一种牛睾丸制备玻璃酸酶的方法技术

技术编号:8205381 阅读:226 留言:0更新日期:2013-01-11 15:48
本发明专利技术公开了一种牛睾丸制备玻璃酸酶的方法,其工艺步骤如下:以新鲜牛睾丸为原料,除去内外副睾,绞成糜浆,超声波提取,离心,提取液经葡聚糖凝胶Sephadex?G-75层析,冷冻干燥,得到玻璃酸酶纯品。本产品活性达700U/mg以上,收率高达9.2%,产品质量大为改善。该工艺具有产品纯度高、提取收率高、安全无污染、节省时间等特点,适合于工业化生产,符合国际研究开发的潮流。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于生物
,提供了。
技术介绍
1928年,Duran Reynals发现了玻璃酸酶并将其称为扩散因子,1940年Chain和Duthie将其命名为透明质酸酶(hyaluronidase, HAase)。玻璃酸酶为粘多糖的分解酶,能促进皮肤对水分、微量元素、维生素等营养成分的吸收,可增加组织的通透性,从而促使皮下注输液和局部积贮的渗出液或血液的吸收;在生化方面,此酶可用于透明质酸、玻璃酸钠及硫酸软骨素的鉴定等。 目前市场上使用的玻璃酸酶大多是从哺乳动物睾丸中提取的,从牛(羊)睾丸中提取玻璃酸酶通用工艺为牛睾丸绞成糜浆后,用冰醋酸溶液提取,吊滤得到粗提液,之后用硫酸铵溶液分级盐析,得到精制液,再将其装入透析袋中透析,经磷酸钠、醋酸钙溶液,抽滤,冷冻干燥,得玻璃酸酶精品。该工艺繁琐,质量不稳定,收率低,且碱、盐易对环境造成污染;此外,部分玻璃酸酶的生产应用发酵法,主要工艺为链霉菌发酵、发酵液浓缩、沉淀粗品过色谱柱、分离得精制品、冷冻干燥,得冻干制剂成品,该工艺提取效率相对提高,但有机溶剂的引入使产品质量大打折扣。玻璃酸酶用途广泛,市场需求量大,国外众多科学家专注于玻璃酸本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种牛睾丸制取玻璃酸酶的方法,其特征在于,包含以下步骤:1)牛睾丸预处理以新鲜牛睾丸为原料,除去内外副睾,蒸馏水洗净,绞成糜浆;2)超声波提取将浓度为5~8%的NaCl提取液装入超声提取仪的容器内,加入牛睾丸糜浆,使牛睾丸与提取液比例为1∶8~1∶12,调节pH为4~5.5,温度为30~35℃,超声波强度为30~45W下提取30~40min;3)离心超声波处理后的提取液在3000r/min下离心15~20min,除去杂质,取上清液;4)葡聚糖凝胶层析葡聚糖凝胶溶胀后装柱,从层析柱顶部加入玻璃酸酶清液,洗脱,控制洗脱温度为25~30℃,洗脱流速为25~40mL/h,洗脱时间为4~5h后,可有效去...

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员:高聚霞
申请(专利权)人:西藏金稞集团有限责任公司
类型:发明
国别省市:

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