一种可富集没食子酸的分子印迹聚合物的制备方法技术

一种可富集没食子酸的分子印迹聚合物的制备方法，以没食子酸为模板分子、以四氢呋喃和异辛烷的混合溶剂为致孔剂、以4-乙烯吡啶为功能单体、以乙二醇二甲基丙烯酸酯为交联剂，以偶氮二异丁腈为引发剂，经过混匀、氮吹脱氧、恒温水浴反应、索氏抽提和干燥后即可制得。本发明专利技术的优点和积极效果是：该制备方法工艺简单、成本低、易于实施，制备的分子印迹聚合物可用于从天然产物中分离提取没食子酸且使用寿命长，特别是对于一些没食子酸含量很低的天然产物，可实现快速富集纯化。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及分子印迹聚合物，特别是。
技术介绍
没食子酸(gallic acid，GA)，化学名称3，4，5-三羟基苯甲酸，是自然界存在的一种多酚类化合物。没食子酸及其衍生物在治疗冠心病、脑血栓、胃溃疡等疾病中显示出功效，具有较强的杀锥虫、抗炎、抑菌等作用；同时没食子酸还表现出对肿瘤形成的各个阶段的预防和抑制作用，对HIV-I整合酶的抑制作用以及抗乙肝病毒的功效。由于没食子酸的·多种生物学活性，使其在食品、医学等方面具有广阔的应用前景。因此，进一步开发含有没食子酸的天然资源有着重要的实际意义。分子印迹技术是以目标分子为模板分子，制备与模板分子在空间结构和结合位点上完全匹配的高分子聚合物。1972年，Wulff G.研究小组首次成功制备出分子印迹聚合物，使分子印迹技术有了突破性进展。1993年，Mosbach等关于茶碱分子印迹聚合物的报道推动了这一技术广泛应用。如今，分子印迹技术以其卓越的识别性和选择性，在手性药物分离、固相萃取、临床药物分析、膜分离技术、模拟酶催化、仿生传感器等领域都展现了良好的应用前景，并使其成为化学和生物学交叉的新兴领域之一。
技术实现思路
本专利技术的目的是针对上述技术分析，提供，利用该分子印迹聚合物与模板分子在空间结构和结合位点完全匹配的特性，直接从天然产物中分离、富集没食子酸，建立一种能够快速、安全、简便的没食子酸提取分离方法。本专利技术的技术方案，以没食子酸为模板分子、以四氢呋喃和异辛烷的混合溶剂为致孔剂、以4-乙烯吡啶为功能单体、以乙二醇二甲基丙烯酸酯为交联剂，以偶氮二异丁腈为引发剂，步骤如下I)将模板分子没食子酸和功能单体4-乙烯吡啶溶解在致孔剂四氢呋喃和异辛烷的混合溶剂中，混匀并搅拌3h ；2)加入交联剂乙二醇二甲基丙烯酸酯，混匀并搅拌30min ；3)再加入引发剂偶氮二异丁腈，混匀并搅拌20min，得到混合液；4)将上述混合液吹氮脱氧4min，恒温60°C下水浴48h，得到块状聚合物；5)将上述块状聚合物磨碎，用分级筛进行筛选并保留60目-100目的聚合物颗粒，然后将聚合物颗粒通过索氏抽提液抽提以去除未反应物，抽提时间为48h，得到分子印迹聚合物；6)将上述分子印迹聚合物在温度为60°C下干燥，即可制得可富集没食子酸的分子印迹聚合物。所述致孔剂中四氢呋喃和异辛烷的体积比为4:1。所述模板分子、功能单体和交联剂的摩尔比为1:5:12。所述引发剂偶氮二异丁腈的加入量为致孔剂、功能单体和交联剂总质量的O. 4%。所述索氏抽提液为体积比为9 1的甲醇和乙酸的混合液。一种上述方法制备的可富集没食子酸的分子印迹聚合物的应用，用于从鹿茸菌中分离、富集以提取没食子酸。本专利技术的优点和积极效果是该制备方法工艺简单、成本低、易于实施，制备的分 子印迹聚合物可用于从天然产物中分离提取没食子酸且使用寿命长，特别是对于一些没食子酸含量很低的天然产物，可实现快速富集纯化。附图说明附图为应用该分子印迹聚合物分离鹿茸菌粗提物中的没食子酸的测试图。图中峰A为没食子酸的测试值，峰B为原儿茶酸的测试值；曲线(I)为鹿茸菌粗提物的测试值，曲线(2)为经过没食子酸分子印迹柱分离纯化得到的洗脱液的测试值。具体实施例方式实施例，步骤如下I)将170mg没食子酸和536 μ L 4-乙烯吡啶溶解在4mL四氢呋喃和ImL异辛烷的混合溶剂中，混匀并搅拌3h ；2)加入2263 μ L乙二醇二甲基丙烯酸酯，混匀并搅拌30min ；3)再加入30mg偶氮二异丁腈，混匀并搅拌20min，得到混合液；4)将上述混合液吹氮脱氧4min，密封置于恒温水浴锅中在60°C下反应48h后，得到块状聚合物；5)将上述块状聚合物用研钵磨碎，用分级筛进行筛选并保留60目-100目的聚合物颗粒，然后将聚合物颗粒用250mL索氏抽提液抽提以去除未反应物，索氏抽提液为体积比为9 1的甲醇和乙酸的混合液，抽提时间为48h，得到分子印迹聚合物；6)将上述分子印迹聚合物在温度为60°C下干燥，即可制得可富集没食子酸的分子印迹聚合物。将该可富集没食子酸的分子印迹聚合物用于从鹿茸菌中分离、富集以提取没食子酸，实验方法及应用效果如下在一根4mL的SPE空管两端放置垫片，在其中均匀的装填150mg所制备的该分子印迹聚合物。将填有分子印迹聚合物的SPE用10mL10%甲醇平衡；将IOg鹿茸菌用300ml甲醇和30ml O. 2molL-l盐酸提取三次，合并提取液后，利用旋转蒸发去除溶剂，将得到的提取物溶于200ml水，用等体积乙酸乙酯萃取三次。合并乙酸乙酯相，并通过旋转蒸发去除溶齐IJ，最后得到鹿茸菌粗提物。将得到的鹿茸菌粗提物溶于150mL 10%的甲醇溶液；将150mL样品溶液过装有分子印迹聚合物的SPE柱，这时没食子酸就被吸附在富集材料上。然后用4mL 65%甲醇洗杂，洗去非特异性吸附在柱子上的物质，用20mL体积比为9:1的甲醇和乙酸混合液洗脱，得到的洗脱液利用旋转蒸发仪去除溶剂，最后用2ml甲醇溶解提取物，即为被分子印迹柱特异性吸附的没食子酸。 检测结果如附图所示，图中表明鹿茸菌粗提物中并未检测到没食子酸的存在，而经过分子印迹柱富集分离后，没食子酸得到了富集，由于原儿茶酸为没食子酸的结构类似物，分子印迹柱对其也有一定吸附作用，而鹿茸菌粗提物中的其他组分的含量都有所降低。由此可见，制备的没食子酸分子印迹聚合物能够吸附并富集样品中的没食子酸，从而达到富集纯化的目的。权利要求1.，其特征在于以没食子酸为模板分子、以四氢呋喃和异辛烷的混合溶剂为致孔剂、以4-乙烯吡啶为功能单体、以乙二醇二甲基丙烯酸酯为交联剂，以偶氮二异丁腈为引发剂，步骤如下 1)将模板分子没食子酸和功能单体4-乙烯吡啶溶解在致孔剂四氢呋喃和异辛烷的混合溶剂中，混匀并搅拌3h ； 2)加入交联剂乙二醇二甲基丙烯酸酯，混匀并搅拌30min； 3)再加入引发剂偶氮二异丁腈，混匀并搅拌20min，得到混合液； 4)将上述混合液吹氮脱氧4min，恒温60°C下水浴48h，得到块状聚合物； 5)将上述块状聚合物磨碎，用分级筛进行筛选并保留60目-100目的聚合物颗粒，然后将聚合物颗粒通过索氏抽提液抽提以去除未反应物，抽提时间为48h，得到分子印迹聚合物； 6)将上述分子印迹聚合物在温度为60°C下干燥，即可制得可富集没食子酸的分子印迹聚合物。2.根据权利要求I所述可富集没食子酸的分子印迹聚合物的制备方法，其特征在于所述致孔剂中四氢呋喃和异辛烷的体积比为4:1。3.根据权利要求I所述可富集没食子酸的分子印迹聚合物的制备方法，其特征在于所述模板分子、功能单体和交联剂的摩尔比为1:5:12。4.根据权利要求I所述可富集没食子酸的分子印迹聚合物的制备方法，其特征在于所述引发剂偶氮二异丁腈的加入量为致孔剂、功能单体和交联剂总质量的O. 4%。5.根据权利要求I所述可富集没食子酸的分子印迹聚合物的制备方法，其特征在于所述索氏抽提液为体积比为9 1的甲醇和乙酸的混合液。6.一种如权利要求I所述方法制备的可富集没食子酸的分子印迹聚合物的应用，其特征在于用于从鹿茸菌中分离、富集以提取没食子酸。全文摘要，以没食子酸为模板分子、以四氢呋喃和异辛烷的混合溶剂为致孔剂、以4-乙烯吡啶为功能单体、以乙二醇二甲基丙烯酸酯为本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种可富集没食子酸的分子印迹聚合物的制备方法，其特征在于：以没食子酸为模板分子、以四氢呋喃和异辛烷的混合溶剂为致孔剂、以4？乙烯吡啶为功能单体、以乙二醇二甲基丙烯酸酯为交联剂，以偶氮二异丁腈为引发剂，步骤如下：1）将模板分子没食子酸和功能单体4？乙烯吡啶溶解在致孔剂四氢呋喃和异辛烷的混合溶剂中，混匀并搅拌3h；2）加入交联剂乙二醇二甲基丙烯酸酯，混匀并搅拌30min；3）再加入引发剂偶氮二异丁腈，混匀并搅拌20min，得到混合液；4）将上述混合液吹氮脱氧4min，恒温60℃下水浴48h，得到块状聚合物；5）将上述块状聚合物磨碎，用分级筛进行筛选并保留60目？100目的聚合物颗粒，然后将聚合物颗粒通过索氏抽提液抽提以去除未反应物，抽提时间为48h，得到分子印迹聚合物；6）将上述分子印迹聚合物在温度为60℃下干燥，即可制得可富集没食子酸的分子印迹聚合物。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：刘方，李宁，王筱滢，赵蕊丽，张业尼，周蓉，
申请(专利权)人：南开大学，
类型：发明
国别省市：