【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及一种肿瘤标志物检测试剂盒及其制备方法，尤其是一种检测灵敏度高、储存与运输方便、有效期长且生产成本低廉的基于可变淋巴细胞受体(VLR)的肿瘤标志物检测试剂盒及其制备方法。
技术介绍
目前，对患者血清样品中肿瘤标志物的检测已被广泛的应用于癌症的早期诊断，同时对癌症在治疗过程中的病情监测及预后分析等都起到重要的辅助作用。肿瘤标志物已有很多种，常见的肿瘤标志物分为胚胎抗原、糖类抗原、天然自身抗原、细胞角蛋白、肿瘤相关的酶及激素等等，有些肿瘤标志物对不同类型的癌症检测具有广谱性，有些则对特定类型的肿瘤具有高灵敏性及特异性。几种代表性的肿瘤标志物有甲胎蛋白(alpha-fetoprotein, AFP)、癌胚抗原(carcinoembryonic antigen, CEA)、膜胚胎抗原(pancreatic oncofetal antigen,POA)、糖类抗原(carbohydrate antigen, CA)等，其中糖类抗原还分为卵巢癌标志物CA125和HE4、乳腺癌标志物CA153及胃癌标志物CA724等。目前用于临床的肿瘤标志物检测方法主要有酶联免疫吸...
【技术保护点】
一种基于可变淋巴细胞受体的肿瘤标志物检测试剂盒，有捕获试剂及检测试剂，其特征在于：所述捕获试剂和检测试剂分别是与肿瘤标志物具有高特异性及高亲合力的重组可变淋巴细胞受体。
【技术特征摘要】
1.一种基于可变淋巴细胞受体的肿瘤标志物检测试剂盒，有捕获试剂及检测试剂，其特征在于所述捕获试剂和检测试剂分别是与肿瘤标志物具有高特异性及高亲合力的重组可变淋巴细胞受体。2.根据权利要求1所述的基于可变淋巴细胞受体的肿瘤标志物检测试剂盒的制备方法，其特征在于所述捕获试剂和检测试剂依次按如下步骤制备 a.以肿瘤标志物为抗原免疫无颌类脊椎动物，建立所免疫的无颌类脊椎动物VLR酵母表面展示文库，通过酵母表面展示技术和流式细胞术筛选得到几个阳性克隆，这些阳性克隆是能够表达与肿瘤标志物具有高特异性、高亲合力的单克隆VLR的酵母； b.选取所表达的单克隆VLR与肿瘤标志物具有最高亲合力的一个阳性克隆，对其扩大培养并提取质粒DNA ;回收编码VLR抗原结合区的DNA片段；将所回收的DNA片段与原核或真核表达载体重组，转化基因工程菌或转染真核表达宿主细胞，大量表达重组的单克隆VLR ;采用与纯化标签相对应的纯化方法，获得高纯度的重组VLR ;最后对重组VLR进行标记，作为检测VLR; c.将剩余的几个阳性克隆分别扩大培养，并诱导酵母细胞表达VLR； 将每种表达VLR的酵母细胞与肿瘤标志物标准品孵育，使肿瘤标志物充分结合到酵母细胞表面的VLR上，离心收集酵母细胞；洗涤除去未与VLR结合的肿瘤标志物；再用缓冲液重新悬浮酵母细胞，加入b步骤所制备的检测VLR ;待检测VLR与结合到酵母...
还没有人留言评论。发表了对其他浏览者有用的留言会获得科技券。