【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】
本专利技术涉及基于肽的阵列,产生所述阵列的方法和相关的使用方法。
技术介绍
在以下讨论中,将出于背景和介绍的目的描述某些物品和方法。本文所含的内容不被解释为对现有技术的“承认”。申请人明确地保留在适当时证明在适用的法律规定下,本文所提及的物品和方法不构成现有技术的权利。蛋白质组学,即对蛋白的功能、结构和相互作用的研究,要求产生足够的量的蛋白并以高通量方式研究这些蛋白的能力。蛋白微阵列是用于蛋白的所述高通量分析的非常有用的工具,但由于蛋白产生的困难和成本,对于大规模蛋白质组学研究,微阵列技术的可用性仍非常有限(Henderson G 和 Bradley M, Curr Opin Biotechnol. Aug ; 18 (4) :326-30,(2007) ,Epub 2007Aug 6 ;Tapia VE Methods Mol Biol. 2009 ;570 :3-17 (2009))。传统上,肽阵列通过在表面上点印预合成的肽(Salisbury CM等人,J Am Chem Soc. 2002Dec 18;124(50) :14868-70(2002))或通 ...
【技术保护点】
【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2009.12.07 US 61/267,4251.一种阵列,所述阵列包括 具有表面的基底; 在所述基底的所述表面上缔合的两个或多个单独的构建体,其中所述单独的构建体包括 编码感兴趣的肽的寡核苷酸;和 所述感兴趣的妝; 其中所述寡核苷酸与所述基底表面缔合,且所述肽与所述寡核苷酸缔合。2.—种阵列,所述阵列包括 具有表面的基底; 在所述基底的表面上缔合的两个或多个单独的构建体,其中所述单独的构建体包括 包括编码感兴趣的肽的区域、编码亲和标记物的区域和非翻译区的寡核苷酸; 包括所述感兴趣的肽和亲和标记物的肽;和 与所述亲和标记物选择性地结合的捕捉剂; 其中所述寡核苷酸与所述基底表面缔合,且所述肽通过所述亲和标记物与所述捕捉剂的结合与所述寡核苷酸缔合。3.如权利要求2所述的阵列,其中所述非翻译区包括转录起始位点和核糖体结合位点。4.如权利要求2所述的阵列,其中所述捕捉剂与所述寡核苷酸缔合。5.如权利要求2所述的阵列,其中所述寡核苷酸经由连接物与所述基底表面缔合。6.如权利要求2所述的阵列,其中所述捕捉剂与所述连接物缔合。7.如权利要求2所述的阵列,其中所述基底是平面支持体。8.如权利要求2所述的阵列,其中所述基底是珠子。9.如权利要求2所述的阵列,其中所述寡核苷酸是双链的。10.如权利要求2所述的阵列,其中所述寡核苷酸还包括用于将所述捕捉剂导入所述寡核苷酸的区域。11.如权利要求10所述的阵列,其中所述区域经由连接物分子与所述寡核苷酸缔合。12.—种构建阵列的方法,所述方法包括以下的步骤 (a)提供包括两个或多个构建体的表面,所述构建体包括编码感兴趣的肽和亲和标记物的单链寡核苷酸区域; (b)将所述单链寡核苷酸区域转化为双链寡核苷酸区域; (c)将包括核糖体起始位点的非翻译区导入到所述双链寡核苷酸区域的5’端,其中所述非翻译区与具有和所述亲和标记物形成结合配对的能力的捕捉剂缔合;和 (d)使所述双链寡核苷酸区域进行转录和翻译事件以产生包括所述感兴趣的肽和所述亲和标记物的肽; 其中在步骤(d)中产生的蛋白在翻译后被所述构建体的所述捕捉剂捕捉,从而形成包括与编码所述肽的寡核苷酸缔合的所述肽的单独的构建体。13.一种构建阵列的方法,所述方法包括以下的步骤 (a)提供包括表面的基底,在所述表面上缔合了两个或多个构建体,所述构建体包括编码感兴趣的肽和亲和标记物的单链寡核苷酸;(b)将第二通用寡核苷酸与所述构建体的所述寡核苷酸连接,其中所述通用寡核苷酸包括含核糖体结合位点的非翻译区; (C)将捕捉剂经由与所述第二寡核苷酸杂交与所述寡核苷酸连系; (d)将所述构建体的所述单链寡核苷酸区域转化为双链寡核苷酸区域;和 (e)使所述双链寡核苷酸进行转录和翻译事件以从所述双链寡核苷酸产生肽; 其中在步骤(e)中产生的蛋白被所述构建体的所述捕捉剂捕捉;且其中所得的阵列包括不连续的单元,所述不连续的单元包括与由核酸编码的所述肽缔合的所述核酸。14.一种构建阵列的方法,所述方法包括以下的步骤 (a)提供包括两个或多个构建体的表面,所述构建体包括具有作为编码感兴趣的肽和 亲和标记物的序列的反向互补物的序列的单链寡核苷酸区域; (b)将所述单链寡核苷酸区域转化为双链寡核苷酸区域; (C)将包括核糖体起始位点的非翻译区导入到所述双链寡核苷酸区域的5’端,其中所述非翻译区与具有和所述亲和标记物形成结合配对的能力的捕捉剂缔合;和 (d)使所述双链寡核苷酸区域进行转录和翻译事件以产生包括所述感兴趣的肽和所述亲和标记物的肽; 其中在步骤(d)中产生的蛋白在翻译后被所述构建体的所述捕捉剂捕捉,从而形成包括与编码所述肽的寡核苷酸缔合的所述肽的单独的构建体。15.一种构建阵列的方法,所述方法包括以下的步骤 (a)提供包括表面的基底,在所述表面上缔合了两个或多个构建体,所述构建体包括具有作为编码感兴趣的肽和亲和标记物的序列的反向互补物的序列的单链寡核苷酸; (b)将第二通用寡核苷酸与所述构建体的所述...
【专利技术属性】
技术研发人员:马克·S·奇,伊戈·A·科兹洛夫,
申请(专利权)人:普罗格诺西斯生物科学公司,
类型:发明
国别省市:
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