双歧杆菌菌株制造技术

双歧杆菌菌株AH121A在口服后具有显著的免疫调节功能。所述菌株用于免疫调节生物治疗剂。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】双歧杆菌菌株1U本专利技术涉及双歧杆菌菌株及其作为益生菌，具体地讲作为免疫调节生物治疗剂的应用。保护人胃肠道不被肠细菌定植的防御机制是高度复杂的并涉及免疫和非免疫的方面(I)。先天的防御机制包括胃的低pH、胆汁盐、蠕动、粘蛋白层和抗微生物化合物如溶菌酶(2)。免疫学机制包括在M细胞下面的特定淋巴聚集体，称为派伊尔氏淋巴集结(peyers patches),其遍布在小肠和结肠(3)。在这些位置存在的内腔抗原对合适的T和B细胞亚群产生刺激，建立细胞因子网络并分泌抗体到胃肠道中(4)。此外，可经由上皮细胞将抗原递呈到上皮内的淋巴细胞和下面的固有层免疫细胞(5)。因此，宿主在胃肠道的免疫防御上投入巨大。然而，因为胃肠粘膜是宿主与外部环境相互作用的最大表面，其中必须有特定的控制机制以调控对100吨食物的免疫应答，这是胃肠道经平均寿命处理的食物数量。此外，超过500种菌种定植在肠内，它们在结肠上的数量为10n-1012/g。因此，这些控制机制必须能够分辨非病原的粘附细菌与侵入的病原菌，所述病原菌将引起对宿主的显著伤害。事实上，肠内菌群通过与新摄取的潜在病原微生物竞争，有助于宿主防御它们。据信益生菌当衍生自g在治疗的 菌种或密切相关菌种时更加有效。因此，需要来源于伴侣动物的益生菌菌株，所述菌株用于伴侣动物，它们不同于那些来源于人的菌株。WO 01/90311公开了分离自排泄物样品的益生菌微生物，所述样品得自具有益生菌活性的猫。然而，这些细菌得自排泄物样品，并且不可能形成存在于胃肠道上部的天然肠微生物区系的部分。因此，需要通过从胃肠道上部存在的天然肠微生物区系中分离细菌菌株来提供可获得的菌株，所述菌株尤其适用于猫，并且选择它们的益生菌特性和经加工后存活的能力，以及将这些菌株掺入适用的组合物。专利技术声明根据本专利技术，提供了分离的双歧杆菌菌株NCMB 41675。双歧杆菌菌株可为活体细胞形式，双歧杆菌菌株可为非活体细胞形式。双歧杆菌可分离自猫科动物受试者的结肠活组织。双歧杆菌菌株在ロ服后可具有显著的免疫调节功能。如本文所述，本专利技术也提供包含双歧杆菌菌株的制剂。所述制剂还可包含益生菌材料。所述制剂还可包含益生元材料。所述制剂还可包含可摄取的载体。可摄取的载体可为药用载体如胶囊、片剂或粉末。可摄取的载体可为食物产品如油悬浮液、乳基悬浮液、乳酪、可可油基组合物、肉汁和/或酸奶基组合物。本专利技术还提供包含双歧杆菌菌株或如本文所述制剂的食品。所述食品可为干食品。所述食品可为湿食品。所述食品还可包含益生菌材料。所述食品还可包含益生元材料。所述食品可为伴侣动物食品。本专利技术还提供如本文所述用作药物的双歧杆菌菌株或制剂或食品。本专利技术还提供如本文所述用于预防和/或治疗不良炎活性的双歧杆菌菌株或制剂或食品。本专利技术还提供如本文所述用于预防和/或治疗不良胃肠炎活性的双歧杆菌菌株或制剂或食品。本专利技术还提供如本文所述用于预防和/或治疗由于不良炎活性引起的自身免疫失调的双歧杆菌菌株或制剂或食品。本专利技术还提供如本文所述用于预防和/或治疗由于不良炎活性引起的腹泻疾病的双歧杆菌菌株或制剂或食品。本专利技术还提供如本文所述用于调节或改善伴侣动物免疫系统的双歧杆菌菌株或制剂或食品。本专利技术还提供如本文所述用于预防和/或治疗伴侣动物自身免疫疾病的双歧杆菌菌株或制剂或食品。本专利技术还提供如本文所述用于预防和/或治疗伴侣动物炎症的双歧杆菌菌株或制剂或食品。我们描述了双歧杆菌菌株AH121A(NCMB 41675)或其突变体或其变体。所述菌株可通过从切除并洗涤的猫科动物胃肠道分离获得。所述突变体可为经基因修饰的突变体。所述变体可为天然存在的双歧杆菌变体。所述菌株可为益生菌。 它可为生物学纯培养物形式。我们也描述了分离的双歧杆菌菌株NCMB 41675。双歧杆菌菌株可为活体细胞形式。作为另外一种选择，双歧杆菌菌株可为非活体细胞形式。益生菌的一般使用形式可为活体细胞。然而，也可将它扩展到非活体细胞例如杀灭过的培养物或益生菌表达的包含有益因子的组合物。这可包括热灭活的微生物，或者通过暴露于改变的PH或经过加压灭活的微生物。因为非活体细胞产物制剂可较简单，可将细胞容易地掺入药物且贮藏要求与活体细胞相比受的限制要少得多。干酪乳杆菌(Lactobacillus casei)YIT 9018提供25个加热灭活细胞的有效利用样品，这作为治疗和/或防止肿瘤生长的方法在美国专利US4347240中进行了描述。我们也描述了利用通过从切除并洗涤的猫科动物胃肠道中分离的可获得细菌保持并改善伴侣动物健康状态的方法和包含乳酸菌的组合物。我们描述了包含如本文所述的双歧杆菌菌株的制剂，该制剂可包括另ー种益生菌材料，该制剂可包括益生元材料。双歧杆菌是共生微生物。它们已经从人胃肠道内的微生物区系中分离出来。因为引起的炎活性也将破坏宿主细胞和组织功能，所以胃肠道内的免疫系统不可能对这种区系有显著的反应。因此，存在ー些机制，从而免疫系统能够识别共生的非病原胃肠微生物区系，它们与病原生物不同。这确保对宿主组织的伤害受到限制并且仍旧保持防御屏障。在整个说明书中术语突变体、变体和经基因修饰的突变体包括双歧杆菌菌株，其基因特性和/或表型特性与亲本菌株相比发生改变。天然存在的长双歧杆菌(Bifidobacterium longum)变体包括选择性分离的祀向特性的自发改变。通过常规(体夕卜)基因操纵技术如基因分裂、接合转移等完成亲本菌株特性的有意改变。基因修饰包括将外来和/或内源DNA序列导入双歧杆菌菌株基因组，例如通过载体插入细菌菌株基因组，所述载体包括质粒DNA或曬菌体。天然或诱导的突变包括至少单个碱基的改变例如缺失、插入、颠换或可引起所述DNA序列编码的氨基酸序列改变的其他DNA修饰。术语突变体、变体和经基因修饰的突变体也包括已经发生基因改变的双歧杆菌菌株，所述基因改变在基因组中积聚的速率与所有微生物的30天然一致，和/或通过自发突变和/或基因获取和/或基因丢失发生的基因改变，其不是通过有意(体外)操纵基因组完成，而是通过变体和/或突变体的天然选择完成，所述天然选择提供当暴露于环境压カ如抗生素时在保持细菌存活率方面的选择性优势。可通过有意地(体外)将特定基因插入到基因组中制备突变体，其不会根本改变生物体的生物化学功能，但是其产物可用于细菌的鉴定或选择，例如抗生素抗性。本领域的技术人员将认识到双歧杆菌菌株的突变体或变体能够通过与亲本菌株的DNA序列同源性分析进行鉴定。双歧杆菌菌株具有与亲本菌株相近的序列同一性，认为它们是突变体或变体菌株。可认为与亲本DNA序列具有96%或更高的序列同一性(同源性)，例如97%或更高，或98%或更高，或99%或更高的序列同一性的双歧杆菌菌株是突变体或变体。序列同源性可使用在线同源性算法“BLAST”程序进行測定，其在http://www.ncb1. nlm. nih, gov/BLAST/ 上公开可用。亲本菌株的突变体也包括衍生的双歧杆菌菌株，其具有与亲本菌株的16s_23s基因间隔区多核苷酸序列至少85%的 序列同源性，例如至少90%的序列同源性，或至少95%的序列同源性。这些突变体还可包含在细菌基因组的其他DNA序列中的DNA突变。附图简述由以下描述将会更清楚地理解本专利技术，其仅以举例的本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2010.05.11 IE 2010/0290;2009.11.11 US 12/616,7521.一种分离的双歧杆菌菌株NCMB 41675。2.如权利要求1所述的双歧杆菌菌株以活体细胞形式存在。3.如权利要求1所述的双歧杆菌菌株以非活体细胞形式存在。4.如权利要求1至3中的任一项所述的双歧杆菌菌株，其中所述双歧杆菌分离自猫科动物受试者的结肠活组织。5.如权利要求1至4中的任一项所述的双歧杆菌菌株，其中所述菌株在口服后具有显著地免疫调节功能。6.一种制剂，所述制剂包含如权利要求1至5中的任一项所述的双歧杆菌菌株。7.如权利要求6所述的制剂，所述制剂还包含益生菌材料。8.如权利要求6或7中的任一项所述的制剂，所述制剂还包含益生元材料。9.如权利要求6至8中的任一项所述的制剂，所述制剂还包含可摄取的载体。10.如权利要求9所述的制剂，其中所述可摄取的载体是药用载体如胶囊、片剂或粉末。11.如权利要求9所述的制剂，其中所述可摄取的载体是食物产品如油悬浮液、乳基悬浮液、乳酪、可可油基组合物、肉汁和/或酸奶基组合物。12.—种食品,所述食品包含如权利要求1至5中的任一项所述的双歧杆菌菌株或如权利要求6至11中的任一项所述的制剂。13.如权利要求12所述的食品，其中所述食品是干食品。14.如权利要求12所述的食品，其中所述食品是湿食品。15.如权利要求12至14中的任一项所述的食品，所述食品还包含益生菌材料。16.如权利要求12至15中的任一项所述的食品，所述食品还包含益生元材料。17.如权利要求1...

【专利技术属性】
技术研发人员：L·奥马奥尼，B·凯利，
申请(专利权)人：食物营养健康有限公司，爱默思公司，
类型：
国别省市：