6-(甲巯基)嘌呤的检测方法技术

本发明专利技术公开了6-(甲巯基)嘌呤(6-Methylmercaptopurine，6-MMP)的均相酶免疫检测方法和酶联免疫吸附剂检测方法以及上述两种检测方法包含的检测试剂。本发明专利技术的两种检测方法，用抗6-MMP特异性抗体研制的检测试剂能够确定待测样本中是否存在6-MMP，同样可以对6-MMP的含量进行定量测定。与传统的基因分型和HPLC方法相比，本发明专利技术提供的免疫检测方法具有操作简便、快速、检测结果准确、费用低等优势，对于将来进行临床大面积推广应用，特别是缺乏昂贵仪器的中小医院具有很好的前景。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于生物
，涉及6-(甲巯基)嘌呤检测方法。
技术介绍
6-(甲巯基)嘌呤(6_Methylmercaptopurine,6_MMP),其结构式如式(I )所示。

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种6-(甲巯基)嘌呤的均相酶免疫检测方法(Homogeneous Immunoassay),使用6-(甲巯基)嘌呤的均相酶免疫检验试剂，该检测试剂由抗6-(甲巯基)嘌呤出-MMP)特异性抗体和6-(甲巯基)嘌呤酶标偶联物组成，包括以下操作步骤 (1)采用全自动生化分析仪，将待测样本与6-(甲巯基)嘌呤检测试剂分别放入样本仓和试剂仓； (2)按照下表进行检测项目参数设置；2.根据权利要求I所述的6-(甲巯基)嘌呤的均相酶免疫检测方法，其特征在于所述的检测试剂制备方法包含以下步骤 (1)将抗6-(甲巯基)嘌呤特异性抗体以I: 1000-1 10000的体积比稀释到均相Rl缓冲液中，均相Rl缓冲液含50mM Tris, O. 25%牛血清蛋白，50mM葡萄糖_6_磷酸和50mM烟碱腺嘌呤二核苷酸； (2)将6-(甲巯基)嘌呤酶标偶联物以I: 1000-1 10000的体积比稀释到R2缓冲液中，R2缓冲液含IOOmM Tris,O. 25%牛血清蛋白； 所述的抗6-(甲巯基)嘌呤特异性抗体与Rl缓冲液的体积比优选为I 1000-1 3000 ； 所述的6-(甲巯基)嘌呤酶标偶联物与R2缓冲液的体积比优选为I : 1000-1 3000。3.一种6-(甲巯基)嘌呤的ELISA检测方法，使用6-(甲巯基)嘌呤ELISA检验试剂，该检测试剂含有(I)抗6-(甲巯基)嘌呤出-MMP)特异性抗体；(2)酶标偶联物及底物，包括以下操作步骤 (1)用PBS将抗6-MMP特异性抗体稀释成I: 1000-1 20000的终浓度溶液，100 μ L/孔包被在96孔酶联板上，4 °C过夜； (2)用PBS洗涤3次后，加入200μ L/孔的O. 5%的BSA溶液，4°C封闭过夜，PBS洗涤3次； (3)力口入20μ L/孔的标准品； (4)加入100μ L/孔工作浓度的6_(甲巯基)嘌呤酶标偶联物； (5)室温下孵育30min，PBS洗板5次； (6)每孔加入100μ L底物，优选ΤΜΒ，室温孵育30min ； (7)每孔加入100μ L终止液(2Μ硫酸)； ...

【专利技术属性】
技术研发人员：虞留明，田军，袁红霞，蔡江丽，
申请(专利权)人：苏州博源医疗科技有限公司，
类型：发明
国别省市：