氟氰戊菊酯分子印迹固相萃取柱的制备方法及在烟叶分析中的应用技术

本发明专利技术专利涉及化工有机分析技术领域，具体是氟氰戊菊酯分子印迹固相萃取柱的制备方法及在烟叶分析中的应用。本发明专利技术步骤如下：a、将氟氰戊菊酯和α‑甲基丙烯酸MAA放入安瓿瓶中；b、加入四氢呋喃，振摇；c、在b步骤得到的溶液中加乙二醇二甲基丙烯酸酯和偶氮二异丁腈；超声，通入N

Preparation of fenvalerate molecularly imprinted solid phase extraction column and its application in tobacco leaf analysis

The invention relates to the technical field of chemical organic analysis, in particular to the preparation method of a molecularly imprinted solid-phase extraction column of fenvalerate and the application in the analysis of tobacco leaves. The invention comprises the following steps: A, Flucythrinate and alpha methacrylate MAA into the ampoule bottle; B, adding tetrahydrofuran, shaking; solution C, in the B step in with two ethylene glycol methacrylate and two azo isobutyronitrile; ultrasonic, pass into the N

【技术实现步骤摘要】
氟氰戊菊酯分子印迹固相萃取柱的制备方法及在烟叶分析中的应用
本专利技术专利涉及化工有机分析
，具体是氟氰戊菊酯分子印迹固相萃取柱的制备方法及在烟叶分析中的应用。
技术介绍
氟氰戊菊酯是一种广谱性拟除虫菊酯类杀虫剂，近年来在我国已被广泛应用于预防烟草害虫。按中国农药毒性分级标准，氟氰戊菊酯及其结构类似物属于低毒杀菌剂，雄性大鼠急性经口LD50为81mg/kg，雌性为67mg/kg。超标使用必然会导致烟草制品及食品的安全出现隐患，相关检测部门给予高度的重视。氟氯戊菊酯及其结构类似物对于人体有不良干扰作用。这些物质主要导致：⑴损害神经系统；⑵皮肤黏膜刺激性伤害。由于烟草成分复杂，致使干扰成分增加，而分析物处于痕量状态，样品前处理（分离待检物）成为安全分析的关键步骤。目前传统的样品前处理技术存在处理时间长、操作繁琐、选择性差等缺点。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供一种氟氯戊菊酯分子印迹固相萃取柱的制备方法，克服了现有固相萃取方法的不足，应用于烟叶中氟氯戊菊酯及其结构类似物残留分析中。本专利技术技术方案步骤如下：a、选取氟氰戊菊酯与α-甲基丙烯酸的摩尔配比为1:6；将模板分子氟氰戊菊酯0.1mmol和功能单体α-甲基丙烯酸MAA0.6mmol，放入50mL的安瓿瓶中；b、安瓿瓶中加入18mL四氢呋喃使其反应，振摇；c、将在b步骤得到的溶液中再加乙二醇二甲基丙烯酸酯EDMA8mmol和偶氮二异丁腈AIBN0.03g；超声1h后，通入N2脱氧15min后，抽真空1min后密封；d、将步骤c得到的反应体系在60℃的恒温水浴中静置15h，得块状白色固体氟氰戊菊酯分子印迹聚合物MIP；e、将步骤d中所得印迹聚合物经研磨、粉碎，过200目筛，再用去离子水沉降聚合物3次除去过细粉末；将最终得到的MIP颗粒用甲醇:乙酸（体积比95:5）洗脱至无模板分子，最后用甲醇浸泡1h除去残留的乙酸，洗脱后的聚合物放入真空干燥器中，40℃条件下，干燥10h，得到具有特异性识别的氟氰戊菊酯分子印迹聚合物MIP；f、称取步骤e中所制备的分子印迹聚合物MIP100g，溶于水中装入内径为1.5cm的固相萃取空柱内，用固相萃取装置将水抽出后，再用水淋洗柱子，最后在上端再加上少许脱脂棉，轻轻挤压使柱子填充紧实备用，即制备成氟氰戊菊酯分子印迹固相萃取柱。进一步，所述的致孔剂为四氢呋喃。进一步，所述的交联剂为乙二醇二甲基丙烯酸酯。进一步，所述引发剂为偶氮二异丁腈。一种采用上述方法制备的氟氰戊菊酯分子印迹固相萃取柱在烟叶分析中的应用，具体步骤如下：a、绘制氟氰戊菊酯的线性关系曲线及检测限将氟氰戊菊酯分别配制成质量浓度为200、100、50、20、10、5、2、1、0.5μg/mL的一系列标准溶液，绘制氟氰戊菊酯的线性关系曲线；氟氰戊菊酯的线性关系及检测限b、新鲜烟叶样品前处理称取5.000g新鲜烟叶样品，捣碎，加入6.000g无水硫酸钠，用以除去样品中过多的水分，加入10mL四氢呋喃混匀，超声15min，于4000r/min离心10min，收集分离液；再加入10mL四氢呋喃混匀，超声15min，于4000r/min离心10min，收集分离液与头次分离液合并，过氟氰戊菊酯分子印迹固相萃取柱，用20mL水淋洗，待排净淋洗液后，用10mL甲醇洗脱，收集洗脱液留待色谱检测；c、色谱检测条件色谱柱：agelaC18（4.6×150mm，5μm），检测波长200nm，流动相为甲醇-水，甲醇：水体积比为90:10，流速1mL/min，柱温为25℃，进样量20µL；d、分析检测结果利用利用a步骤绘制的氟氰戊菊酯的性关系曲线线性关系曲线分析色谱检测结果。本专利技术采用本体聚合方法制备氟氯戊菊酯分子印迹聚合物，所制备的聚合物经研磨、漂洗、过筛、洗脱、干燥等一系列处理后，再经高效液相色谱法对其进行评价分析即可得到具有特异性吸附效果的聚合物材料，并制备成分子印迹固相萃取柱，用于样品净化，对烟叶中氟氯戊菊酯进行分离和富集，用于对氟氯戊菊酯的检测分析。本专利技术的设计思路为：固相萃取（solidphaseextraction，SPE）具有较多优势，如具有高的回收率和高的富集倍数；使用有机溶剂少，减少了对环境的污染；固相分离操作易于收集分析物组分，能处理小体积试样；操作简单快速，易实现自动化。分子印迹聚合物（MolecularlyImprintedPolymers，MIPs）是指为获得在空间构型和结合位点上与某一目标化合物（模板分子或印迹分子）完全匹配的高分子聚合物，分子印迹技术被形象的比喻为制造识别“分子钥匙”的“人工锁”技术。MIPs作为SPE的吸附剂可以弥补普通吸附剂选择性差的不足，而且要比免疫吸附剂的稳定性好，还可以重复使用，使痕量被分析物在复杂样品中得到分离富集。选择分子印迹固相萃取技术是指为获得在空间构型和结合位点上与某一目标化合物（模板分子或印迹分子）完全匹配的高分子聚合物，分子印迹技术被形象的比喻为制造识别“分子钥匙”的“人工锁”技术。分子印迹固相萃取技术能够克服烟叶样品体系复杂、预处理繁琐等不利因素，达到分离纯化的目的，从而降低检测限，提高分析的精密度和准确性，为痕量组分的富集和分析提供极大的方便。分子印迹固相萃取技术具有以下优点:(1)对目标物能进行特异性吸附；(2)能耐高温、高压、有机溶剂；(3)重复使用次数多；⑷稳定性好、使用寿命长等优点。它克服了样品体系复杂、预处理繁琐等缺点，因此它已成为分子印迹技术在分析检测中最具应用前景的研究热点。本专利技术的有益效果是所提供的分子印迹固相萃取柱可用于烟叶中氟氰戊菊酯以及结构类似物的选择性吸附和富集，适合烟草检测单位、科研单位及卷烟生产企业对产品的监控时使用。与普通的固相萃取柱相比，分子印迹固相萃取柱具有制备过程简单、特异性好、重现性高、分离效果好、回收率高、可反复使用、精密度高等特点。附图说明图1氟氰戊菊酯与MAA功能单体紫外吸收光谱；图2氟氰戊菊酯与AM功能单体紫外吸收光谱；图3氟氰戊菊酯分子印迹聚合物300nmSEM图；图4氟氰戊菊酯分子印迹聚合物500nmSEM图；图5氟氰戊菊酯分子印迹聚合物1.00umSEM图；图6新鲜烟叶Ⅰ样品洗脱液色谱图；图7新鲜烟叶Ⅱ样品洗脱液色谱图；图8氟氰戊菊酯分子印迹固相萃取柱结构示意图；图9本专利技术反应中的分子结构图。图中：M为氟氰戊菊酯；MAA为α-甲基丙烯酸；AM为丙烯酰胺；E1为混合物实际测定吸光值；E2为混合物理论吸光值；氟氰戊菊酯分子印迹聚合物（未洗脱前空穴状态）为具有特异性识别的分子印迹聚合物；氟氰戊菊酯分子印迹聚合物（洗脱后空穴状态）为待重复利用时的具有特异性识别的分子印迹聚合物。具体实施方式以下实施例可使专业技术人员全面理解本专利技术，但不以任何方式限制本专利技术。在制备氟氰戊菊酯分子印迹固相萃取柱之前，本专利技术作了如下前期试验：（一）功能单体种类的确定由于混合物在同一波长下紫外吸光值小于模板物质与功能单体分别测定的紫外吸光值的加和（即理论吸光值），可知模板物质与功能单体间发生了相互作用（如图1、图2所示）。由实验结果可知，氟氰戊菊酯-MAA实测值与理论值差值为1.956，氟氰戊菊酯-AM实测值与理论值差值为1.910。由差值看出氟氰戊菊酯与MAA结合力较大，证明了利用MAA合成本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种氟氯戊菊酯分子印迹固相萃取柱的制备方法，其特征在于步骤如下：a、选取氟氰戊菊酯与α‑甲基丙烯酸的摩尔配比为1:6；将模板分子氟氰戊菊酯0.1mmol和功能单体α‑甲基丙烯酸MAA0.6mmol，放入50mL的安瓿瓶中；b、安瓿瓶中加入18mL四氢呋喃使其反应，振摇；c、将在b步骤得到的溶液中再加乙二醇二甲基丙烯酸酯EDMA 8mmol和偶氮二异丁腈AIBN 0.03g；超声1h后，通入N

【技术特征摘要】
1.一种氟氯戊菊酯分子印迹固相萃取柱的制备方法，其特征在于步骤如下：a、选取氟氰戊菊酯与α-甲基丙烯酸的摩尔配比为1:6；将模板分子氟氰戊菊酯0.1mmol和功能单体α-甲基丙烯酸MAA0.6mmol，放入50mL的安瓿瓶中；b、安瓿瓶中加入18mL四氢呋喃使其反应，振摇；c、将在b步骤得到的溶液中再加乙二醇二甲基丙烯酸酯EDMA8mmol和偶氮二异丁腈AIBN0.03g；超声1h后，通入N2脱氧15min后，抽真空1min后密封；d、将步骤c得到的反应体系在60℃的恒温水浴中静置15h，得块状白色固体氟氰戊菊酯分子印迹聚合物MIP；e、将步骤d中所得印迹聚合物经研磨、粉碎，过200目筛，再用去离子水沉降聚合物3次除去过细粉末；将最终得到的MIP颗粒用甲醇:乙酸（体积比95:5）洗脱至无模板分子，最后用甲醇浸泡1h除去残留的乙酸，洗脱后的聚合物放入真空干燥器中，40℃条件下，干燥10h，得到具有特异性识别的氟氰戊菊酯分子印迹聚合物MIP；f、称取步骤e中所制备的分子印迹聚合物MIP100g，溶于水中装入内径为1.5cm的固相萃取空柱内，用固相萃取装置将水抽出后，再用水淋洗柱子，最后在上端再加上少许脱脂棉，轻轻挤压使柱子填充紧实备用，即制备成氟氰戊菊酯分子印迹固相萃取柱。2.如权利要求1所述的一种氟氯戊菊酯分子印迹固相萃取柱的制备方法，其特征在于所述的致孔剂为四氢呋喃。3.如权利要求1所述的一种氟氯戊菊酯分子印迹固相萃取柱的制备方法，其特征在于所述的交联剂为乙...

【专利技术属性】
技术研发人员：刘博，尹航，
申请(专利权)人：尹航，
类型：发明
国别省市：河北,13