一种老刺木碱的制备方法技术

本发明专利技术公开了一种老刺木碱的制备方法，其制备方法是：(1)取海南狗牙花粗粉，用乙醇提取；(2)将提取液浓缩，再经氧化铝柱层析；(3)制备液相分离；(4)氯仿-丙酮重结晶，得到高纯度的老刺木碱结晶产品。本发明专利技术方法简单、得率高，可一次性得到高纯度产品，具有较高的经济价值和学术价值。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于天然植物提取领域，具体涉及。
技术介绍
夹竹桃科(Apocynaceae)狗牙花属(Ervatamia Stapf)植物在全世界共有约120 种，主要分布于印度、中国西南部、越南、緬甸、泰国、马来西亚、印度尼西亚、菲律宾和澳大利亚等地，南美洲也有分布。我国产15种、5变种，分布于西南、华南及台湾省。在各地本属植物均属于民间药物，用于治疗腹痛、喉痛及高血压等疾病。我国科学家对国产狗牙花属植物的化学成分和药理活性也进行了较多的研究，并发现了一些新化合物及药理活性成分。海南狗牙花Ervatamia hainanensis Tsiang的根也称单根木、独根木、山辣椒树、 艾角青、鸡爪花等，有清热解毒、降压、消肿止痛之功效，用于高血压病、咽喉肿痛、风湿痹痛等疾病的治疗。老刺木碱(Vobasine):分子式C21H24N2O3,分子量 352. 43，mp. 109 110°C (丙酮)， RfO. 33(环己烷-氯仿-二乙胺，6 3 I) ;0.58(乙醚-乙醇-二乙胺，18 I I)； 0.67(氯仿-丙酮-二乙胺，5 4 I)。老刺木碱在夹竹桃科狗牙花属植物中分布较广， 现代药理研究表明老刺木碱具有多重药理作用，如(I)兴奋中枢神经作用，成瘾性试验中， 其 SDD 125 (Standard delying dose 125)为 O. 00351 μ M/kg ; (2)肌松作用，20mg/kg 时， 有较弱的肌松活性；(3)降压作用，在大鼠中有two-stage降压作用。目前提取老刺木碱的方法主要为采用溶剂萃取、常压反复硅胶柱层析或氧化铝柱层析进行分离，存在产量小、得率低、生产周期长等问题，不适用于工业生产。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供，该方法操作简单、得率高、安全环保，可快速大量分离高纯度老刺木碱。为实现上述目的，本专利技术采用的技术方案如下(I)提取取海南狗牙花粉碎成粗粉，加乙醇热回流提取2-4小时，滤出，提取液减压回收得浸膏；(2)氧化铝柱层析分离将上述浸膏加水分散，与氧化铝树脂拌匀、干燥后装柱， 用氯仿-丙酮混合溶液洗脱，薄层检测，收集老刺木碱流分，浓缩；(3)制备液相分离取一定量的浓缩液，用甲醇溶解上反相C18色谱柱，用氯仿-甲醇作为流动相，梯度洗脱，薄层监测，收集老刺木碱组分，将洗脱液旋转蒸发浓缩，得老刺木喊粗晶；(4)重结晶将老刺木碱粗晶用氯仿-丙酮重结晶，冷冻干燥得到高纯度老刺木碱晶体。步骤⑵所述氧化铝树脂为80-120目，洗脱溶剂为氯仿-丙酮(I 1)，用量为柱体积的4-10倍。步骤(3)所述流动相氯仿-甲醇梯度洗脱条件为氯仿-甲醇(4 1,3 2，2 3,1 4)，色谱柱填料为C18，流速为8-20ml/min，柱温为室温。步骤(4)所述氯仿-丙酮的体积比为1-3 I。本专利技术的优点在于1)操作简单、耗时短，易于产业化放大；2)提取、柱层析、制备液相分离等步骤中的溶剂用量少，并可回收再利用；3)具有较高的经济效益和学术价值， 本专利技术所得产品纯度高，可为老刺木碱的进一步开发提供药理原料和实践支持。具体实施例方式下面结合具体实施例对本专利技术进一步说明实施例I :取海南狗牙花1kg，粉碎成粗粉，加乙醇热回流提取4小时，滤出，提取液减压回收得浸膏，向浸膏加水分散，与氧化铝树脂(120目)拌匀、干燥后装柱，用10倍柱体积的氯仿-丙酮(I I)混合溶液洗脱，薄层检测，收集老刺木碱流分，浓缩得浓缩液。将浓缩液加入甲醇至刚好溶解，溶解后的溶液用O. 45 μ m膜滤，取滤液进样，以氯仿-甲醇为流动相， 按(4 1,3 2,2 3,1 4)进行梯度洗脱，色谱柱填料为C18，流速为20ml/min，柱温为室温，进行老刺木碱的制备分离，紫外检测器在线监测，针对性收集老刺木碱的流分溶液， 减压回收试剂得老刺木碱粗晶，用氯仿-丙酮(I I)重结晶，冷冻干燥得到高纯度老刺木碱晶体I. 2mg。实施例2:取海南狗牙花1kg，粉碎成粗粉，加乙醇热回流提取2小时，滤出，提取液减压回收得浸膏，向浸膏加水分散，与氧化铝树脂(80目)拌匀、干燥后装柱，用4倍柱体积的氯仿-丙酮(I I)混合溶液洗脱，薄层检测，收集老刺木碱流分，浓缩得浓缩液。将浓缩液加入甲醇至刚好溶解，溶解后的溶液用O. 45 μ m膜滤，取滤液进样，以氯仿-甲醇为流动相， 按(4 1,3 2,2 3,1 4)进行梯度洗脱，色谱柱填料为C18，流速为8ml/min，柱温为室温，进行老刺木碱的制备分离，紫外检测器在线监测，针对性收集老刺木碱的流分溶液， 减压回收试剂得老刺木碱粗晶，用氯仿-丙酮(3 I)重结晶，冷冻干燥得到高纯度老刺木碱晶体I. Img0实施例3:取海南狗牙花10kg，粉碎成粗粉，加乙醇热回流提取3小时，滤出，提取液减压回收得浸膏，向浸膏加水分散，与氧化铝树脂(100目)拌匀、干燥后装柱，用8倍柱体积的氯仿-丙酮(I I)混合溶液洗脱，薄层检测，收集老刺木碱流分，浓缩得浓缩液。将浓缩液加入甲醇至刚好溶解，溶解后的溶液用O. 45 μ m膜滤，取滤液进样，以氯仿-甲醇为流动相， 按(4 1,3 2,2 3,1 4)进行梯度洗脱，色谱柱填料为C18，流速为12ml/min，柱温为室温，进行老刺木碱的制备分离，紫外检测器在线监测，针对性收集老刺木碱的流分溶液， 减压回收试剂得老刺木碱粗晶，用氯仿-丙酮(2 : I)重结晶，冷冻干燥得到高纯度老刺木碱晶体9. 2mg。权利要求1.，其特征在于它包括以下步骤(1)提取取海南狗牙花粉碎成粗粉，加乙醇热回流提取2-4小时，滤出，提取液减压回收得浸膏；(2)氧化铝柱层析分离将上述浸膏加水分散，与氧化铝树脂拌匀、干燥后装柱，用氯仿-丙酮混合溶液洗脱，薄层检测，收集老刺木碱流分，浓缩；(3)制备液相分离取一定量的浓缩液，用甲醇溶解上反相C18色谱柱，用氯仿-甲醇作为流动相，梯度洗脱，薄层监测，收集老刺木碱组分，将洗脱液旋转蒸发浓缩，得老刺木碱粗晶;(4)重结晶将老刺木碱粗晶用氯仿-丙酮重结晶，冷冻干燥得到高纯度老刺木碱晶体。2.根据权利要求I所述的老刺木碱的制备方法，其特征在于步骤(2)所述氧化铝树脂为80-120目，洗脱溶剂为氯仿-丙酮(I I)，用量为柱体积的4-10倍。3.根据权利要求I所述的老刺木碱的制备方法，其特征在于步骤(3)所述流动相氯仿-甲醇中甲醇的体积百分比为20-80%。4.根据权利要求I所述的老刺木碱的制备方法，其特征在于步骤(4)所述氯仿-丙酮的体积比为1-3 I。全文摘要本专利技术公开了，其制备方法是(1)取海南狗牙花粗粉，用乙醇提取；(2)将提取液浓缩，再经氧化铝柱层析；(3)制备液相分离；(4)氯仿-丙酮重结晶，得到高纯度的老刺木碱结晶产品。本专利技术方法简单、得率高，可一次性得到高纯度产品，具有较高的经济价值和学术价值。文档编号C07D471/18GK102584823SQ201210016678公开日2012年7月18日 申请日期2012年1月16日 优先权日2012年1月16日专利技术者程志鹏, 陈洪生 申请人:江苏博益生物科技有限公司本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：陈洪生，程志鹏，
申请(专利权)人：江苏博益生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：