一种肾综合征出血热病毒IgM抗体检测方法及试剂盒技术

本发明专利技术涉及生物学检测技术领域，具体涉及一种肾综合征出血热病毒IgM抗体检测检测方法及试剂盒，在膜上固定肾综合征出血热病毒抗原，加入待检血清，待检血清中的肾综合征出血热病毒IgM抗体和所述固定在膜上的抗原结合，再加入含有鼠抗人IgM单抗的金标工作液，鼠抗人IgM单抗与待检血清中的肾综合征出血热抗体结合，显示出红色，最后加入洗涤液，洗去多余的金标工作液和其他杂质。本发明专利技术本发明专利技术试剂盒具有保质期较长、交叉反应少、显色性能较优等特点。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及生物学检测
，具体涉及一种肾综合征出血热病毒IgM抗体检 测方法及试剂盒。
技术介绍
肾综合征出血热(Hemorrhagicfever with renal syndrome,以下简称HFRS),我 国习称流行性出血热(Epidemic hemorrhagic fever, EHF),是由汉坦病毒(Hantavirus, HV)引起的以发热、出血、肾脏损害为主要临床特征的自然疫源传染病，鼠为主要的传染源， 寄生螨类参与传播,主要通过接触宿主动物排泄物经伤口、气溶胶、饮食传播。其临床表现 复杂，预后差。对HFRS的实验室诊断方法主要有常规检查、超声检查、基因检测、病毒分离鉴定 与血清学检测等。目前临床主要依据患者的症状、体征及血、尿常规作诊断，这对一些典型 病人尚可，而一旦遇到不典型的病人，诊断就比较困难，常造成误诊或遗漏，不仅使病人在 经济上蒙受不应有的损失，甚至丧失最佳抢救治疗的时机，导致病人死亡，因此，早期诊断 尤为重要。超声检查HFRS对仪器与技术要求较高。基因检测多采用反转录PCR (RT-PCR) 技术，但由于HFRS病程早期病毒载量较小,故在临床标本本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种肾综合征出血热病毒IgM抗体检测方法，在膜上固定肾综合征出血热病毒抗原，加入待检血清，待检血清中的肾综合征出血热病毒IgM抗体和所述固定在膜上的抗原结合，再加入含有鼠抗人IgM单抗的金标工作液，鼠抗人IgM单抗与待检血清中的肾综合征出血热病毒IgM抗体结合，显示出红色，最后加入洗涤液，洗去多余的金标工作液和其他杂质，其特征在于：所述金标工作液采用如下方法制得：⑴制备金标浓缩液：取0.5～1wt%的氯金酸水溶液100ml，加热至沸腾，加入0.4～0.8wt%柠檬酸三钠溶液0.8～1ml，混匀，待溶液颜色由淡黄至蓝色至紫色至完全透明的酒红色，继续煮沸5～15分钟，停止加热，冷却至室温，向得到的...

【技术特征摘要】
1.一种肾综合征出血热病毒IgM抗体检测方法，在膜上固定肾综合征出血热病毒抗原，加入待检血清，待检血清中的肾综合征出血热病毒IgM抗体和所述固定在膜上的抗原结合，再加入含有鼠抗人IgM单抗的金标工作液，鼠抗人IgM单抗与待检血清中的肾综合征出血热病毒IgM抗体结合，显示出红色，最后加入洗涤液，洗去多余的金标工作液和其他杂质，其特征在于 所述金标工作液采用如下方法制得 ⑴制备金标浓缩液取0. 5 lwt%的氯金酸水溶液100ml，加热至沸腾，加入0. 4 0.8被％柠檬酸三钠溶液0. 8 1ml，混匀，待溶液颜色由淡黄至蓝色至紫色至完全透明的酒红色，继续煮沸5 15分钟，停止加热，冷却至室温，向得到的溶液中加入lmg/ml的鼠抗人IgM单抗0. 2 0. 5ml，然后将混合溶液进行离心处理，弃去上清液，得到下层金标浓缩液； ⑵制备稀释液将121.1 242. 2mg的三羟甲基氨基甲烷、0.1 0. 2mg的氯化钠和0.5 0. 7mg的牛血清白蛋白置于容量瓶内，加入双蒸水，使之完全溶解，然后继续加入双蒸水至IOOmL,再加入0. 04 0. 07wt9Uf断试剂防腐剂PR0CLIN300，然后依次加入I 2wt%海藻糖、2ml甘油、0. 03 0. 05wt%黄原胶与0. 8 2. 0wt%的羧甲基壳聚糖，再加入0. 5ml水杨酸异辛酯一并混匀，最后用盐酸将其PH调节至7. 0 7. 5，得到所述稀释液； ⑶将所述金标浓缩液与稀释液按1: 15 30的体积比混合，得到金标工作液； 所述洗涤液，包括三羟甲基氨基甲烷、氯化钠和牛血清白蛋白，并采用如下方法制得将121.1mg 242. 2mg的三轻甲基氨基甲烧、0....

【专利技术属性】
技术研发人员：杨致亭，杨金红，王秀利，武新清，孙洪芝，刘迎军，袁忠群，王德亚，
申请(专利权)人：潍坊市康华生物技术有限公司，
类型：发明
国别省市：