基于家蚕血淋巴分离的家蚕微孢子虫感染鳞翅目昆虫细胞的方法技术

本发明专利技术公开了基于家蚕血淋巴分离的家蚕微孢子虫感染鳞翅目昆虫细胞的方法，具体方法如下：先饲养家蚕并用家蚕微孢子虫进行感染，饲养直至家蚕上蔟结茧；然后将结茧后的蚕蛹进行表面消毒，取蚕蛹血淋巴，筛选成功感染家蚕微孢子虫的蚕蛹血淋巴加入鳞翅目昆虫细胞sf9中培养，即获得感染家蚕微孢子虫的sf9细胞。本发明专利技术的方法步骤简单，感染效率高，并且不容易引入杂菌，实现了家蚕微孢子虫对鳞翅目昆虫细胞高效而稳定的侵染，为家蚕微孢子虫功能基因组、遗传操作、侵染机制等方面的研究材料提供了新的制备方法。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于生物
，具体涉及基于家蚕血淋巴分离的家蚕微孢子虫感染鳞翅目昆虫细胞的方法。
技术介绍
微孢子虫(microsporidia)是一类专性细胞内寄生的单细胞真核生物，其寄主极为广泛，几乎能够感染从无脊椎动物到脊椎动物甚至包括人在内的所有动物。微孢子虫是昆虫、鱼类、啮齿类动物、兔类、皮毛动物及灵长动物的重要病原，同时也是蝗虫生物防治的杀虫剂。经过长期的演化，微孢子虫已展现出了十分丰富的物种多样性，目前已被鉴定发现的微孢子虫已超过1400多种，分布于超过150个属，并且每年都还有新的物种被发现。家蚕微孢子虫(Nosema bombycis，N.b)是第一个被人们所鉴别的微孢子虫，由瑞士植物学家Carl于1857年在家蚕中发现并命名，其寄生于家蚕体内引发家蚕微粒子病，2012年，国际原生生物进化和分类委员会认可了将微孢子虫归于真菌。因其可经卵垂直传播而被世界各养蚕国家和地区列为蚕业生产的唯一法定检疫对象。目前该病害仍然对蚕业生产产生着巨大的危害。作为自然界中最成功的寄生虫之一，微孢子虫对人类的生产生活具有巨大的威胁，有大量学者对微孢子虫的形态结构、遗传进化、致病机理等生物本文档来自技高网...

【技术保护点】
基于家蚕血淋巴分离的家蚕微孢子虫感染鳞翅目昆虫细胞的方法，其特征在于，包括如下步骤：1)饲养家蚕并用家蚕微孢子虫进行感染，然后饲养至家蚕上蔟结茧；2)将结茧后的蚕蛹进行表面消毒，取蚕蛹血淋巴，然后筛选成功感染家蚕微孢子虫的蚕蛹血淋巴加入鳞翅目昆虫细胞sf9中培养，即获得感染家蚕微孢子虫的sf9细胞。

【技术特征摘要】
1.基于家蚕血淋巴分离的家蚕微孢子虫感染鳞翅目昆虫细胞的方法，其特征在于，包括如下步骤：1)饲养家蚕并用家蚕微孢子虫进行感染，然后饲养至家蚕上蔟结茧；2)将结茧后的蚕蛹进行表面消毒，取蚕蛹血淋巴，然后筛选成功感染家蚕微孢子虫的蚕蛹血淋巴加入鳞翅目昆虫细胞sf9中培养，即获得感染家蚕微孢子虫的sf9细胞。2.根据权利要求1所述基于家蚕血淋巴分离的家蚕微孢子虫感染鳞翅目昆虫细胞的方法，其特征在于：步骤1)为将家蚕5龄起蚕，按照104个家蚕微孢子虫每头将家蚕微孢子虫混悬液涂抹在桑叶上进行添食，饲养直至上蔟结茧。3.根据权利要求1所述基于家蚕血淋巴分离的家蚕微孢子虫感染鳞翅目昆虫细胞的方法，其...

【专利技术属性】
技术研发人员：李春峰，孙滨，潘国庆，周泽扬，许晨，
申请(专利权)人：西南大学，
类型：发明
国别省市：重庆;50