【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及一种利用双启动子表达载体在家蚕幼虫中表达家蚕抗菌肽 CecropinB2 的方法。
技术介绍
抗菌肽(antimicrobial peptides,AMPs)是生物体内经诱导产生的一种具有生物活性的小分子多肽，具有广谱抗菌活性，对细菌有很强的杀伤作用，尤其是对某些耐药性病原菌的杀灭作用更引起了人们的重视。随着生物科技不断发展，抗菌肽作为新型抗生素及新型药物，在农业、医药、食品等领域发挥着重要作用。至今为止，已从自然生物中分离得到上千种抗菌肽，其中ceCTopins类抗菌肽是目前研究最清楚、效果最显著的抗菌肽，已发现有A、B、C、D、E五种结构，这类抗菌肽还具有耐酸，耐热，耐碱以及不易产生耐药性等特点， 在微生物，动植物方面有广泛应用。近年来，Bac-to-Bac杆状病毒表达系统得到广泛应用，该系统根据F因子载体的原理，改变了传统的昆虫重组杆状病毒的构建方法，构建一种新杆状病毒穿梭载体Bacmid， 该系统具有以下优势(1)重组率有显著提高，几乎可达100% (2)通过蓝白斑筛选重组病毒有筛选优势，不会产生野生型和非重组型病毒污染的问题，也不再需要传...
【技术保护点】
一种利用双启动子表达载体在家蚕幼虫中表达家蚕抗菌肽CecropinB2的方法，其特征在于，步骤包括：将如序列表所示BmCecB2基因及polh基因分别克隆到启动子表达载体以构建重组双启动子表达载体；将重组双启动子表达载体转化到DH10Bac感受态细胞中，提取质粒，获得重组穿梭载体Bacmid；Bacmid在转染试剂脂质体介导下转染家蚕培养细胞，获得重组病毒多角体；重组病毒多角体定量后以经口接种五龄家蚕幼虫的方式，在家蚕幼虫中表达，获得具有抑菌活性的抗菌肽。
【技术特征摘要】
【专利技术属性】
技术研发人员：徐家萍，李昕琦，杜畅，王文兵，高娟，王成林，
申请(专利权)人：安徽农业大学，
类型：发明
国别省市：
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