一种多肽及其应用制造技术

本发明专利技术公开了一种多肽及其应用。该多肽具有SEQ?ID?NO.1或SEQ?IDNO.2所示的氨基酸序列。该多肽可以靶向肿瘤血管内皮生长因子受体2，因此，该多肽可以有效地抑制肿瘤血管的生长，并且可以应用于肿瘤诊断和/或治疗的药物中。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及一种多肽及其应用，具体地讲，本专利技术涉及一种靶向肿瘤血管内皮生长因子受体-2 (VEGFR-2)的多肽以及该多肽的应用。
技术介绍
据世界卫生组织统计，每年有大约500万人死于癌症。癌症已成为摧毁人类健康、剥夺人类生命的最危险的疾病之一，因此癌症的预防、诊断及治疗任务十分艰巨。 传统的肿瘤治疗方法存在各种弊端，例如，手术治疗只适用于体积较大、影像技术可检测的良性实体瘤，对于体积较小的肿瘤或者转移性肿瘤无能为力；放射疗法对局部组织的损伤较大；化学疗法需要全身给药，针对性差，给患者造成巨大的毒副作用。鉴于以上肿瘤治疗方法中的缺陷，研究人员一直努力开发可用于肿瘤早期定位诊断及有效治疗的药物或办法。肿瘤靶向分子的出现为解决这一难题提供了思路，肿瘤靶向治疗技术具有特异性强、效果显著、基本不损伤正常组织的特点。单克隆抗体是目前已知的、最早应用于肿瘤靶向治疗的肿瘤靶向分子，目前已有8种抗体被FDA批准应用于肿瘤的临床治疗。但是，目前抗体治疗实体瘤仍存在以下问题因实体肿瘤的细胞被致密的基质包裹，导致抗体难以穿透实体肿瘤的细胞；实体肿瘤内压力较高，阻碍了抗体进入肿瘤内部，致使抗体治疗大体积实体肿瘤的疗效不理想；由于治疗肿瘤的抗体需要量大，要求产品纯度高，所以抗体的生产成本高、价格昂贵，据Genentech报告，使用贝伐单抗治疗10个月将花费大约4. 4万美元。虽然目前抗体肿瘤治疗取得一定成效，但科学家们仍然在努力寻找其他的生物分子对肿瘤进行靶向治疗。多肽被认为具有至少相同于抗体的靶向引导治疗的作用，而且多肽具有分子量小、抗原性低、作用迅速、较易体外及生物合成等优点，并且可以具有普通蛋白质的功能，因此多肽可以直接用作抗肿瘤药物，也可以与其他方法合用而作为靶向引导分子使用。肿瘤血管内皮生长因子(VEGF)的受体(VEGFR)是肿瘤部位所特有的，可作为血管靶向治疗的理想靶点。其中，在所有的VEGFR中，仅肿瘤血管内皮生长因子-2 (VEGFR-2，又称FLK-I或KDR)既在细胞的生长和分化中起重要作用又与内皮细胞的增殖和血管的生成有关，请参见 Shibuya M. Vascular endothelial growth factor receptor-2: itsunique signaling and specific ligand, VEGF-E. Cancer Sci2003;94 (9):751-756,以及 Pradeep CR, Sunila ES, Kuttan G. Expression of Vascular Endothelial GrowthFactor (VEGF) and VEGFReceptors in Tumor Angiogenesis and Malignancies.Integrative Cancer Therapies2005; 4 (4) : 315。在肿瘤组织中，VEGFR-2 主要表达于肿瘤血管内皮细胞，而在肿瘤上皮细胞中不表达或低表达。这说明VEGFR-2在促进血管发生及再生中起着非常重要的作用，所以开发针对VEGFR-2的抑制剂将有效抑制肿瘤的生长。目前，已经开发出针对VEGFR-2的单克隆抗体，请参见Prewett M, Huber J, Li Y, SantiagoA,0’Connor W, King K,Overholser J, Hooper A,Pytowski B, Witte L.AntivascularEndothelial Growth Factor Receptor(Fetal Liver Kinasel)Monoclonal AntibodyInhibits Tumor Angiogenesis and Growth of Several Mouse and Human Tumors. CancerResearch, Volume59: AACR; 1999. p5209_5218。但该单克隆抗体的毒副作用及长期效应仍需进一步鉴定。鉴于多肽在靶向药物治疗上与抗体相比具有一定的优势，因此，开发靶向VEGFR-2的多肽十分必要。
技术实现思路
本专利技术的目的在于克服现有技术的不足，提供一种靶向VEGFR-2的多肽及该多肽在制备用于肿瘤诊断和/或治疗的药物中的应用。本专利技术的一方面提供了一种多肽，该多肽具有SEQ ID NO. I或SEQ IDN0. 2所示的 氨基酸序列。本专利技术的另一方面提供了一种上述多肽在制备用于肿瘤诊断和/或治疗的药物中的应用。根据本专利技术的多肽可以与VEGFR-2特异性地结合，从而可以有效地抑制肿瘤血管的生长。此外，由于根据本专利技术的多肽可以与VEGFR-2特异性地结合，所以根据本专利技术的多肽可以应用于用于肿瘤诊断和/或治疗的药物中。附图说明通过结合附图进行的示例性实施例的以下描述，本专利技术的这些和/或其他方面和优点将变得清楚和更易于理解，其中图I示出了在筛选的第6轮和第7轮加入免疫球蛋白(IgG)后得到的流式细胞分选结果图；图2示出了根据实施例得到的部分单克隆细菌所展示的多肽与VEGFR-2的结合情况；图3示出了根据实施例得到的不同的单克隆细菌的表面上的多肽与VEGFR-2的解离常数的测定结果。具体实施例方式根据本专利技术的具有SEQ ID NO. I或SEQ ID NO. 2所示的氨基酸序列的多肽是通过细菌表面展示随机肽库和流式细胞分选技术筛选得到，得到的多肽可以与肿瘤血管内皮生长因子受体-2 (VEGFR-2)特异性地结合。因此，根据本专利技术的多肽可以有效地抑制肿瘤血管的生长，并可以应用于用于肿瘤诊断和/或治疗的药物中，例如，根据本专利技术的多肽可以应用在肿瘤药物靶向运输体系中。下面将参照示例性实施例来详细地描述通过细菌表面展示随机肽库和流式细胞分选技术筛选根据本专利技术的多肽的过程。下面的示例性实施例中未注明条件的实验方法可以按本领域内的常规实验方法进行，例如，可以参照Sambrook等人的《Molecularcloning: a laboratory manual)) (New York: Cold Spring Harbor LaboratoryPress, 1989)。本专利技术所使用的细菌表面展示随机肽库是从美国加州大学圣巴巴拉分校化学工程系的Patrick S. Daugherty实验室获得。该细菌表面展示随机肽库的构建过程如下。首先，对外膜蛋白(OmpX, outer membrane protein X)进行改造,在OmpX的C端和N端分别连接上GGSG连接分子，并在OmpX第2个环(loop)的s53和s54残基之间打开，形成游离于胞外的 COOH 端和 NH2 端，成为 CPX (circularly permuted outer membrane proteinOmpX)骨架(请参见 Rice et al. (2006)protein Sci. 15，825-836)。然后，将随机合成的多肽文库X2CX7CX2连接到CPX骨架的N端，其中，X表示任意一个氨基酸，C表示半胱氨酸，将改造后的 CPX片段插入 pBAD33 质粒(Guzman, L. et al. Tight Regulation, Modulation,本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种多肽，其特征在于，所述多肽具有SEQ？ID？NO.1或SEQ？ID？NO.2所示的氨基酸序列。

【技术特征摘要】
1.一种多肽，其特征在于，所述多肽具有SEQ ID NO. I或SEQ ID NO. 2...

【专利技术属性】
技术研发人员：朱毅敏，原丽华，董兵，王安欣，陈丽莎，濮科锋，
申请(专利权)人：中国科学院苏州纳米技术与纳米仿生研究所，
类型：发明
国别省市：