本发明专利技术涉及一种用于免疫细胞治疗的高扩增多功能无血清培养基及其制备方法，组成成份包括氨基酸、维生素、无机盐、其它组分，含量均按照成分范围添加即可，制备方法的步骤为：混合、调节pH值、最后过滤除菌即得。本发明专利技术提供的无血清细胞培养基与国内外同类产品相比，其性能指标已完全达到同类产品的水平，从使用情况比较来看，也完全满足于用户需要，达到国内外同类产品水平，且国内生产用原料来源方便。
【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于生物治疗和细胞生物的技术和材料领域，尤其是。
技术介绍
在生物医学工程关于细胞的科研领域及医学临床应用中，主要目的是研究细胞的功能和作用。恶性肿瘤是严重危害人类健康的疾病，“手术、放疗与化疗”三大常规疗法仍不能解决肿瘤的复发与转移，实践证实，肿瘤生物免疫治疗可以很好地控制肿瘤的转移与复发， 以常规治疗(手术、放疗、化疗)辅以肿瘤免疫治疗的综合疗法，将成为21世纪人类征服癌症的主要工具。体细胞技术是目前国际上最前沿的治疗技术，从人体外周血中分离出单核细胞， 通过GMP实验室进行扩增、诱导和活化培养，形成多种免疫杀伤细胞，然后回输到病人体内。这种免疫细胞具有显著识别和杀伤患者体内各种肿瘤细胞和病毒的活性，可增强人体免疫功能，提高对肿瘤细胞的杀伤能力，更好地控制肿瘤的转移与复发。支持这种治疗的关键耗材是培养血液单个核细胞(主要是淋巴细胞)用的无血清细胞培养基。早期的细胞培养液的添加物均用动物血清。但动物血清成分复杂存在因个体、 产地和批号的不同，使血清批间质量差异甚大，直接影响基因工程等下游产品的分离、纯化等诸多不利因素。传统的无血清细胞培养基个性化比较强，一种无血清细胞培养基只能适应于某种或某类细胞的培养，目前，尚无适应大多数细胞的无血清细胞培养基产品。开发适合多种细胞扩增、培养和活化的安全、高效、多能无血清培养基有极大的社会效益和经济效益，实属当务之急。(I)国外多用基因重组产品配制无血清细胞培养液。目前我国基因重组产业比较滞后，如果我们也采用基因重组产品配制无血清细胞培养液，其成本昂贵，不适合于免疫治疗的推广。因此，在现阶段，采用生物化学方法从“废弃物”脐带血和/或胎盘中提取细胞因子，用于配制能用于免疫治疗的无血清细胞培养液。(2)组织中存在几种“热不稳定”蛋白质，如果不去除，在37°C培养之中，会出现沉淀物，严重影响培养基的质量。但是如何去除此类物质，而同时保留营养物质是这项研究成败的关键，是技术创新点。(3)无血清细胞培养液含有生物活性物质，不能进行蒸汽灭菌消毒，而无血清细胞培养液又营养丰富，极易长菌。
技术实现思路
本专利技术的目的在于克服现有技术的不足之处，提供，本专利技术旨在体外环境中培养人体细胞的培养基，为医学科研和临床上细胞培养提供了广泛的应用空间，可以帮助科研人员更快更好地实现科研和临床上细胞培养的目的。本专利技术的目的是通过以下技术方案实现的一种用于免疫细胞治疗的高扩增多功能无血清培养基，组成成份及含量如下(I)氨基酸甘氨酸25-35mg/L、L-丙氨酸20_30mg/L、L-精氨酸盐酸盐80_90mg/L、L-天门冬酰胺 20-30mg/L、L-天门冬氨酸 25_35mg/L、L-胱氨酸 65_75mg/L、L-谷氨酸 70_80mg/L、 L-谷氨酰胺580-590mg/L、L-组氨酸盐酸盐40_50mg/L、L-异亮氨酸100-110mg/L、L-亮氨酸100-110mg/L、L-赖氨酸盐酸盐140-150mg/L、L-甲硫氨酸25_35mg/L、L-苯丙氨酸 60-70mg/L> L-脯氨酸 35_45mg/L、L-丝氨酸 40_45mg/L、L-苏氨酸 90-100mg/L、L-色氨酸 10_20mg/L、L-酪氨酸 80_85mg/L、L-纟颜氨酸 90_100mg/L ；(2)维生素维生素H 0. 010-0. 020mg/L、氯化胆碱 2_6mg/L、D-泛酸I丐 2_6mg/L、叶酸 2_6mg/ L、烟酰胺 2-6mg/L、维生素 B6 2_6mg/L、维生素 B2 0. 1-0. 5mg/L、维生素 BI 2_6mg/L、维生素 B12 0. 01-0. 02mg/L、i_ 肌醇 6_9mg/L ；(3)无机盐无水氯化钙160-170mg/L、七水硫酸镁190_210mg/L、氯化钾320_340mg/L、硝酸钾 0. 07-0. 08mg/L、碳酸氢钠 3000_3500mg/L、氯化钠 4500_4600mg/L、无水磷酸二氢钠 105-110mg/L、五水硒酸钠 0. 01-0. 02mg/L ；(4)其它组分D-葡萄糖 4400-4600mg/L、HEPES 5900_6000mg/L、丙酮酸钠 100_120mg/L、酚红 10_20mg/L ；(5)微量添加组分亚硒酸钠0. 002-0. 007mg/Lo而且，组成成份及含量如下(I)氨基酸甘氨酸30mg/L、L-丙氨酸25mg/L、L_精氨酸盐酸盐84mg/L、L_天门冬酰胺25mg/ L、L-天门冬氨酸30mg/L、L-胱氨酸70mg/L、L_谷氨酸75mg/L、L_谷氨酰胺584mg/L、L_组氨酸盐酸盐42mg/L、L-异亮氨酸105mg/L、L-亮氨酸105mg/L、L-赖氨酸盐酸盐146mg/L、 L-甲硫氨酸30mg/L、L-苯丙氨酸66mg/L、L-脯氨酸40mg/L、L-丝氨酸42mg/L、L-苏氨酸 95mg/L、L-色氨酸 16mg/L、L-酪氨酸 83. 7mg/L、L-缴氨酸 94mg/L ；(2)维生素维生素H 0. 013mg/L、氯化胆碱4mg/L、D-泛酸|丐4mg/L、叶酸4mg/L、烟酰胺4mg/ L、维生素 B6 4mg/L、维生素 B2 0. 4mg/L、维生素 BI 4mg/L、维生素 B12 0. 013mg/L、i_ 肌醇7.2mg/L ；(3)无机盐无水氯化韩165mg/L、七水硫酸镁200mg/L、氯化钾330mg/L、硝酸钾0. 076mg/L、碳酸氢钠3024mg/L、氯化钠4505mg/L、无水磷酸二氢钠108. 7mg/L、五水硒酸钠0. 0173mg/L ；(4)其它组分D-葡萄糖 4500mg/L、HEPES 5958mg/L、丙酮酸钠 110mg/L、酌 红 15mg/L ；(5)微量添加组分亚硒酸钠0. 005mg/Lo一种用于免疫细胞治疗的高扩增多功能无血清培养基的制备方法，培养基配制方法步骤如下(I)按本培养基对原料成分的规定称取所需原料并混合均匀，放入容器内；(2)在室温下,加入培养基终体积的65%-70%的注射用水,将混合好的原料用注射用水充分搅拌至粉剂完全溶解；(3)调pH值调整pH到6. 8-7. 0范围内；(4)用注射用水稀释定容最后定容至预订体积，摇匀，容器保持密封状态。(5)立即在局部百级的超净工作台内以0. 22 y m或者是0. I U m孔径的滤器过滤除菌，边过滤边分装入无菌容器中。而且，调pH值采用IN的盐酸或NaOH溶液。本专利技术的优点和有益效果为I、本专利技术提供的无血清培养基是医学细胞治疗和医学细胞培养鉴定的基础和必要的材料，用于免疫细胞治疗的高扩增多功能无血清培养基，是细胞培养所需的基础材料。2、本专利技术旨在体外环境中培养人体细胞的培养基，为医学科研和临床上细胞培养提供了广泛的应用空间，可以帮助科研人员更快更好地实现科研和临床上细胞培养的目的；本培养基可应用在生物医学工程关于细胞的科研领域及医学临床中的体外细胞培养， 例如在体外培养人淋巴细胞，并观察细胞形态，作为一种体外诊断的手段；还可对培养所得细胞进行其他指标检验。3、本专利技术提供的无血清细胞培养基与国内外同类产品相比，其性能指标已完全达到同本文档来自技高网...
【技术保护点】
【技术特征摘要】
【专利技术属性】
技术研发人员：任峰，蔡辉国，
申请(专利权)人：天津美德太平洋科技有限公司，
类型：发明
国别省市：
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