一种新型高效液相色谱介质及其制备方法技术

本发明专利技术公开了一种新型高效液相色谱介质及其制备方法。介质的组成中基质为多孔二氧化硅微球，功能配基为通过硅烷化试剂引入的吡啶基。制备方法如下，将多孔氧化硅微球充分干燥后，在氮气保护下，于甲苯中与具有吡啶基的硅烷化试剂进行加热反应，即可得到疏水性电荷诱导型高效液相色谱介质。本发明专利技术所研制的高效液相色谱介质，具有疏水性电荷诱导分离原理，具有制备方法简单、成本低廉、配基密度高、蛋白吸附量大、特异性强和吸附洗脱条件温和等优点，可用于蛋白质的高效分离纯化。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及
技术介绍
高效液相色谱(HPLC)是一种强有力并被广泛使用的纯化和分析复杂组分的技术，而传统的高效液相色谱大部分都是基于反相色谱原理的。反相层析(RPC)是根据蛋白质的高表面张力进行吸附，通过降低表面张力进行洗脱的；层析介质上的非极性基团可以和蛋白质或多肽表面的疏水部位进行相互作用；在水溶液中目标物质具有较高的极性而吸附，通过在洗脱液中添加有机溶剂降低极性达到洗脱的目的。传统的高效液相色谱介质大部分都是通过在介质上连接一定长度的碳链，起功能化作用，目标产物吸附后，再用有机溶剂梯度洗脱，具有分辨率高的优点。但是有机溶剂极易造成蛋白质的变性，使高效液相色谱技术在蛋白质的分离应用受到了限制。具有吡啶基的疏水性电荷诱导型配基属于弱碱性化合物，在pH 4-10的范围内不带电荷，可以避免静电作用对杂质的吸附，配基可以通过疏水作用与蛋白质相结合，而当PH 值降低到配基的PKa以下时，杂环质子化，若此时蛋白质也带有正电荷，可通过静电排斥作用实现洗脱。这种以疏水作用吸附、静电排斥协助解析的过程是HCIC的最大特征，可通过将流动相PH降低到4. 0-4. 55进行洗脱，避免反相色谱中有本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：夏海锋，金雄华，吴璞强，郑梦杰，
申请(专利权)人：江南大学，
类型：发明
国别省市：