重组人促红素-CTP融合蛋白生产工艺及应用制造技术

技术编号:8484861 阅读:452 留言:0更新日期:2013-03-28 04:16
本发明专利技术公开了一种重组人促红素-CTP融合蛋白的生产工艺方法,其特点是重组工程细胞株的培养方式采用微载体悬浮灌注培养技术或无血清悬浮流加培养技术。本发明专利技术还公开了重组人促红素-CTP融合蛋白的纯化工艺,通过优化,获得简单工艺流程,以获得高纯度、高活性的重组人促红素-CTP融合蛋白。本发明专利技术还涉及重组人促红素-CTP融合蛋白在猴体内的代谢动力学研究以及在治疗大鼠肾性贫血上的应用。

【技术实现步骤摘要】
重组人促红素-CTP融合蛋白生产工艺及应用
本专利技术属于生物制药工艺领域。其具体涉及一种重组人促红素与人绒毛膜促性腺激素β亚基羧基末端肽的融合蛋白的一种生产工艺方法,包括该融合蛋白的重组工程细胞株的获得、细胞培养及蛋白纯化工艺方法以及重组人促红素-CTP融合蛋白在猴药代实验和对大鼠肾性贫血治疗上的应用。
技术介绍
EPO是一种主要由肾脏产生的糖蛋白,分子量约为35KD,是人体内调节红系造血的主要激素,在红系祖细胞的增殖、分化和成熟中起着重要的调控作用。目前我国对EPO需求量逐年递增,但是普通EPO存在体内半衰期短,患者给药次数频繁等问题。因此如何延长其体内半衰期,以降低给药频次,成为当前EPO药物的研究热点。目前常用的技术手段有三种,一是使EPO进行PEG化(专利号200880021159. 4),二是通过氨基酸突变增加糖化位点(美国安进公司的Aranesp,已上市),三是使其与一些大分子蛋白或高糖化片段相连形成融合蛋白,目前已有文献报道有EPO-FC (见专利申请号200880005733. 7)、EPO-HAS (见专利申请号 200410053319. 7)和 EP0-CTP本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种重组人促红素?CTP融合蛋白的生产工艺方法,其具体步骤包括:将含有编码重组人促红素?CTP融合蛋白基因的表达载体,采用适当的转化方法转化宿主细胞,通过优化筛选获得重组工程细胞株,并采用微载体悬浮灌注或无血清悬浮流加培养工艺方法进行细胞培养并收获细胞培养液,通过经过优化的纯化工艺流程来分离获得高纯度、高活性的重组人促红素?CTP融合蛋白。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员:王锐张秀芹孟庆勇董敏刘铁成梁秋波李会成
申请(专利权)人:哈药集团技术中心
类型:发明
国别省市:

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