预测早产风险的方法技术

一种诊断或鉴别诊断早产(pre-term?birth，PTB)风险增加的方法，包括检测或测量来自哺乳动物受试者的生物样品中，特别是尿液、宫颈阴道液或血液中的生物标记物可溶性E-钙粘蛋白(SE-CAD)的升高表达。升高的SE-CAD表达水平高于健康哺乳动物受试者相同样品中的表达水平是诊断PTB风险增加的指示。该诊断可以进一步包括鉴定PTB或PTL的其它临床症状。另外，该方法可以使用额外的生物标记物，如胎儿纤连蛋白。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】
技术介绍
早产(PTB)是新生儿死亡的首要原因，同时也是新生儿发病的ー个重要因素。在美国，所有活产婴儿中大约12%为早产，即，胎龄在37周前。PTB发病率并未下降，实际上，已显示出上升的趋势。PTB花费巨大，不仅在于即时的新生儿护理，而且也在于因早产所导致的持续发病所需的长期护理匕早产儿的护理消耗了用于儿童的健康保健费用的很大部分。最近的数据表明，PTB导致的长期后遗症比以前认识到的更多，包括这些孩子到达入学年龄时的显著的神经行为异常。PTB的有效预防或治疗，能显著降低新生儿死亡率和发病率，以及医疗保健费用。针对处于最高PTB风险的孕妇的治疗是迫切需要的。然而，除非我们能够可靠地确定哪些妇女和婴儿真正处于最高风险，否则这些类型的干预措施和治疗策略无法开始。到目前为止，预测哪些妇女将发生PTB的尝试都没有成功。虽然ー些生物标记物已显示出高特异性，但是它们缺乏敏感性和阳性预测值，这使得它们不适合作为危险分级的工具。鉴别用于预测PTB的生物标记物(体液中的蛋白质或遗传“倾向”)具有重要 的临床价值，这将允许对最高风险人群进行危险分级、治疗和护理，而确定的“较低风险”人群可避免不必要的治疗、住院和关注是否会拥有早产儿。鉴别处于最大PTB风险的妇女无疑将带来新的预防策略。短宫颈的鉴定已被证明是PTB的最强预测指标6’7，但仍缺乏使其成为有用的普遍人口筛查试验所需的显著测试特性。即使是连续测量，短宫颈对于预测PTB的敏感性仍然较低9。此外，非常短的宫颈(< 15毫米)的患病率是相当低的，这限制了使用该测量作为PTB的一个筛查试验。类似地，阳性胎儿纤连蛋白(FFN)与PTB紧密相关，而阴性试验是一个强有力的预测因子，其预示至少14天以上的继续妊娠6。FFN的较低的阳性预测值，以及不同人群的变异性，限制了它在普遍人群中的使用，同时也表明FFN和CL可能只是代表相同的生物学途径，在PTB的预测中，这两个生物标记物没有累加性。6细菌性阴道病(BV)的存在已经与PTB关联。1CI但是，就BV而言，数据是相互矛盾的。BV的存在似乎与一些人群的风险升高相关联，但并非所有人群都是如此n’12 ;治疗无症状妇女的BV没有使得PTB比例发生变化。13目前，筛查妇女BV以防止PTB仅对高风险妇女推荐。虽然到目前为止已经取得了一些进展，但是仍然没有针对早产的可靠和明确的标记物。本领域仍然需要针对PTB的更准确、更敏感的诊断或预测分析。专利技术概述一方面，提供了ー种用于诊断或预测早产(PTB)发生的可能性或升高的风险的方法，包括測量来自怀孕的哺乳动物受试者的生物样品中的生物标记物，即可溶性E-钙粘蛋白(SE-CAD)，的表达水平，其中高于预定对照表达水平的升高的SE-CAD表达水平表明诊断为早产风险增加或或具有早产风险增加的可能性。另ー方面，提供了一种筛查孕妇人群过早宫颈重构(premature cervicalremode I ing)的方法,包括测量来自怀孕的哺乳动物受试者的生物样品中的生物标记物，即可溶性E-钙粘蛋白(SE-CAD)，的表达水平，其中高于预定对照表达水平的提高的SE-CAD表达水平表明与PTB风险增加相关的宫颈变化。另ー方面，提供了诊断试剂在检测或测量生物样品中SE-CAD从而诊断或预测早产(PTB)发生可能性或风险增加中的用途。本专利技术的其它方面和优势在以下有关优选实施方式的详细说明中进行了进ー步描述。附图的简要说明图I为柱状图，显不了小鼠母体血清中的SE-CAD水平,该水平是在宫内注入LPS或生理盐水后2、4和6小时测量的，使用了炎症诱导的早产小鼠模型。图2为散点图，显示了在30周的胎龄之前的早产临产中的母体血清中的SE-CAD水平。正方形代表< 34周分娩的妇女的数据点，三角形代表> 34周分娩的妇女的数据点。图3为柱状图，显示了对照组(足月分娩)血清中的SE-CAD水平，发生先兆子痫但是未出现早产临产或未发生早产的妇女，以及出现早产临产但未发生早产的妇女。 图4为散点图，显示了出现早产临产的妇女母体血清中几种免疫生物标记物的表达，包括发生早产(PT)和未发生早产(T)的妇女。专利技术详述本专利技术通过提供ー种新方法满足了本领域的需求，该方法使用ー种新的宫颈重构生物标记物，即可溶性E-钙粘蛋白(SE-CAD)，在有症状和无症状的妇女中诊断或预测早产发生的可能性或风险增加。A.定义如在本文中使用的，早产的“増加的可能性”，是指受试者将发展为早产的风险或可能性与预定对照相比的増加。在一个实施方式中，増加的可能性是指超过对照水平的5-6倍。如在本文中使用的，“早产”(PTB)是指胎龄小于37周的婴儿的出生。在一个实施方式中，晩期早产是指胎龄在34-37周之间的婴儿的出生。在另ー个实施方式中，早期早产是指胎龄小于34周的婴儿的出生。如在本文中使用的，“早产临产”(pre-term labor, PTL)是指胎龄小于37周的临产症状发作。临产症状包括痉挛或收缩、阴道排液、背痛、严重骨盆压力、阴道流血。早产临产可能会发展为早产，也可能不会。在一个实施方式中，PTL是指胎龄22周时或之后发生的临产。如在本文中使用的，“诊断”是指确定、筛查、或鉴定生物样品中表明受试者发生某种疾病的可能性增加的生物标记物的表达水平或存在。如在本文中使用的，“ PTB诊断”是指确定、筛查、或鉴定生物样品中表明受试者发生PTB的可能性增加或将发生PTB的可溶性E-钙粘蛋白的表达水平或存在。蛋白质“E-钙粘蛋白”(E-CAD)是紧密连接(TJ)途径中的一种关键蛋白质。E-钙粘蛋白是钙粘蛋白家族的成员，它是ー种钙依赖性粘附分子。钙粘蛋白是ー类I型跨膜蛋白，这种蛋白在细胞粘附中起到关键作用，确保组织内的细胞结合在一起。E-I丐粘蛋白由胞外结构域中的5个钙粘蛋白重复序列、I个跨膜结构域以及I个结合连锁蛋白的胞内结构域组成——这样就将紧密连接CU)和粘附连接(AJ)途径连接起来。人E-CAD序列是已知的；人E-CAD前蛋白原序列可以在NCBI的參考序列NP_004351. I中找到。该序列现明确引入作为參考。已将E-钙粘蛋白功能或者表达的缺失与癌症的发展关联。类似地，E-钙粘蛋白的下调降低组织内细胞粘附强度，从而导致细胞运动。E-钙粘蛋白的等位基因变体与E-钙粘蛋白改变有夫，并且已被证明造成了选择疾病状态例如克罗恩病的风险增加22’23。虽然数据非常有限，然而最近的报告表明E-钙粘蛋白启动子多态性已被证明改变了 E-钙粘蛋白的表达。虽然该数据表明在AJ途径中的等位基因变体与疾病状态和AJ蛋白特异性表达都有关，但是在产科学中没有涉及该途径或该途径中的等位基因变体的数据。如在本文中使用的，“可溶性E-钙粘蛋白”(SE-CAD)是指当钙粘蛋白被剪接时释放的蛋白质，提示粘附连接功能的改变。SE-CAD是ー个120kDa E-钙粘蛋白分子的约SOkDa的肽降解产物，产生于钙离子依赖性蛋白水解过程。基质金属蛋白酶、胰蛋白酶、激肽释放酶7和纤维蛋白溶酶是能够执行此蛋白水解过程的范例分子。正如专利技术人所发现的，SE-CAD是E-钙粘蛋白分解的标记物，特别是在宫颈部位。SE-CAD在组织和生物流体中可被測量；SE-CAD水平表明钙粘蛋白表达的改变。人SE-CA本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】...

【专利技术属性】
技术研发人员：M·A·埃洛韦兹，
申请(专利权)人：宾夕法尼亚大学托管会，
类型：发明
国别省市：