优化的甘露聚糖酶基因及其重组植物表达载体和应用制造技术

本发明专利技术公开了优化的甘露聚糖酶基因及其重组植物表达载体和应用。本发明专利技术将甘露聚糖酶基因通过密码子优化以及提高mRNA二级结构稳定性等措施得到SEQ?ID?NO.1所示的优化甘露聚糖酶基因；本发明专利技术进一步构建了含有原始甘露聚糖酶基因或优化甘露聚糖酶基因的重组植物表达载体并将其转化到玉米中筛选得到种子中高效表达甘露聚糖酶的转甘露聚糖酶基因玉米植株；酶学性质测定表明，优化的甘露聚糖酶基因能在玉米中稳定、高效的表达及遗传，所表达的甘露聚糖酶酶活以及稳定性显著高于原始甘露聚糖基因在玉米中所表达的甘露聚糖酶的酶活及稳定性。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及优化的甘露聚糖酶基因以及含有该优化基因的重组植物表达载体，本专利技术进一步涉及它们在制备表达甘露聚糖酶转基因植物中的应用，属于转基因植物领域。
技术介绍
甘露聚糖是植物半纤维素的主要成份之一，以β -I, 4-D-吡喃甘露糖苷键连接而成的线性多糖，分为甘露聚糖、葡萄甘露聚糖、半乳甘露聚糖。在饲料作物(如麦类、豆柏、玉米)中不能被单胃动物分解，是目前大量应用的玉米/豆柏型饲料中主要的抗营养因子。它们能结合大量的水，使采食动物消化道中食糜的体积增大、粘度增加、养分与消化道内源酶的作用降低、营养物质的消化率下降。造成动物生长受阻、饲料转化率降低，从而使其代谢受到抑制(Liepman AH, et al. , Plant Physiol 143:1881β-甘露聚糖酶(EC3. 2. 1.78):水解β _1，4_D_吡喃甘露糖为主链的内切水解酶，作用底物主要是甘露聚糖、半乳甘露聚糖、葡萄甘露聚糖、以及半乳葡萄甘露聚糖。主要来源于低等动物、植物、微生物，微生物来源的β_甘露聚糖酶具有活力高、成本低、来源稳定、提取方便等明显优点，已在实际生产和基础研究中得到广泛应用。在饲料行业本文档来自技高网...

【技术保护点】
优化的甘露聚糖酶基因，其特征在于：其核苷酸序列为SEQ？ID？NO.1所示。

【技术特征摘要】
1.优化的甘露聚糖酶基因，其特征在于其核苷酸序列为SEQID NO. I所示。2.含有权利要求I所述优化的甘露聚糖酶基因的重组表达载体；优选的，所述重组表达载体是重组植物表达载体。3.—种重组植物表达载体，其特征在于，包括启动子序列、原始的甘露聚糖酶基因或权利要求I所述的优化的甘露聚糖酶基因，信号肽和蛋白体定位序列以及终止子序列。4.按照权利要求3所述的重组植物表达载体，其特征在于所述的启动子为单子叶植物组成型启动子、单子叶植物诱导型启动子或单子叶植物组织特异性启动子。5.一种构建权利要求3或4所述重组植物表达载体的方法，包括将信号肽和蛋白体定位序列，原始的甘露聚糖酶基因或权利要求I所述的优化的甘露聚糖酶基因和终止子序列连接在一起后，可 呆作的连接到启动子序列之后。6.一种制备表达甘露聚糖酶的转基因植物的方法，该方法包括以下步骤 (1)构建含有原始甘露聚糖酶基因或权利要求I...

【专利技术属性】
技术研发人员：姚斌，杨培龙，孟昆，张宇宏，徐晓露，袁建华，陈茹梅，孟庆长，张伟，
申请(专利权)人：中国农业科学院饲料研究所，
类型：发明
国别省市：