【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于医药
，涉及具有致肾毒性作用的化合物泽泻醇A的制备方法、泽泻醇A对人肾小管上皮细胞株(HKC)体外细胞毒作用的应用。
技术介绍
泽湾为泽湾科植物泽湾oriental is (Sam. ) Juzep.的干燥块莖。首载于《神 农本草经》，历版《中国药典》均有收载。为临床除作为利水渗湿性中药，还被用作药膳、减肥保健品中，这使得它们得以被长期服用。近年来，泽泻在临床上虽广泛应用，人们只关注它的治疗功效，却忽略了其长期使用或过量使用后对肾脏造成的毒性作用，为临床安全用药留下隐患。现代临床实践与药理实验仅限于对中毒现象的描述，而其致肾毒性作用的 物质基础却不甚明确，目前，对于泽泻肾毒性的研究仅限于临床报道和初步的毒理学研究，对于毒性物质基础的研究却鲜有报道。因此更需要确认泽泻致肾功能损伤的毒效部位物质基础。在中药单体化合物的毒性研究方面，学术界虽然取得了一些进展，但由于纯品化合物的分离，结构鉴定以及量的富集需要一定的前期研究，以动物进行整体水平的实验成本较高，因而在某种程度上受到限制。体外细胞毒试验不仅减少实验动物数量和受试药物的用量，缩短试验周期，而且可缩小动物种属间的差异。尤其是源于人类组织细胞的体外试验模型，消除了动物与人类的种属差异，同时可在短期内得到试验结果，降低研发成本，有助于在细胞和分子水平阐明药物毒性作用机理。人肾小管皮上细胞株(ffic细胞)源于人肾小管上皮，具有肾小管上皮细胞特有的结构和功能，能表达肾小管特异性标志酶，且存活时间长、易于传代培养。
【技术保护点】
【技术特征摘要】
1.具有致肾毒性作用的化合物泽泻醇A的制备方法，其特征是 (1)制备泽泻乙醇提取液 取泽泻，加入其重量3 5倍的70% 95%乙醇，冷浸10 15 h，加热回流提取4 6 h，过滤，反复21次，合并滤液，经旋转蒸发仪50 1蒸干溶剂，得泽泻乙醇提取液的浸膏； (2)制备氯仿萃取物 将泽泻乙醇提取液的浸膏用水混悬后，依次用石油醚、氯仿、乙酸乙酯、正丁醇等体积萃取，各2 4次，合并氯仿萃取液，经旋转蒸发仪50°C蒸干溶剂，得到氯仿层萃取物； (3)化合物泽泻醇A的纯化 取氯仿萃取物，硅胶柱层析(200 300目)，用二氯甲烷-甲醇按照1:0，50:1，40:1，20:1，10:1，7:1，4:1，2:1，1:1，0:1的梯度洗脱，其中，按50:1洗脱得到的流分Fr. 73 Fr. 80 (Fr.为“流分fraction”的缩写，Fr. 73 Fr. 80指柱层析分离所得组分中第73至第80个组分)先经过进一步的硅胶柱层析，再经S印hadex LH 20 (葡聚糖凝胶)凝胶柱层析，得到的流分经制备型高效液相分离纯化，得到无色粉末状化合物泽泻醇A。2.如权利要求I所述制备方法，其特征在于步骤(I)中乙醇的体积分数为80%。3.如权利要求I所述制备方法，其特征在于步骤(I)中乙醇的加入量为泽泻重量的4倍。4.如权利要求I所述制备方法，其特征在于步骤(I)中冷浸时间为12h。5.如权利要求I所述制备方法，其特征在于步骤(I)中回流提取时间为5h。6.如权利要求I所述制备方法，其特征在于步骤(I)中加热回流次数为3次。7.如权利要求I所述制备方法，其特征在于步...
【专利技术属性】
技术研发人员：陈晓辉，毕开顺，于治国，俞悦，马超，耿璐璐，
申请(专利权)人：沈阳药科大学，
类型：发明
国别省市：
还没有人留言评论。发表了对其他浏览者有用的留言会获得科技券。