一种隐绿石蕊酸的精制方法技术

本发明专利技术涉及一种隐绿石蕊酸的精制方法，工艺步骤包括：1、将药材粉碎，加入适量蒸馏水和生物酶自然酶解，得到的酶解原料采用酸水恒温连续逆流渗漉提取；2、渗漉液上聚酰胺柱；3、洗脱液上大孔树脂柱吸附洗脱；4、洗脱液浓缩，用有机溶剂萃取，弃去水相，再用酸水萃取除去杂质，减压浓缩有机相至浸膏状；5、将浸膏用葡聚糖凝胶柱色谱分离纯化获得高纯度隐绿石蕊酸。本发明专利技术方法成本低、纯度好、环境污染小、适合工业大生产。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于天然药物制备领域，具体涉及。
技术介绍
隐绿石蕊酸(Cryptochlorophaeicacid)分子式为 C25H32O8,分子量为 460. 52, 为无色针晶，mp. 182-184°C。分布于石蕊科植物隐绿石蕊Cladonia cryptochlorophaea Asahina及梅衣科植物隐绿梅衣Parmelia cryptochlorophaea Hale中。近年来，随着药理研究的深入，隐绿石蕊酸的药理活性被发现，隐绿石蕊酸具有抑制兔肾微粒体中前列腺素生物合成。目前尚无大量制备隐绿石蕊酸的方法报道，本专利技术提供的方法能使隐绿石蕊酸的纯度达到98 %，又适合工业化生产，成本低、环境污染小。
技术实现思路
本专利技术的目的是提供一种低成本、产率高，可工业化生产的制备隐绿石蕊酸的方法。为实现上述目的，本专利技术采用以下技术方案，其特征在于包括以下步骤(I)将富含隐绿石蕊酸的药材粉碎，加入适量蒸馏水和生物酶自然酶解，得到的酶解原料放入连续逆流渗漉提取系统中，采用酸水恒温提取；(2)将渗漉液上聚酰胺柱，先用低醇溶液洗脱除去杂质，再用去离子水洗脱洗净醇，最后用碱水洗脱，收集洗脱液，盐酸调PH至3-4 ；(3)将调酸后的洗脱液上大孔树脂柱吸附，先用2-4BV水洗脱，再用80_95%乙醇洗脱，收集醇洗脱液；(4)将洗脱液浓缩，用有机溶剂萃取，弃去水相，再用酸水萃取除去杂质，减压浓缩有机相至浸膏状；(5)将浸膏用葡聚糖凝胶柱色谱分离纯化，40-60%乙醇洗脱，获得高纯度隐绿石蕊酸。步骤⑴中所述富含隐绿石蕊酸的药材为石蕊科植物隐绿石蕊 Cladoniacryptochlorophaea Asahina 或梅衣科植物隐绿梅衣 Parmelia cryptochlorophaea Hale0步骤(I)中生物酶的用量为O. 4-0.6%，所述生物酶为半纤维素酶、纤维素酶、淀粉酶、果胶酶中的一种或几种混合。步骤(I)中所述酸水为无机酸或有机酸的水溶液，pH控制在1-4，渗漉时间为 10-24小时。步骤(2)中所述低醇溶液为5-10%的乙醇水溶液。步骤(4)中所述有机溶剂为乙酸乙酯或乙酸丙酯。步骤(4)中所述酸水为pH为2-3的盐酸或硫酸水溶液。本专利技术的有益效果是I、由于隐绿石蕊酸为酚酸类化合物，不稳定，因此选用酸水为提取溶媒，提取液中杂质少、隐绿石蕊酸纯度高；2、本专利技术选用连续逆流渗漉提取，能耗低，生产效率高，且溶剂耗量低；3、采用聚酰胺柱、大孔树脂柱、葡聚糖凝胶柱，使用的溶剂为乙醇水溶液，成本低， 可回收反复使用。下面将结合具体实施方式进一步说明本专利技术，但本专利技术要求保护的范围并不局限于下列实施方式。具体实施例方式实施例I :将隐绿石蕊药材粉碎，取3kg加入适量蒸馏水和15g半纤维素酶和淀粉酶(质量比为3 I)自然酶解得酶解原料，将酶解原料放入连续逆流渗漉提取系统中，加入盐酸水溶液(pH2. 5) 15L冷浸3小时，渗漉18小时，流速I. 5L/h，收集渗漉液27L，离心，上聚酰胺树脂柱，先用6-7%乙醇溶液洗去杂质，然后用去离子水将醇洗净，最后用O. 04%碳酸钠水溶液洗脱，收集洗脱液，用盐酸调洗脱液至PH3. 3，上HPD100大孔吸附树脂柱，用3BV水洗脱，再加90%乙醇洗脱，收集乙醇洗脱液，低温减压浓缩，用等体积的乙酸丙酯萃取3次，合并有机相，浓缩至1/3体积，加pH3的盐酸水溶液萃取浓缩的有机相6次，弃去水相，减压浓缩有机相成浸膏，40 %乙醇溶解，上葡聚糖凝胶柱，50 %乙醇洗脱，根据TLC合并洗脱液，低温减压浓缩干燥，温度控制在60°C，回收试剂，得3. Og产品(隐绿石蕊酸含量为98. 93% )0实施例2 将隐绿石蕊药材粉碎，取3kg加入适量蒸馏水和12. 9g半纤维素酶和淀粉酶(质量比为3 I)自然酶解得酶解原料，将酶解原料放入连续逆流渗漉提取系统中，加入盐酸水溶液(PHI. O) 18L冷浸5小时，渗漉24小时，流速2L/h，收集渗漉液30L，离心，上聚酰胺树脂柱，先用5-6%乙醇溶液洗去杂质，然后用去离子水将醇洗净，最后用O. 06%碳酸钠水溶液洗脱，收集洗脱液，用盐酸调洗脱液至PH3. O,上H103大孔吸附树脂柱，用4BV水洗脱， 再加80%乙醇洗脱，收集乙醇洗脱液，低温减压浓缩，用等体积的乙酸乙酯萃取3次，合并有机相，浓缩至1/3体积，加pH2. 5的硫酸水溶液萃取浓缩的有机相5次，弃去水相，减压浓缩有机相成浸膏，20%乙醇溶解，上葡聚糖凝胶柱，40%乙醇洗脱，根据TLC合并洗脱液，低温减压浓缩干燥，温度控制在60°C，回收试剂，得3. 2g产品(隐绿石蕊酸含量为98. 64% )0实施例3 将隐绿梅衣药材粉碎，取Ikg加入适量蒸馏水和6g纤维素酶自然酶解得酶解原料，将酶解原料放入连续逆流渗漉提取系统中，加入盐酸水溶液(PH3. 0)5L冷浸4小时，渗漉10小时，流速2L/h，收集渗漉液10L，离心，上聚酰胺树脂柱，先用9-10%乙醇溶液洗去杂质，然后用去离子水将醇洗净，最后用O. 01 %氢氧化钠水溶液洗脱，收集洗脱液,用盐酸调洗脱液至PH3. 5，上DlOl大孔吸附树脂柱，用2BV水洗脱，再加85 %乙醇洗脱，收集乙醇洗脱液，低温减压浓缩，用等体积的乙酸乙酯萃取3次，合并有机相，浓缩至1/3体积，加 PH2的盐酸水溶液萃取浓缩的有机相4次，弃去水相，减压浓缩有机相成浸膏，30%乙醇溶解，上葡聚糖凝胶柱，55 %乙醇洗脱，根据TLC合并洗脱液，低温减压浓缩干燥，温度控制在60°C，回收试剂，得16. 5g产品(隐绿石蕊酸含量为98. 86% )。实施例4 将隐绿梅衣药材粉碎，取2kg加入适量蒸馏水和11.2g果胶酶和淀粉酶(质量比为I : 2)自然酶解得酶解原料，将酶解原料放入连续逆流渗漉提取系统中，加入盐酸水溶液(pHl. 5) IOL冷浸6小时，渗漉20小时，流速I. 5L/h，收集渗漉液22L，离心，上聚酰胺树脂柱，先用8-9%乙醇溶液洗去杂质，然后用去离子水将醇洗净，最后用O. 08%碳酸氢钠水溶液洗脱，收集洗脱液，用盐酸调洗脱液至PH3. 8，上AB-8大孔吸附树脂柱，用4BV水洗脱，再加95%乙醇洗脱，收集乙醇洗脱液，低温减压浓缩，用等体积的乙酸丙酯萃取3次，合并有机相，浓缩至1/3体积，加pH2. 2的硫酸水溶液萃取浓缩的有机相5次，弃去水相，减压浓缩有机相成浸膏，40 %乙醇溶解，上葡聚糖凝胶柱，60 %乙醇洗脱，根据TLC合并洗脱液，低温减压浓缩干燥，温度控制在60°C，回收试剂，得34. 3g产品(隐绿石蕊酸含量为99. 17% )。权利要求1.，其特征在于包括以下步骤(1)将富含隐绿石蕊酸的药材粉碎，加入适量蒸馏水和生物酶自然酶解，得到的酶解原料放入连续逆流渗漉提取系统中，采用酸水恒温提取；(2)将渗漉液上聚酰胺柱，先用低醇溶液洗脱除去杂质，再用去离子水洗脱洗净醇，最后用碱水洗脱，收集洗脱液，盐酸调PH至3-4 ；(3)将调酸后的洗脱液上大孔树脂柱吸附，先用2-4BV水洗脱，再用80-95%乙醇洗脱， 收集醇洗脱液；(4)将洗脱液浓缩，用有机溶剂萃取，弃去水相，再用酸水萃取除去杂质，减压浓缩有机相至浸膏状；(5)将浸膏用葡聚糖凝胶柱色谱分离纯化，40本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：陈洪生，程志鹏，
申请(专利权)人：江苏博益生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：