一种灵芝菌丝体多糖锗的提取方法技术

技术编号:8448221 阅读:225 留言:0更新日期:2013-03-21 00:52
本发明专利技术公开了一种灵芝菌丝体多糖锗的提取方法,属于生物技术领域。本发明专利技术对富锗灵芝菌丝体进行预处理、超声波提取、乙醇沉淀、去蛋白、精制、干燥等技术处理后,得到含多糖和含锗的灵芝多糖锗。本发明专利技术制备的灵芝菌丝体多糖锗,多糖纯度达95%以上,锗含量达16.5mg/g以上,可用于保健食品、化妆品及医药等领域。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于生物
,具体涉及。
技术介绍
灵芝是一种药用价值很高的大型真菌,具有免疫调节、抗肿瘤、抗癌等功效,并且对心脑血管疾病具有较高的药理活性。近年来国内外学者已从灵芝中分离出150余种化合物,可分为十大类多糖类、有机锗、生物碱类、氨基酸蛋白质类、三萜类、油脂类、无机离子等。灵芝的药理活性与灵芝中含有的高分子免疫多糖、有机锗等有效化学成分密切相关。因此,研究灵芝有效化学成分具有重要意义。灵芝多糖是灵芝主要活性成分之一,是抗衰老、扶正固本的主要有效成分之一,它能增强细胞的免疫调节作用,调节核酸和蛋白质的代谢平衡,清除氧自由基,提高体外传代细胞分裂代数的能力。灵芝多糖能提高白细胞介素II产生,增强毒T细胞的功能,对小白鼠细胞内的SOD的活性有明显的增强作用,可增强老年小鼠脾细胞内DNA多聚酶的活性,具有一定的抗衰老能力。灵芝多糖的免疫调节作用是广泛的,不仅包括提高抗原提呈细胞、单核细胞吞噬系统的活性,而且包括增强细胞免疫和体液免疫功能,作用位点涉及从免疫前体细胞增生、分化到效应细胞的各个过程。灵芝多糖还具有抗肿瘤、增强机体耐缺氧能力、 抗疲劳、抗辐射、增加记忆力等作用,其具有的保健和药用价值已得到研究人员和学术界普遍认可。稀有元素锗,是1866年德国学者文克列尔用光谱分析矿物时,首先发现的。100多年来的研究证明,元素锗分为无机锗和有机锗两类,无机锗作为电子材料,人体肠道无法吸收,而有机锗的种类可分为(I)合成有机锗羟乙基锗倍半氧化物、螺锗等一类抗病毒、抗炎、抗癌有机锗,具有广泛的药理作用的化合物,但服用过多会引起缺钙。1967年日本医学博士浅井一彦,首次研制成功了具有生物学活性的人工合成有机锗氧化物Ge-182。(2)天然有机锗由天然植物、真菌中提取或直接食用,对人体无任何毒副作用。许多名贵的中草药人参、枸杞子、猢狲眼等及灵芝、山豆根、土豆等有色蔬菜等食用植物中都含有大量的天然有机锗。(3)生物有机锗是将锗化合物植入生物体内,如酵母、细菌、大型真菌、蔬菜等, 使其与细胞某部位结合,转化为大分子化合物,制成富锗酵母、富锗灵芝等。有机锗被誉为“人类疾病的克星”、“21世纪救命锗”,其参与体内代谢,具有很强的氧化脱氢能力;有生血刺激作用,表现在增加红细胞和血红蛋白数量,刺激血小板生成,消除血管壁上的脂类附着物,所以对贫血和高胆固醇血脂及糖尿病有一定的疗效;对某些癌肿、免疫功能低下、骨质疏松、早衰、高血压症等,有一定的保健效用。国外对有机锗研究的较早,研究最多的有日本、美国、前苏联等国家。当前,日本、 欧美各国学者对有机锗化合物的研究和应用相当活跃,不少学者利用构效关系,设计了不同类型有机锗化合物,进一步加强有机锗化合物具有免疫,抗癌,抗衰老等功能的研究,从分子水平、电子水平探索其药理机理。可以预期,随着有机锗药理作用及其机理的进一步了解,它在防治人类及动物的疾病领域必将出现重大突破。我国有机锗的研究起步较晚,但近几十年来,我国科研工作者在有机锗,特别是在 Ge-132衍生物及其类似物的合成与生物活性研究上,做了大量的工作,发表了许多研究论文,在某些研究领域已经走在世界的前列,尤其是关于抗肿瘤作用方面的研究。目前国内外临床上使用的锗大多为合成有机锗,不少学者提出,合成有机锗可能对身体造成一定的危害,而天然有机锗具有对人体不会造成毒副作用,且不会在人体内存留等特性,因此,研究人体能自然吸收的天然有机锗十分必要。灵芝多糖和锗都具有非常重要的生物学意义,因此有必要把两者有机结合起来, 使其功能得到进一步强化。
技术实现思路
本专利技术的目的是针对合成有机锗可能会对人体造成损害及人们对天然有机锗的需求不断上涨等问题,克服现有技术缺点,提供一种把灵芝多糖和锗有机结合,提取获得灵芝菌丝体多糖锗的方法。本专利技术的特点是采用超声波提取技术,从富锗灵芝菌丝体中提取得到灵芝多糖锗,具有纯天然、无毒性、安全可靠、制备简便等特性。本专利技术灵芝菌丝体多糖锗的提取方法,具体步骤如下I.菌丝体预处理称取富锗灵芝菌丝体500. 0g,用O. 6-0. 9% NaCl溶液洗涤3_5 次,经布氏漏斗抽干,并吸去表面水分,获得纯净菌丝体。2.超声波提取灵芝菌丝体中加入8-12L蒸馏水,40_60°C下超声波提取 20-40min,低速离心10-20min,旋转蒸发仪6(TC以下浓缩至一定体积。3.乙醇沉淀灵芝菌丝体提取液中加入无水乙醇使乙醇终浓度达到80%,放置冰箱中过夜,低速离心10-20min,得粗多糖锗。4.去蛋白粗多糖锗溶于6L蒸懼水中,于60°C下保温5h溶解,3000rpm离心 IOmin,除去沉淀,采用Sevag法除蛋白,氯仿/正丁醇(体积比)和(氯仿+正丁醇)/样品(体积比)分别为I : 0.2-0.4和I : O. 2-0. 5,搅拌,静置分层,除去有机层,将蛋白质除去。、5.精制将上述多糖锗溶液加入无水乙醇使乙醇终浓度达到80%,沉淀多糖,离心,弃上清液,进行3-5次,干燥,得灵芝菌丝体多糖锗成品。本专利技术的有益之处在于采灵芝的生长过程可分为孢子期、菌丝体、原基、子实体, 其中菌丝体锗含量最高。本专利技术利用富锗灵芝菌丝体,采用超声波提取技术,融灵芝多糖和锗于一体,获得了天然灵芝多糖锗,可用于保健食品、化妆品及医药等领域,推进了多糖锗类产品的发展。附图说明图I是灵芝菌丝体多糖锗的一种提取方法的工艺路线图,富锗灵芝菌丝体经预处理、超声波提取、乙醇沉淀、去蛋白、精制、干燥,得到含多糖和含锗的灵芝多糖锗。具体实施方式实施例I.I.菌丝体预处理称取富锗灵芝菌丝体500. 0g,用O. 8% NaCl溶液洗涤3次,经布氏漏斗抽干,并吸去表面水分,获得纯净菌丝体。2.超声波提取灵芝菌丝体中加入9L蒸馏水,40°C下超声波提取25min,以 4500rpm离心IOmin,旋转蒸发仪60°C以下浓缩至一定体积。3.乙醇沉淀灵芝菌丝体提取液中加入无水乙醇使乙醇终浓度达到80%,放置冰箱中过夜,4500rpm离心IOmin,得粗多糖锗。4.去蛋白粗多糖锗溶于6L蒸馏水中,于60°C下保温5h溶解,3000rpm离心 IOmin,除去沉淀,采用Sevag法除蛋白,氯仿/正丁醇(体积比)和(氯仿+正丁醇)/样品(体积比)分别为I : 0.2和I : O. 24,搅拌,静置分层,除去有机层,将蛋白质除去。5.精制将上述多糖锗溶液加入无水乙醇使乙醇终浓度达到80%,沉淀多糖,离心,弃上清液,进行4次,干燥,得灵芝菌丝体多糖锗精品。实施例2.I.菌丝体预处理称取富锗灵芝菌丝体500. 0g,用O. 7% NaCl溶液洗涤3次,经布氏漏斗抽干,并吸去表面水分,获得纯净菌丝体。2.超声波提取灵芝菌丝体中加入IOL蒸馏水,45°C下超声波提取25min,以 4000rpm离心15min,旋转蒸发仪60°C以下浓缩至一定体积。3.乙醇沉淀灵芝菌丝体提取液中加入无水乙醇使乙醇终浓度达到80%,放置冰箱中过夜,4000rpm离心1 2min,得粗多糖锗。4.去蛋白粗多糖锗溶于6L蒸馏水中,于60°C下保温5h溶解,3000rpm离心 IOmin,除去沉淀,采用Sevag法除蛋白,氯仿/正丁醇(体积比)和(氯仿+正丁醇)/样品(体积比)分别为I : 0.3和I : 本文档来自技高网
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【技术保护点】
一种灵芝菌丝体多糖锗的提取方法,其特征在于,取富锗灵芝菌丝体,经预处理、超声波提取、乙醇沉淀、去蛋白、精制、干燥等技术分离纯化,制得含多糖和含锗的灵芝多糖锗。

【技术特征摘要】
1.一种灵芝菌丝体多糖锗的提取方法,其特征在于,取富锗灵芝菌丝体,经预处理、超声波提取、乙醇沉淀、去蛋白、精制、干燥等技术分离纯化,制得含多糖和含锗的灵芝多糖锗。2.根据权利要求I所述的一种灵芝菌丝体多糖锗的提取方法,其特征在于,所述的预处理为富锗灵芝菌丝体采用0. 6-0. 9% NaCl溶液洗涤3_5次。3.根据权利要求I所述的一种灵芝菌丝体多糖锗的提取方法,其特征在于,所述的超声波提取为向富锗灵芝菌丝体中加入蒸馏水,40-60°C下超声波提取20-40min,3500_4500rpm 离心 10_20min。4.根据权利要求I所述的一种灵芝菌丝体多糖锗的提取方法,其特征在于,所述的乙醇沉淀为加无水乙醇使灵芝菌丝体提取液中乙醇终浓...

【专利技术属性】
技术研发人员:王秀英
申请(专利权)人:西藏金稞集团有限责任公司
类型:发明
国别省市:

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