽孢杆菌的孢子形态的同时将枯草芽孢杆菌的孢子输送至受试者的大肠，从而在大肠中使双歧杆菌、特别是长双歧杆菌增加和/或抑制其减少。本专利技术提供用于在大肠中增加双歧杆菌和/或抑制双歧杆菌减少的试剂，所述试剂包括枯草芽孢杆菌的孢子，和在保持所述枯草芽孢杆菌的孢子形态的同时将所述孢子输送至受试者大肠的手段。本专利技术还提供用于在受试者大肠中增加双歧杆菌和/或抑制双歧杆菌减少的方法，所述方法包括在保持所述枯草芽孢杆菌的孢子形态的同时将有效量的枯草芽孢杆菌孢子输送至受试者大肠，或者直接将所述孢子给药至受试者大肠。 本领域已知的任何常规枯草芽孢杆菌菌株均可用于本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2010.03.12 JP 2010-0558161.一种用于在大肠中增加双歧杆菌和/或抑制双歧杆菌减少的试剂，其包括枯草芽孢杆菌的孢子，和在保持所述枯草芽孢杆菌的孢子形态的同时将所述孢子输送至受试者大肠的手段。2.根据权利要求1所述的试剂，其基本上无枯草芽孢杆菌的萌发细胞。3.根据权利要求1或2所述的试剂，其中所述枯草芽孢杆菌为枯草芽孢杆菌C-3102(FERM BP-1096)或其突变株或衍生株。4.根据权利要求1至3任一项所述的试剂，其中所述双歧杆菌为长双歧杆菌。5.根据权利要求1至4任一项所述的试剂，其用于口服给药和/或肠内给药。6.根据权利要求1至...

【专利技术属性】
技术研发人员：畑中美咲，中村康则，
申请(专利权)人：可尔必思株式会社，
类型：
国别省市：