一种黄曲霉毒素分子印迹材料及其制备方法和应用技术

本发明专利技术提供了一种黄曲霉毒素分子印迹材料，该印迹材料以活性白土为印迹载体，一方面活性白土来源广泛，价格低廉；另一方面，以活性白土作为印迹载体时，利用表面印迹技术制备得到的黄曲霉毒素表面印迹聚合物可以最大程度的使功能分子吸附孔穴分布在活性白土载体表面上，由此可提高分子印迹聚合物的结合速率和机械强度；本发明专利技术还提供了黄曲霉毒素分子印迹材料的制备方法，将黄曲霉毒素B1和功能单体溶解，加入表面硅烷化的活性白土、交联剂和引发剂，搅拌，过滤，收集滤渣，将滤渣洗涤，烘干，洗去模板分子，烘干，即制得黄曲霉毒素分子印迹材料，该制备方法制备步骤简单、稳定性好、成本低廉。

Aflatoxin molecular imprinting material, preparation method and application thereof

The invention provides a method for aflatoxin molecularly imprinted materials, the polymer with activated clay as imprinted carrier, a wide range of sources, low price of activated clay; on the other hand, the activated clay as imprinting carrier, using aflatoxin surface imprinted polymer prepared by surface imprinting technique system can make the function of molecular adsorption holes distributed on the surface of activated clay carrier to the maximum extent, which can improve the binding rate and mechanical strength of molecularly imprinted polymer; the invention also provides aflatoxin molecularly imprinted material preparation method of aflatoxin B1 and functional monomer dissolved, activated clay, adding silane crosslinking agent and the surface the initiator, stirring, filtering, collecting residue, the residue washing, drying, drying, wash away the template molecule, preparation of aflatoxin molecular imprinting The preparation method has the advantages of simple preparation process, good stability and low cost.

【技术实现步骤摘要】
一种黄曲霉毒素分子印迹材料及其制备方法和应用
本专利技术属于黄曲霉毒素的快速检测或高效吸附去除
，具体涉及一种黄曲霉毒素分子印迹材料及其制备方法和应用。
技术介绍
黄曲霉毒素是一种主要由黄曲霉真菌和寄生曲霉真菌产生的次级代谢产物，目前已分离鉴定出12种化学结构类似的化合物，黄曲霉毒素被世界卫生组织划定为1类致癌物，是一种毒性极强的剧毒物质，它可通过多种途径污染食品和饲料，直接或者间接进入人类食物链，威胁人类健康和生命安全，对人体及动物内脏器官(尤其是肝脏)损害严重，因此，黄曲霉毒素给全球食品工业、饲料工业和畜牧业造成巨大的经济损失，给人类健康和日常生活带来严重的危害。目前，去除黄曲霉毒素的方法主要有以下三种，即化学法、物理法和生物法。加酸、加碱和加氧化剂等化学方法，上述化学法大多存在效果不稳定、营养成份损失较大和难以规模化处理等缺点；酒精溶液提取法、高温法、紫外线照射法、电子束辐照、微波和光波联合处理等物理方法，上述物理法同样存在效果不稳定、营养成份损失较大和难以规模化处理等缺点，此外，物理法还包括通过物理吸附方法来去毒，饲料行业目前采用这种方法较多，常用的吸附剂包括硅藻土、硅铝酸盐和活性炭等，但上述物理吸附方法存在吸附效果差，不能实现对黄曲霉毒素的彻底吸附；生物法主要包括微生物转化和酶降解等生物技术手段来去除黄曲霉毒素，研究发现许多微生物包括细菌、酵母、霉菌、放线菌和藻类都能去除或降解食品和饲料中的黄曲霉毒素，但上述生物法需要在高水分活度的反应体系中才能有效降解黄曲霉毒素，限制了其在实际生产中的应用。目前，利用分子印迹技术设计或合成对某一种或某一类化合物具有特异性识别能力的交联聚合物，由于分子印迹聚合物具有空间构效与定性、特异识别性，且具有抗酸碱性强、使用寿命长、重现性好等优点，因而广泛应用到固相萃取、传感和生物模拟等领域，但由于现有技术中很少有对黄曲霉毒素具有很强识别功能的分子印迹材料，因此，应用分子印迹方法检测黄曲霉毒素的报道很少。
技术实现思路
本专利技术所要解决的技术问题在于克服现有技术中对应用分子印迹方法检测黄曲霉毒素的报道较少的缺陷，进而提供一种黄曲霉毒素分子印迹材料，并进一步提供了该印迹材料的制备方法与应用。本专利技术解决上述技术问题采用的技术方案为：本专利技术提供了一种黄曲霉毒素分子印迹材料，以活性白土为印迹载体。本专利技术还提供了上述黄曲霉毒素分子印迹材料的制备方法，包括如下步骤：(1)将活性白土与硅烷偶联剂加入到DMF溶液中，搅拌使其溶解，制得表面硅烷化的活性白土；(2)将黄曲霉毒素B1和功能单体溶解到乙腈-甲苯混合液中，静置后依次加入表面硅烷化的活性白土、交联剂和引发剂，在氮气保护下加热搅拌，过滤，收集滤渣，将滤渣依次用乙腈、DMF、蒸馏水和甲醇分别洗涤三次，烘干，即制得分子印迹聚合物；(3)将步骤(2)中制备得到的分子印迹聚合物研碎，装入索氏萃取器中，用甲醇洗去模板分子；(4)将步骤(3)中洗去模板分子的分子印迹聚合物依次用蒸馏水和甲醇分别洗涤三次，烘干，即制得黄曲霉毒素分子印迹材料。步骤(1)中，所述硅烷偶联剂为KH570，所述搅拌温度为80～120℃，时间为12～24h。步骤(2)中，所述黄曲霉毒素B1与所述功能单体、所述硅烷化的活性白土、所述交联剂的质量比为0.1：(0.3～1.0)：(2～5)：(1.87～2.12)。步骤(2)中，每0.1g所述黄曲霉毒素B1所需加入的引发剂的体积为100～150mL；所述重量份与体积份的关系为g/mL。所述功能单体为甲基丙烯酸酯或三氟甲基丙烯酸酯；所述交联剂为乙二醇二甲基丙烯酸酯或三羟甲基丙烷三甲基丙烯酸酯；所述引发剂为偶氮二异丁腈或偶氮二异庚腈。步骤(2)中，所述乙腈-甲苯混合液中乙腈与甲苯的体积比为(2～5):1。静置温度为4℃，时间为12～20h；加热搅拌温度为65～85℃，时间为12～24h。烘干温度为55～65℃，时间为7.5～8.5h。步骤(4)中，烘干温度为55～65℃，时间为7.5～8.5h。本专利技术还提供包括上述黄曲霉毒素分子印迹材料或上述制备方法制备得到的黄曲霉毒素分子印迹材料在黄曲霉毒素的快速检测或黄曲霉毒素的高效吸附去除方面的应用。本专利技术的上述技术方案具有如下优点：(1)本专利技术所述的黄曲霉毒素分子印迹材料，以活性白土为印迹载体，一方面活性白土来源广泛，价格低廉，已经被广泛的应用到油脂加工中；另一方面，以活性白土作为印迹载体时，利用表面印迹技术制备得到的黄曲霉毒素表面印迹聚合物可以最大程度的使功能分子吸附孔穴分布在活性白土载体表面上，由此可提高分子印迹聚合物的结合速率和机械强度，降低制造成本。(2)本专利技术所述的黄曲霉毒素分子印迹材料的制备方法，首先将活性白土与硅烷偶联剂加入到DMF溶液中，搅拌后制得表面硅烷化的活性白土；然后将黄曲霉毒素B1和功能单体溶解到乙腈-甲苯混合液中，静置后依次加入表面硅烷化的活性白土、交联剂和引发剂，在氮气保护下加热搅拌，过滤，收集滤渣，将滤渣依次用乙腈、DMF、蒸馏水和甲醇分别洗涤三次，烘干，即制得分子印迹聚合物；然后将制备得到的分子印迹聚合物研碎，装入索氏萃取器中，用甲醇洗去模板分子；最后将洗去模板分子的分子印迹聚合物依次用蒸馏水和甲醇分别洗涤三次，烘干，即制得黄曲霉毒素分子印迹材料，上述制备方法制备得到的黄曲霉毒素分子印迹材料具有高效特异性吸附能力，可以用作固相萃取材料，可客服环境样品体系复杂的预处理过程，有效进行样品的富集和分离，相对免疫亲和层析柱，制备步骤简单、稳定性好、使用寿命长、成本低廉，可广泛应用在食品、饲料和环境保护领域黄曲霉毒素痕量分析中。(3)本专利技术所述的黄曲霉毒素分子印迹材料，由于本材料对黄曲霉毒素的高效吸附和制备成本低廉，因而可作为吸附材料在食品、饲料加工领域大规模使用，可以有效降低产品中黄曲霉毒素的含量。附图说明为了更清楚地说明本专利技术具体实施方式中的技术方案，下面将对具体实施方式描述中所需要使用的附图作简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图是本专利技术的一些实施方式，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图获得其他的附图。图1为本专利技术实施例1制备的黄曲霉毒素分子印迹材料的红外图谱。具体实施方式下面将对本专利技术的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例是本专利技术一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本专利技术中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本专利技术保护的范围。此外，下面所描述的本专利技术不同实施方式中所涉及的技术特征只要彼此之间未构成冲突就可以相互结合。实施例1本实施例提供的黄曲霉毒素分子印迹材料的制备方法包括如下步骤：(1)将活性白土与硅烷偶联剂加入到DMF溶液中，并在80℃下搅拌24h使其溶解，制得表面硅烷化的活性白土；(2)将黄曲霉毒素B1作为模板分子，称取0.1g黄曲霉毒素B1和1.0g甲基丙烯酸酯溶解到80mL乙腈-甲苯混合液中，上述乙腈-甲苯混合液中乙腈与甲苯的体积比为2:1，将上述混合液静置在4℃冰箱中静置20h后，依次加入2g表面硅烷化的活性白土、2.12g乙二醇二甲基丙烯酸酯和100mL偶氮二异丁腈，在氮气保护下85℃搅拌12h后，过滤，收集滤渣，将滤渣依次用40mL本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种黄曲霉毒素分子印迹材料，其特征在于，以活性白土为印迹载体。

【技术特征摘要】
1.一种黄曲霉毒素分子印迹材料，其特征在于，以活性白土为印迹载体。2.一种权利要求1所述的黄曲霉毒素分子印迹材料的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：(1)将活性白土与硅烷偶联剂加入到DMF溶液中，搅拌使其溶解，制得表面硅烷化的活性白土；(2)将黄曲霉毒素B1和功能单体溶解到乙腈-甲苯混合液中，静置后依次加入表面硅烷化的活性白土、交联剂和引发剂，在氮气保护下加热搅拌，过滤，收集滤渣，将滤渣依次用乙腈、DMF、蒸馏水和甲醇分别洗涤三次，烘干，即制得分子印迹聚合物；(3)将步骤(2)中制备得到的分子印迹聚合物研碎，装入索氏萃取器中，用甲醇洗去模板分子；(4)将步骤(3)中洗去模板分子的分子印迹聚合物依次用蒸馏水和甲醇分别洗涤三次，烘干，即制得黄曲霉毒素分子印迹材料。3.根据权利要求2所述的黄曲霉毒素分子印迹材料的制备方法，其特征在于，步骤(1)中，所述硅烷偶联剂为KH570，所述搅拌温度为80～120℃，时间为12～24h。4.根据权利要求2或3所述的黄曲霉毒素分子印迹材料的制备方法，其特征在于，步骤(2)中，所述黄曲霉毒素B1与所述功能单体、所述硅烷化的活性白土、所述交联剂的质量比为0.1：(0.3～1.0)：(2～5)：(1.87～2.12)。5.根据权利要求...

【专利技术属性】
技术研发人员：沈连红，
申请(专利权)人：理星天津生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：天津,12