本发明专利技术公开了一种阿日丹素的提取分离方法，其特征在于：将四肋草干燥粉碎，加生物酶酶解8-10小时，酶解原料加60-80%乙醇溶液微波或超声提取2-3次，提取液浓缩至浸膏，加适量水分散后加入大孔树脂柱中吸附，再通过制备型高效液相色谱分离等步骤得到阿日丹素。该方法制备量大，产品含量高，适合工业化生产。
【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于天然植物有效成分提取
，涉及ー种阿日丹素的提取分离方法。
技术介绍
阿日丹素(Aridanin)是从含羞草科植物四肋草retraptera Taub.果实和莖皮、豆科植物乔木围涎树Pitheceliobium arboreum叶中提取分离得到的ー种三萜类化合物。分子式为C38H61NO8，分子量为659. 91，为白色粉末(甲醇)，mp. 276_280°C。阿日丹素具有杀软体动物作用，显著減少蜗牛对有用钙摄入，影响糖和蛋白质代谢，显著減少水蜗牛糖原和蛋白质的含量。目前尚未发现大量制备阿日丹素的方法报道。
技术实现思路
本专利技术的目的是提供ー种阿日丹素的提取分离方法， 为实现上述目的，本专利技术采用以下技术方案 ，其特征在于包括以下步骤 (1)取四肋草果实或茎皮粉碎，加生物酶酶解8-10小时，酶解原料加60-80%こ醇溶液微波或超声提取2-3次，提取液浓缩至浸膏； (2)将提取浸膏加适量水分散后加入大孔树脂柱中吸附，先用水洗脱，再用50-70%乙醇溶液洗脱，收集洗脱液； (3)将洗脱液浓缩后采用制备型液相色谱分离，紫外在线检测，收集目标成分，低温干燥即得阿日丹素。步骤(I)中所述生物酶可选果胶酶、纤维素酶和淀粉酶中的任ー种，用量为原料重量的 O. 2-0. 5%O步骤(2)中所述大孔树脂可选NK-9、ADS-21和HPD417中的ー种。步骤(3)中所述制备型高效液相色谱中流动相为30-40%的こ腈溶液。本专利技术方法制备量大，产品含量高，适合エ业化生产 下面将结合具体实施方式进ー步说明本专利技术，但本专利技术要求保护的范围并不局限于下列实施方式。具体实施例方式实施例I : 将四肋草果实粉碎，过20目筛，称取Ikg投入提取罐中，称取2. 2g纤维素酶溶解在7LpH4. 5的水溶液中加入提取罐，在50°C条件下酶解10小时，升温至80°C灭酶，过滤，将酶解原料加10倍量70%こ醇溶液，在50°C条件下微波提取3次，过滤得到提取液，减压浓缩至浸膏，加水分散，加入NK-9大孔吸附树脂柱吸附，先用水洗脱，再取3BV50%こ醇洗脱，收集洗脱液减压浓缩得浸膏。将浸膏用甲醇溶解，注入制备型高效液相色谱仪，こ臆-水(30 70)为流动相，紫外在线检测，收集高浓度流分，旋转蒸发浓缩、低温干燥即得I. Ig阿日丹素，含量96. 4%ο实施例2 将四肋草果实粉碎，过20目筛，称取Ikg投入提取罐中，称取2. Sg果胶酶溶解在7LpH4. 5的水溶液中加入提取罐，在50°C条件下酶解8小时，升温至80°C灭酶，过滤，将酶解原料加6倍量60%こ醇溶液，在50°C条件下超声提取3次，过滤得到提取液，减压浓缩至浸膏，加水分散，加入ADS-21大孔吸附树 脂柱吸附，先用水洗脱，再取4BV60%こ醇洗脱，收集洗脱液减压浓缩得浸膏。将浸膏用甲醇溶解，注入制备型高效液相色谱仪，こ臆-水(33:67)为流动相，紫外在线检测，收集高浓度流分，旋转蒸发浓缩、低温干燥即得O. 97g阿日丹素，含量98. 1%。实施例3: 将四肋草茎皮粉碎，过20目筛，称取3kg投入提取罐中，称取12. 6g果胶酶和纤维素复合酶(比例1:2)溶解在7LpH4. 5的水溶液中加入提取罐，在50°C条件下酶解9小时，升温至80°C灭酶，过滤，将酶解原料加8倍量75%こ醇溶液，在50°C条件下微波提取2次，过滤得到提取液，减压浓缩至浸膏，加水分散，加入NK-9大孔吸附树脂柱吸附，先用水洗脱，再取3BV70%こ醇洗脱，收集洗脱液减压浓缩得浸膏。将浸膏用甲醇溶解，注入制备型高效液相色谱仪，こ臆-水(35:65)为流动相，紫外在线检測，收集高浓度流分，旋转蒸发浓缩、低温干燥即得O. 66g阿日丹素，含量97. 1%。实施例4: 将四肋草茎皮粉碎，过20目筛，称取4kg投入提取罐中，称取13. 6g淀粉酶和果胶酶复合酶(比例I: I)溶解在7LpH4. 5的水溶液中加入提取罐，在50°C条件下酶解8. 5小时，升温至80°C灭酶，过滤，将酶解原料加7倍量80%こ醇溶液，在50°C条件下超声提取2次，过滤得到提取液，减压浓缩至浸膏，加水分散，加入HPD417大孔吸附树脂柱吸附，先用水洗脱，再取5BV65%こ醇洗脱，收集洗脱液减压浓缩得浸膏。将浸膏用甲醇溶解，注入制备型高效液相色谱仪，こ腈-水(40:60)为流动相，紫外在线检測，收集高浓度流分，旋转蒸发浓缩、低温干燥即得O. 78g阿日丹素，含量95. 3%。权利要求1.，其特征在于包括以下步骤 (1)取四肋草果实或茎皮粉碎，加生物酶酶解8-10小时，酶解原料加60-80%乙醇溶液微波或超声提取2-3次，提取液浓缩至浸膏； (2)将提取浸膏加适量水分散后加入大孔树脂柱中吸附，先用水洗脱，再用50-70%乙醇溶液洗脱，收集洗脱液； (3)将洗脱液浓缩后采用制备型液相色谱分离，紫外在线检测，收集目标成分，低温干燥即得阿日丹素。2.如权利要求I所述的，其特征在于步骤(I)中所述生物酶可选果胶酶、纤维素酶和淀粉酶中的任一种，用量为原料重量的O. 2-0. 5%。3.如权利要求I所述的，其特征在于步骤(2)中所述大孔树脂可选NK-9、ADS-21和HPD417中的一种。4.如权利要求I所述的，其特征在于步骤(3)中所述制备型高效液相色谱中流动相为30-40%的乙腈溶液。全文摘要本专利技术公开了，其特征在于将四肋草干燥粉碎，加生物酶酶解8-10小时，酶解原料加60-80%乙醇溶液微波或超声提取2-3次，提取液浓缩至浸膏，加适量水分散后加入大孔树脂柱中吸附，再通过制备型高效液相色谱分离等步骤得到阿日丹素。该方法制备量大，产品含量高，适合工业化生产。文档编号C07H15/256GK102659900SQ20121012086公开日2012年9月12日 申请日期2012年4月24日 优先权日2012年4月24日专利技术者刘东锋, 郭琴 申请人:南京泽朗医药科技有限公司本文档来自技高网...
【技术保护点】
【技术特征摘要】
【专利技术属性】
技术研发人员：刘东锋，郭琴，
申请(专利权)人：南京泽朗医药科技有限公司，
类型：发明
国别省市：
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