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一种神经元分离和培养方法及试剂技术

技术编号:8449161 阅读:343 留言:0更新日期:2013-03-21 02:57
一种神经元分离和培养方法及试剂,含有大脑皮质组织分离、组织细胞捣碎后胰酶消化、筛网过滤离心、细胞原代培养等4个实验步骤。此外还可包含神经元鉴定的步骤。本发明专利技术的目的在于针对现有技术存在的问题,改进当前体外分离和培养神经元的方法,使之简单易行,培养获得的神经元生长良好,纯度高,产量大,可满足神经科学研究中细胞生物学实验的需求。

【技术实现步骤摘要】
一种神经兀分罔和培养方法及试剂
本专利技术属于动物细胞培养
,具体涉及一种神经元体外分离和培养方法。研究背景神经元,又称神经细胞,是构成神经系统结构和功能的基本单位。神经元是具有长突起的细胞,它由细胞体和细胞突起构成。在长的轴突上套有一层鞘,组成神经纤维,它的末端的细小分支叫做神经末梢。细胞体位于脑、脊髓和神经节中,细胞突起可延伸至全身各器官和组织中。细胞体是细胞含核的部分,其形状大小有很大差别,直径约4 120微米。核大而圆,位于细胞中央,染色质少,核仁明显。细胞质内有斑块状的核外染色质(旧称尼尔小体),还有许多神经元纤维。细胞突起是由细胞体延伸出来的细长部分,又可分为树突和轴突。每个神经元可以有一或多个树突,可以接受刺激并将兴奋传入细胞体。每个神经元只有一个轴突,可以把兴奋从胞体传送到另一个神经元或其他组织,如肌肉或腺体。在神经系统发育过程中,中枢神经系统经历了细胞数量和体积的增长及细胞连接形成改变过程。分化的神经元一经产生,便不可能再进行分裂,神经元的正常分化过程一旦受损,即有可能影响突触联系的正常建立等一系列过程。对神经元损伤的机制及其防治, 一直是人们感兴趣的问题本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种神经元分离和培养方法,其包括以下步骤:大脑皮质组织分离;组织细胞捣碎后酶消化;以及细胞原代培养;其特征在于:在细胞原代培养步骤前含有筛网过滤并离心的步骤。

【技术特征摘要】
1.一种神经元分离和培养方法,其包括以下步骤 大脑皮质组织分离; 组织细胞捣碎后酶消化;以及 细胞原代培养; 其特征在于在细胞原代培养步骤前含有筛网过滤并离心的步骤。2.根据权利要求I所述的一种神经元分离和培养方法,其特征在于所述大脑皮质组织分离步骤为 将孕15-17天的大鼠颈椎脱臼致死,75%乙醇腹部消毒,剪刀剪开腹部至两侧,无菌条件下取出串珠状胚胎,放入盛有IXPBS的培养皿中,然后在无菌超净台内冰床上取胎鼠两侧大脑半球放入盛有IXPBS的培养皿中,用眼科镊夹取动物双侧大脑皮质置于盛有IXPBS的培养皿内,仔细剥离并去除皮层血管组织和软脑膜,再将大脑皮质移至另一个盛有IXPBS的培养皿内。3.根据权利要求I所述的一种神经元分离和培养方法,其特征在于所述组织细胞捣碎后酶消化步骤为 无菌条件下,用眼科镊夹碎脑组织呈糜状,加入浓度O. 1-0. 125%胰酶2ml,37°C培养箱消化10分钟;用神经元培养首液终止消化后,继续加入神经元培养首液轻轻吹打,直至将组织全部吹散,形成细胞悬液。4.根据权利要求I所述的一种神经元分离和培养方法,其...

【专利技术属性】
技术研发人员:黄柏胜邬力祥罗洁韩仰
申请(专利权)人:黄柏胜
类型:发明
国别省市:

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