本发明专利技术涉及乳酸乳球菌乳脂亚种菌株及其应用。具体地，本发明专利技术提供一株乳酸乳球菌乳脂亚种V401-403(Lactoccous?lactis?subsp.cremoris)。其是从酸马奶中分离得到，其保藏号为CGMCC?No?4849。本发明专利技术还提供由上述菌株制备蛋乳发酵饮料的方法及制得的蛋乳发酵饮料。上述方法是将鸡蛋液与水混合后，与经过巴氏杀菌的原料奶进行混合，并搅拌均匀，加入甜味剂经过过滤得到蛋奶混合液，然后将在原料奶中接种了乳酸乳球菌乳脂亚种V401-403后制得的生产用发酵剂接种到上述制得的蛋奶混合液中，搅拌均匀后制得。从而使制得的蛋奶发酵饮料胞外多糖含量丰富、具有良好的口感与风味，粘度适中。
【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及一种微生物新菌株及其应用，具体涉及一种乳酸乳球菌乳脂亚种菌株V401-403及由该菌株制备蛋乳发酵饮料的方法及制得的蛋乳发酵饮料。
技术介绍
鸡蛋中含有人体所必需的优良蛋白质、脂肪、卵磷脂与多种磷脂质、矿物质、维生素等营养物质，其营养丰富，是一种十分理想的蛋白质食物；牛乳除含有丰富的蛋白质、钙、无机盐、维生素和多不饱和脂肪酸，是老少皆宜的营养食品。蛋乳两者结合使氨基酸更加平衡，利于吸收和利用。牛乳除含有丰富营养成分外，还含有较多的乳糖。通过有益乳酸菌发酵，可以转化乳糖，消除乳糖不耐受反应，生成具有多种功能性的胞外多糖、新的免疫调节因子和多种功能性多肽益生成分，容易消化吸收，调节肠道功能，有其他食品无法代替的作用。胞外多糖(exopolysaccharides, EPS)是一些特殊微生物在生长代谢过程中分泌到细胞壁外、易与菌体分离、分泌到环境中的水溶性多糖，属于微生物的次级代谢产物。对微生物的生长有重要意义。乳酸菌EPS还具有降低小鼠血液胆固醇含量、抗肿瘤以及促进益生菌与肠黏膜的吸附等重要生理活性。
技术实现思路
本专利技术的目的是提供一种乳酸乳球菌乳脂亚种菌株V401-403。本专利技术菌株V401-403是从伊犁牧区农家的酸马奶中分离筛选到的一株乳酸乳球菌乳脂亚种菌株(Lactoccous lactis subsp. Cremoris)新菌株，已于2011年5月16日保藏于中国普通微生物菌种保藏管理中心(地址北京市朝阳区北辰西路I号院3号，邮编100101)，保藏号 CGMCC No 4849。该菌株具体通过如下方法分离得到取酸马奶样品5mL,放入盛有45mL灭菌生理盐水的三角瓶中，置于摇床振荡5min后，梯度稀释；取10_4、10_5、10_6三个稀释度进行涂布，于37°C培养48-7 ;挑取单菌落分别培养后，划线分离，重复划线操作，直至镜检菌体细胞形态一致时认为菌株分离完成。该菌株具有如下特性该菌呈链球状，为革兰氏阳性菌。该菌株产胞外多糖能力强。本专利技术菌株V401-403的16S rDNA序列与目前发表的乳酸乳球菌乳脂亚种的16SrDNA，同源性达到95%以上。综合形态特征与16SrDNA序列鉴定，V401-403为乳酸乳球菌乳脂亚种新菌株(Lactoccous lactis subsp. cremoris.)。本专利技术还提供由乳酸乳球菌乳脂亚种菌株V401-403制备蛋乳发酵饮料的方法。所述方法是将鸡蛋液与水混合后，与经过巴氏杀菌的原料奶进行混合，并搅拌均匀，加入甜味剂经过过滤得到蛋奶混合液，然后将在原料奶中接种了乳酸乳球菌乳脂亚种V401-403后制得的生产用发酵剂接种到上述制得的蛋奶混合液中，搅拌均匀后制得。所述方法具体包括下述步骤I)将鸡蛋液与水按照I : O. 5-2的体积比混合，充分搅拌均匀，得到鸡蛋液水溶液；2)将步骤I)中得到的鸡蛋液水溶液在60_85°C下灭菌15min_lh ；3)取原料奶，在65-90°C下，经过30s-30min巴氏杀菌处理后，冷却至60°C，备用；4)将步骤2)中得到的经过灭菌的鸡蛋液水溶液和步骤3)中得到的经过巴氏杀菌的原料奶在无菌条件下按照I : 1-2 (v/v)混合搅拌均勻，并加入甜味剂,过滤,冷却到45-55 °C，得到蛋奶混合液；5)将蛋奶混合液在10_25MPa压力下进行均质处理1_2次；6)将深冻乳酸乳球菌乳脂亚种按5-15% (v/v)接种到按照步骤3)制备的经过巴氏灭菌的原料奶中，培养至菌密度达I X IO8-I X 10ncfu/ml，作为生产用发酵剂；7)将步骤5)中均质处理后的蛋乳混合液冷却到30_43°C，按2_10%的体积比接种步骤6)中得到的生产用发酵剂，搅拌均匀后无菌分装，置于37°C恒温培养箱中发酵IOh取出，然后在0-8 °C成熟12-38h，于4-8°C下冷藏。优选地，所述方法包括下述步骤I)将鸡蛋液与水按照I : 1-2的体积比混合，充分搅拌均匀，得到鸡蛋液水溶液；2)将步骤I)中得到的鸡蛋液水溶液在60_80°C下灭菌15_30min ；3)取原料奶，在70_80°C下，经过3_20min巴氏杀菌处理后，冷却至60°C，备用；4)将步骤2)中得到的经过灭菌的鸡蛋液水溶液和步骤3)中得到的经过巴氏杀菌的牛乳在无菌条件下按照I : l_1.8(v/v)混合搅拌均勻，并加入甜味剂,过滤,冷却到45-55 °C，得到蛋奶混合液；5)将蛋奶混合液在15_20MPa压力下进行均质处理1_2次；6)将深冻乳酸乳球菌乳脂亚种按5-15% (v/v)接种到按照步骤3)制备的经过巴氏灭菌的牛乳中，培养至菌密度达lX109-lX101(lCfu/ml，作为生产用发酵剂；7)将步骤5)中均质处理后的蛋乳混合液冷却到35_40°C，按2_6%的体积比接种步骤6)中得到的生产用发酵剂，搅拌均匀后无菌分装，置于37°C恒温培养箱中发酵IOh取出，然后在2-6°C成熟18-36h，于4-8°C下冷藏。更优选地，所述方法下述步骤I)将鸡蛋液与水按照I : I的体积比混合，充分搅拌均匀；2)将步骤I)中得到的鸡蛋液在65°C下灭菌30min ；3)取原料奶，在68°C下，经过15min巴氏杀菌处理后，冷却至60°C，备用；4)将步骤2)中得到的经过灭菌的鸡蛋液和步骤3)中得到的经过巴氏杀菌的牛乳在无菌条件下按照I : l(v/v)混合搅拌均勻，并加入甜味剂，过滤，冷却到50°C，得到蛋奶混合液；5)将蛋奶混合液在20MPa压力下进行均质处理I次；6)将深冻乳酸乳球菌乳脂亚种按5% (v/v)接种到按照步骤3)制备的经过巴氏灭菌的牛乳中，培养至菌密度达I X IO9-I X 10ncfu/ml，作为生产用发酵剂；7)将步骤5)中均质处理后的蛋乳混合液冷却到38°C，按4%的体积比接种步骤6)中得到的生产用发酵剂，搅拌均匀后无菌分装，置于37°C恒温培养箱中发酵IOh取出，然后在4°C成熟24h，于4-8 °C下冷藏。所述步骤6)中的乳酸乳球菌乳脂亚种为乳酸乳球菌乳脂亚种菌株(Lactoccouslactis subsp. Cremoris) V401-403，其保藏号为 CGMCC No 4849。所述步骤I)中的鸡蛋液为全蛋液、蛋白液或蛋黄液。所述步骤4)中的甜味剂的量占蛋奶混合液的2-12%。优选地，所述步骤4)中的甜味剂的量占蛋奶混合液的4_10%。所述原料奶为还原奶或鲜奶，可为牛奶、羊奶、或其他哺乳动物奶，优选为牛奶。 所述鸡蛋液通过下述方法制得用清水清洗蛋壳，然后用2%次氯酸溶液浸泡5min，晾干外壳后，在洁净生产线上进行蛋液生产，即经蛋壳切割、蛋壳掰分、蛋液(蛋清、蛋黄或全蛋)收集、在60-70°C下，经过3-10min巴氏杀菌处理后，冷却至4_10°C，备用。所述分装为无菌灌装、杯装或瓶装。制得的蛋乳发酵饮料中，每罐、每杯或每瓶的鸡蛋液含量按质量比为15-30%。本专利技术还提供由上述方法制得的蛋乳发酵饮料。本专利技术提供的乳酸乳球菌乳脂亚种菌株V401-403，该菌株产胞外多糖能力强。制备本专利技术提供的蛋乳发酵饮料时，采用优质的乳酸乳球菌乳脂亚种(Lactoccous lactis subsp. cremoris)菌株V401-本文档来自技高网...
【技术保护点】
乳酸乳球菌乳脂亚种菌株(Lactoccous?lactis?subsp.cremoris)V401?403，其保藏号为：CGMCC?No?4849。
【技术特征摘要】
【专利技术属性】
技术研发人员：卢晓明，陈尚武，刘旭明，卢相义，左芳雷，孙晓菲，
申请(专利权)人：北京德青源农业科技股份有限公司，
类型：发明
国别省市：
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