一种新孢子虫特异PCR检测试剂盒及制备方法技术

本发明专利技术提供一种新孢子虫特异nest-PCR检测试剂盒，用于不同动物新孢子虫虫感染速殖子、组织包囊和卵囊的检测，本发明专利技术还公开了上述nest-PCR检测试剂盒的制备方法，nest-PCR扩增新孢子虫基因某一特异分子片段，用于新孢子虫病的诊断；本发明专利技术涉及的新孢子虫和弓形抑制性杂交消减文库筛选到的新孢子虫特异基因SEQno.1为新孢子虫特有基因，因此用nest-PCR法扩增动物组织及粪便样品的SEQno.1基因部分片段可以用于新孢子虫的分子检测，可以用来诊断新孢子虫急性、慢性及隐性感染。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术提供一种 新孢子虫特异nest-PCR检测试剂盒，用于不同动物新孢子虫虫感染速殖子、组织包囊和卵囊的检测，本专利技术还公开了上述nest-PCR检测试剂盒的制备方法，属于分子生物学检测

技术介绍
新孢子虫作为一种顶复门寄生虫,经系统发育学分析核糖体DNA表明其与弓形虫heydorni在亲缘关系上比较近,在一般的实验检测方法主要以血清学方法为主，包括IFAT，ELISA，PCR等，由于不同于抗原在寄生虫不同阶段的表达和抗体的产生不同，因此ELISA和IFTA不能检测到寄生虫生活史的所有阶段感染，特别是在终宿主和有性增殖阶段。基因组DNA是十分稳定的，贯穿于寄生虫整个生活史，但是目前的新孢子虫PCR检测方法在低丰度样本中存在灵敏度低、特异性差的特点。因此找到新孢子虫特异基因并建立特异的分子生物学诊断方法对寄生虫诊断是有利的。Nest-PCR方法是这些方法中特异性最强、敏感性最高。国内外对于新孢子虫病的检疫诊断还相对比较落后，国内很多实验室建设仍然还是空白，对该病的检测仍然采用ELISA、IFTA和PCR，远不能满足实际需要。因此，开发简便易行、快速、灵敏、特异的分子本文档来自技高网...

【技术保护点】
新孢子虫特异基因序列，其特征在于：如SEQ？no.1所示。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：李建华，张西臣，贺鹏飞，宫鹏涛，吕强，李赫，杨举，王伟利，张国才，任文陟，
申请(专利权)人：吉林大学，
类型：发明
国别省市：