一种F蛋白检测试剂及检测方法技术

本发明专利技术涉及一种F蛋白检测试剂，包括F蛋白的兔抗人多克隆抗体、酶标抗体、显色试剂和终止液，所述酶标抗体为辣根过氧化物酶标抗体，所述显色试剂为A液(含0.01％H2O2)和B液(pH?7.4，含0.4mg/ml?TMB(3，3，5，5-四甲基连苯胺)的0.1mol/L枸椽酸缓冲液)；所述终止液为2M的硫酸水溶液。本发明专利技术根据F蛋白在肝脏组织受到损伤后从肝细胞大量释放到血液循环中，可诱导机体产生特异性的细胞和体液免疫应答，采用基因工程制备并经Ni2+柱层析高度纯化后的HIS-F蛋白提高了诊断的精确度和诊断效率，节约了检测成本，使其在临床应用方面具有重大的理论意义和潜在的应用价值。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术专利属于生物医学工程和医学检验
，尤其是指一种F蛋白检测试剂及检测方法。
技术介绍
在生物医学工程关于细胞的科研领 域及医学临床应用中，F蛋白是一种特异存在于肝细胞中的蛋白质，只有当肝实质受损方释放入血液中，因此现代医学认为F蛋白是一种特异的肝细胞损害标志物。肝病的诊断一直是医学诊断学中一个重要的组成部分，肝脏F蛋白作为一种可直接反映肝损伤程度的血清学标志，其血清含量与各种原因造成的肝损伤程度成正相关。无论何种原因导致的肝病，均表现为肝细胞损害，血清中F抗原均可升高。血清F抗原的含量变化与肝组织学改变有密切的相关性。血清F抗原为肝脏特有，敏感性非常高，正常人血清F抗原浓度无年龄、性别差异，肝细胞受损时血液中出现的时间早，而且是不可诱导的，因此，血清F抗原是一种新的比常规肝功能项目更灵敏而特异的指标。如果制成F蛋白的免疫试剂，其将在肝病早期诊断与治疗、药物的筛选与疗效观察、肝病预后的判断等方面发挥重要作用。目前国内外获得F蛋白比较困难且缺乏统一的标准，难以相互验证，不利于研究工作的深入；国内外有学者通过提纯的方法提取F蛋白，利用这种方法很难得到大量且较纯的F蛋白；迄今本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种F蛋白检测试剂，其特征在于包括F蛋白的兔抗人多克隆抗体、酶标抗体、显色试剂和终止液。2.根据权利要求I所述的F蛋白检测试剂，其特征在于所述酶标抗体为辣根过氧化物酶标抗体。3.根据权利要求I所述的F蛋白检测试剂，其特征在于所述显色试剂为含O.Ol 1^H2O2的水溶液和PH 7. 4含O. 4mg/ml TMB的O. Imo 1/L枸椽酸缓冲液。4.根据权利要求I所述的F蛋白检测试剂，其特征在于所述终止液为2M的硫酸水溶液。5.根据权利要求I所述的F蛋白检测试剂，其特征在于还包括缓冲液和洗涤液。6.根据权利要求5所述的F蛋白检测试剂，其特征在于所述包括缓冲液为PBSO. 01M, pH 7. 4;所述洗涤液为 PBST，配置方法为10XTBSpH 7. 6 :Tris_ 碱，60. 57g ;IMHCl，420ml ;NaCl, 85_90g,用 HCl 调 pH 至 7· 6 后，定容于 IL ；1 XTBST :将 10XTBS 稀释 10倍，加入 O. 1% (v/v)的 TWEEN-20。7.利用权利要求1-6之一所述的F蛋白检测试剂检测F蛋白含量的方法，其特征在于步骤如下 (1)包被使用纯化的F蛋白多克隆抗体按10μ g/ml蛋白量进行包被，100 μ I/孔，4°C过夜，O. OlM PBS pH 7. 4洗涤三次，含I %胎牛血清的PBS封闭，110 μ I/孔，37°C I小时，弃包被液待用； (2...

【专利技术属性】
技术研发人员：刘树业，任峰，
申请(专利权)人：天津美德太平洋科技有限公司，
类型：发明
国别省市：