本发明专利技术提供了一种高含油量小环藻突变株Cyclotella?menghiniana,其特征在于,它保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心CGMCC,保藏地址在北京市朝阳区北辰西路1号院3号中国科学院微生物研究所,保藏日期为2012年9月5日,保藏编号为CGMCC?No.6448。本发明专利技术还提供了一种高含油量小环藻突变株的筛选及培养方法。本发明专利技术筛选、检测过程中简单,耗时少,易于发现富含油脂的硅藻突变体,可用于筛选各种海水和淡水微藻的富油藻种以及通过各种诱变技术(紫外诱变、化学诱变、激光诱变等)诱变获得的富油微藻突变体。
【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及微藻生物能源领域,具体地说,涉及一种利用超声波诱变产生的高含油量微藻,以及利用超声波诱变筛选该微藻的方法及其培养方法。
技术介绍
由于地球上的化石能源储量正日益减少,石油资源很有可能会在短时间内便迅速枯竭。化石能源的蕴藏量并不是无穷无尽的,易于开采和利用的化石能源储量已经所剩无几,剩余储量因为开发难度越来越大,从而失去继续开采的价值。在世界能源消费以石油为主导的情况下,如果能源消费结构仍不变化,那么就会发生新一代的能源危机。煤炭资源虽比石油资源储存量要大,但也不是取之不尽用之不竭的。目前除了煤炭之外,能够大规模利用开发的能源还是很少。虽然太阳能的资源是取之不竭源源不断的,但因其开发利用所耗成本高昂,所以在短时间内仍不可能迅速发展得到广泛应用。因此人类必须及时找到一种可以代替非再生矿物能源的新能源,从而将注意力转移到新的能源结构上,尽早探索、研究开发利用新能源资源,这样才能让人类的生活在安定和谐的情况下持续发展下去,而生物柴油正好可以将此问题解决。像生物柴油这种可再生的碳中性能源,有利于环境和经济的可持续发展。目前的研究也表明了微藻是能够完全替代化石柴油的唯一生物柴油。生物柴油和化石燃料本质上都来源于光合作用产物。绿色植物进行光合作用,将水、二氧化碳和其他无机物依靠光能合成各种有机物并释放出氧气,动物和微生物才能生长繁殖。各种生物的油脂都是从植物合成的有机物转化来的。任何形式的来自动物、植物和微生物的脂肪酸都能用作生物柴油的原料。因此,油脂含量高的藻种才是制备生物柴油的最重要原料。利用微藻加工制备生物柴油的关键,一是提高原始藻种的油脂含量,二是通过优化培养尽可能提高微藻细胞的油脂含量。在单细胞微藻的培养过程中,培养基成分、温度、光照强度、pH、培养方式、通气量、盐度等均会影响微藻的生长以及其脂肪酸的含量与组成。温度、光强能影响微藻的光合作用和呼吸作用,从而对其生长及体内生化成分产生影响。
技术实现思路
本专利技术的主要目的在于提供一种高含油量微藻突变株,同时提供一种高含油量微藻的筛选方法及培养方法,从而提供一种能够高效获取生物柴油的方法。为实现上述目的,本专利技术采取以下技术方案—种高含油量小环藻突变株(建议的分类命名为Cyclotella menghiniana),其特征在于,它保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心CGMCC,保藏地址在北京市朝阳区北辰西路I号院3号中国科学院微生物研究所,保藏日期为2012年9月5日,保藏编号为 CGMCC No. 6448。一种高含油量小环藻突变株的筛选及培养方法,其特征在于,步骤如下a.取对数生长期的小环藻藻液,稀释至IO4个细胞/mL,在音频70KHz条件下,处理30(T450s进行诱变;b.将诱变后的藻液涂于Dl固体培养基上,培养15天后挑取成活的藻落,分别接种于新鲜的Dl固体培养基,在24°C、光暗培养时间比14 :10、光照培养时光照强度25001ex的条件下继续培养15天;C.将各藻落进行编号,并依次取少量藻体分别加入100 μ L的Dl液体培养液中;d.向步骤c得到的各藻液中分别加入O. I mg/mL尼罗红染料O. I μ L,静置IOmin后,利用荧光显微镜观察各藻液中的油脂含量;e.取油脂含量高的藻株培养在Dl液体培养基中大量繁殖,在细胞浓度达到5X IO6个/mL时,置换新鲜的Dl液体培养基,培养5天,然后用油脂富集培养基继续培养60小时,所述的油脂富集培养基为Dl液体培养基的配方中去掉氮元素和/或硅元素得到的培 养基。如上所述的方法,优选地,步骤a中所述的诱变时间为350s。如上所述的方法,优选地,所述的油脂富集培养基为Dl液体培养基的配方中去掉NaNO3和Co (NO3)2 · 6H20得到的培养基。如上所述的方法,优选地,所述的油脂富集培养基为Dl液体培养基的配方中去掉NaSiO3 · 9H20得到的培养基。如上所述的方法,优选地,所述的油脂富集培养基为Dl液体培养基的配方中去掉NaNO3' Co (NO3)2 · 6H20 和 NaSiO3 · 9H20 得到的培养基。所述的Dl液体培养基的配方为权利要求1.一种高含油量小环藻突变株,其特征在于,它保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心CGMCC,保藏地址在北京市朝阳区北辰西路I号院3号中国科学院微生物研究所,保藏日期为2012年9月5日,保藏编号为CGMCC No. 6448。2.一种高含油量小环藻突变株的筛选及培养方法,其特征在于,步骤如下 a.取对数生长期的小环藻藻液,稀释至IO4个细胞/mL,在音频70KHz条件下,处理30(T450s进行诱变; b.将诱变后的藻液涂于Dl固体培养基上,培养15天后挑取成活的藻落,分别接种于新鲜的Dl固体培养基,在24°C、光暗培养时间比14 :10、光照培养时光照强度25001ex的条件下继续培养15天; c.将各藻落进行编号,并依次取少量藻体分别加入100μ L的Dl液体培养液中; d.向步骤c得到的各藻液中分别加入O.I mg/mL尼罗红染料O. I μ L,静置IOmin后,利用荧光显微镜观察各藻液中的油脂含量; e.取油脂含量高的藻株培养在Dl液体培养基中大量繁殖,在细胞浓度达到5X IO6个/mL时,置换新鲜的Dl液体培养基,培养5天,然后用油脂富集培养基继续培养60小时,所述的油脂富集培养基为Dl液体培养基的配方中去掉氮元素和/或硅元素得到的培养基。3.如权利要求2所述的方法,其特征在于,步骤a中所述的诱变时间为350s。4.如权利要求2或3所述的方法,其特征在于,所述的油脂富集培养基为Dl液体培养基的配方中去掉NaNO3和Co (NO3)2 · 6H20得到的培养基。5.如权利要求2或3所述的方法,其特征在于,所述的油脂富集培养基为Dl液体培养基的配方中去掉NaSiO3 · 9H20得到的培养基。6.如权利要求2或3所述的方法,其特征在于,所述的油脂富集培养基为Dl液体培养基的配方中去掉NaNO3、Co (NO3)2 · 6H20和NaSiO3 · 9H20得到的培养基。全文摘要本专利技术提供了一种高含油量小环藻突变株Cyclotella menghiniana,其特征在于,它保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心CGMCC,保藏地址在北京市朝阳区北辰西路1号院3号中国科学院微生物研究所,保藏日期为2012年9月5日,保藏编号为CGMCC No.6448。本专利技术还提供了一种高含油量小环藻突变株的筛选及培养方法。本专利技术筛选、检测过程中简单,耗时少,易于发现富含油脂的硅藻突变体,可用于筛选各种海水和淡水微藻的富油藻种以及通过各种诱变技术(紫外诱变、化学诱变、激光诱变等)诱变获得的富油微藻突变体。文档编号C12N13/00GK102943048SQ20121050590公开日2013年2月27日 申请日期2012年11月30日 优先权日2012年11月30日专利技术者黄迎春, 赵进东, 赵驰 申请人:北京联合大学生物化学工程学院本文档来自技高网...
【技术保护点】
一种高含油量小环藻突变株,其特征在于,它保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心CGMCC,保藏地址在北京市朝阳区北辰西路1号院3号中国科学院微生物研究所,保藏日期为2012年9月5日,保藏编号为CGMCC?No.6448。
【技术特征摘要】
【专利技术属性】
技术研发人员:黄迎春,赵进东,赵驰,
申请(专利权)人:北京联合大学生物化学工程学院,
类型:发明
国别省市:
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