一种聚乙二醇干扰素偶联物制造技术

本发明专利技术公开了一种聚乙二醇干扰素偶联物，其制备方法，以及含有治疗有效量的该干扰素偶联物的药物组合物，及其在制备抗病毒、抗肿瘤、免疫调节药物中的用途。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及一种聚乙二醇干扰素偶联物，该偶联物通过一种新颖的生物蛋白分子的聚乙二醇修饰技术合成，具有抗病毒感染、抗肿瘤、免疫调节等生物学活性，本专利技术的应用领域涉及生物化学、药物化学以及人类疾病的治疗。
技术介绍
干扰素(Interferon)是一组具有多种功能的活性蛋白质，是一类重要的家族性细胞因子，具有广谱的抗病毒、抗细胞增殖、和免疫调节作用。哺乳动物的干扰素可以分为α、β、Y、ω等几种类型，其中α干扰素又可分十余种亚型，经大量临床研究证明α型干扰素是一种重要的抗病毒和抗肿瘤治疗药物。目前我国在临床使用最广泛的主要是重组人干扰素a lb、a 2b和a 2a。另外，美国Amgen公司根据13种α型干扰素的基因序列同源性，设计出的一种全新的蛋白质工程药物干复津(INFERGEN ，IFN-Con-I)于1997年经FDA 批准上市用于治疗丙型肝炎，其病毒活性是a 2b干扰素的5 10倍。但是，一般来说，许多有生物技术(如基因重组)表达所得的产品，包括干扰素，都是通过非肠道给药途径而进入生物体内发挥其药效作用。此类由非肠道给药的生物大分子药物产品通常存在下面的一些问题(I)生物大分子药物往往具有致敏性反应，生物体内产生的抗体会对生物体造成严重的伤害并影响治疗的进行；(2)生物大分子药物本身因受到抗体的影响或因蛋白分解酶而引起的代谢作用，致使其生物半衰期大为缩短；(3)生物大分子的稳定性差，保存困难。所以，无论是干扰素alb、a2b和a 2a还是干复津，作为蛋白质药物，由于稳定性差，血浆清除率高，体内半衰期短，易产生抗原抗体反应等，在临床治疗中受到很大的限制，这些缺点造成的结果是需频繁注射干扰素才能达到有效的血浆治疗浓度；而且，每次注射后均会导致血液浓度的较大波动，形成药物浓度的峰值与谷值。这样就可能增加了治疗费用以及给药不便和不良反应的风险。因此，人们试图采用各种药物传递技术(Drug Delivery Technology),来提高蛋白质药物的疗效。而目前在药物传递技术中研究最为广泛的是聚乙二醇修饰技术(PEGN0L0GY)。1980年，Davis等人在美国专利4，179, 337中公开了利用单一分子不同聚合度的聚乙二醇对蛋白药物进行的化学修饰，在保持药物的生物活性同时，药物的抗原性降低，Verones等人在Applied Biochem and Biotech 11，142 (1985)上公开发表了用氯甲酸苯酯活化的聚乙二醇修饰核糖核酸酶和超氧化物歧化酶，增加了蛋白的生物半衰期。上述现有技术文献报导已表明聚乙二醇修饰技术的确可以解决非肠道给药生物大分子药物存在的一些问题。目前，市场上已经有两种聚乙二醇化干扰素产品，分别是Schering Plough公司的PEG-IFN a 2b (PEG-INTR0N)与 Hoffman-la Roche 公司的 PEG-IFN a 2a (PEGASYS)，提高了干扰素在体内的半衰期，达到每周注射一次，使得干扰素的生物利用度得到了一定程度的提升。这两个产品已占有国外干扰素市场60 %，获得了巨大的经济效益。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供一种生物学活性更好、生物利用度更高的的聚乙二醇修饰的干扰素偶联物，其结构如式(I )所示P-NH-CH2-X-S-Y-Q( I )其中，P是干扰素，包括所有类型的干扰素，以及这些类型所有的亚类，以及不同类型和/或亚类干扰素组成的复合干扰素；p可以是任何来源的，包括天然来源、组织培养或由基因重组技术得到的干扰素#优选天然的或人工重组的干扰素蛋白，更优选重组人干扰素，更优选重组人干扰素α、β、Y或ω，最优选a 2b ；P既可通过本领域公开的技术制得，也可在市场上购得； X是-(CH2) k-或-CH2 (OCH2CH2) k_，k选自2 10的整数，优选I 4，进一步优选为2 ；Q为甲氧基聚乙二醇，其平均分子量优选5，000 40，000道尔顿，更优选20，000道尔顿；Y选自Yl Y12，其中，m、η各自独立地选自2 10的整数，优选为2，权利要求1.一种结构如式(I)所示的干扰素偶联物， P-NH-CH2-X-S-Y-Q(I) 其中，P是干扰素;X是-(CH2)k-或-CH2(OCH2CH2)k-，k选自I 10的整数；0是甲氧基聚乙二醇；Y选自Yl Y12 2.根据权利要求I所述的干扰素偶联物，其特征在于，所述偶联物选自式(II ) 3.根据权利要求I或2所述的干扰素偶联物，其特征在于，所述干扰素包括所有类型的干扰素及其亚类，或者不同类型和/或亚类干扰素组成的复合干扰素。4.根据权利要求3所述的干扰素偶联物，其特征在于，所述干扰素是重组人干扰素a、3、Y或《，优选重组人干扰素a，更优选重组人干扰素a 2b。5.根据权利要求4所述的偶联物,其特征在于，m= 2, n = 2。6.根据权利要求5所述的偶联物，其特征在于，X是-(CH2)k-,k为I 4，优选k = 2。7.根据权利要求6所述的干扰素偶联物，其特征在于，Hi1选自450-600之间的整数。8.根据权利要求7所述的干扰素偶联物，其特征在于，每个甲氧基聚乙二醇基团的平均分子量为5，000-40, 000道尔顿，优选为20，000道尔顿。9.一种制备权利要求1-8任意一项所述干扰素偶联物的方法，其包括以下步骤 1)干扰素和含有已保护巯基的醛类物质反应，形成通过-NH-CH2-键连接的活化干扰素蛋白； 2)所述活化的干扰素蛋白脱保护，与活性甲氧基聚乙二醇衍生物偶联。10.一种药物组合物，其包含 1)如权利要求1-8任意一项所述的治疗量的聚乙二醇化干扰素偶联物； 2)药学可接受的药物载体。11.根据权利要求10所述的药物组合物，其特征在于，使用含有权利要求1-8任意一项所述的治疗量的聚乙二醇化干扰素偶联物具有抗病毒、抗肿瘤、免疫调节等临床治疗用途；优选的是，可用于治疗慢性乙型肝炎、丙型肝炎和戊型肝炎等，病毒性疾病如带状疱疹、扁平和尖锐湿疣、乳头瘤病毒感染、流行性出血热和小儿呼吸道合胞病毒肺炎，恶性肿瘤如毛细胞性白血病、慢性粒细胞白血病、黑色素瘤、淋巴瘤、多发性骨髓瘤、肾细胞癌、卵巢癌、直肠癌、肝癌、肺癌等。全文摘要本专利技术公开了一种聚乙二醇干扰素偶联物，其制备方法，以及含有治疗有效量的该干扰素偶联物的药物组合物，及其在制备抗病毒、抗肿瘤、免疫调节药物中的用途。文档编号A61P31/20GK102824646SQ20111015863公开日2012年12月19日 申请日期2011年6月14日 优先权日2011年6月14日专利技术者王亚里, 吕爱锋, 孙长安, 王瑞军, 李蕴波, 房雷, 徐刚 申请人:江苏恒瑞医药股份有限公司本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种结构如式(I)所示的干扰素偶联物，P？NH？CH2？X？S？Y？Q(I)其中，P是干扰素；X是？(CH2)k？或？CH2(OCH2CH2)k？，k选自1～10的整数；Q是甲氧基聚乙二醇；Y选自Y1～Y12：其中m、n各自独立地选自2～10的整数。FSA00000516748100011.tif,FSA00000516748100021.tif

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：王亚里，吕爱锋，孙长安，王瑞军，李蕴波，房雷，徐刚，
申请(专利权)人：江苏恒瑞医药股份有限公司，
类型：发明
国别省市：