微生物培养片及其制造方法技术

本发明专利技术提供一种能够将昂贵的培养材料的使用限定在必要部分、制造时的工序简便、使用者能够简便且稳定地使用的微生物培养片。本发明专利技术的微生物培养片是一种具有基片、形成在所述基片上的培养层以及覆盖所述培养层的盖板的微生物培养片，其中，所述培养层是对含有选自由凝胶化剂、营养成分、显色指示剂、选择剂以及基质组成的组中的至少一种的和聚乙烯吡咯烷酮的培养液进行图案形成而得到的层。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】
本专利技术涉及一种用于菌数检查等的微生物培养片，详细而言，涉及一种由于培养层被在基片的规定范围内形成图案，因而培养材料的浪费少且操作简便的微生物培养片。
技术介绍
作为确认微生物的存在或者测定微生物数的方法，有琼脂平板混释法。在该琼脂平板混释法中，由于使用预先形成在已灭菌的培养皿的琼脂培养基，因而需要用于对琼脂培养基进行高压蒸汽灭菌的高压灭菌器和用于无菌地进行微生物检查的检查室，另外，对于从微生物的取样到样品液的制备、分注、与培养基的混释、培养、计数的微生物检查操作， 要求熟练。于是，正在开发具备不需要高度熟练、能够简便地进行微生物检查的干燥培养基的微生物培养片。例如，在专利文献1中，公开了一种片状培养装置，其在防水性基体上具备通过粘合剂均勻地粘合了含有凝胶化剂、营养成分的冷水可溶粉末的粘合剂层。对于通过粘合层使浸在凝胶化剂和微生物的生长培养基中的滤纸与膜粘合的现有装置，由于滤纸不具有透明性，细菌菌落的计数困难，另外，很难分离每个菌落，鉴于这些问题完成该片状培养装置， 通过经由粘合剂直接固定凝胶化剂和营养成分的方法来解决使滤纸介于之间的装置存在的问题。另外，专利文献1中还记载有如下内容在使用上述片状培养装置时，通过将具有重量的环状轮样的型板暂时放置在盖板上，从而使被检液以限定在特定的区域内的方式扩散。在专利文献2中，公开了一种片状培养装置，其包括基材、形成在该基材面上的包括有非吸收性培养面的台座以及盖板，并且使培养基附着在上述培养面和/或者盖板的底面。利用经由粘合剂将冷水可溶粉末粘合在基体上的现有方法，由于形成不规则形状和尺寸的粘合物，因而不能将凝胶化剂、营养物质、抑制剂、指示剂等培养基构成成分维持在适当浓度，鉴于这样的问题完成该片状培养装置。根据专利文献2中记载的片状培养装置，使用者不需要特别的设备和操作，能够使水性试样扩散为均勻的形状和尺寸。此外，在专利文献2的实施例中，利用如下的方法制造片状培养装置。首先，在台座底部的一个面上涂布含有胶的肉汁溶液即培养液之后，在温度100°C下使水分蒸发。然后，使热敏粘合剂、聚苯乙烯发泡体以及聚丙烯酸酯PSA贴合在上述台座底部的另一个面上，将所得到的层积体冲裁成直径5. Icm0在将该冲裁后的层积体以PSA—侧为下方的方式贴合在基材面上之后，使盖板附着在上述基材的边缘，从而制造片状的培养装置。在专利文献3中，公开了一种微生物培养器，其在方形的粘着片上层积圆形的多孔质基体层和水溶性高分子化合物层，在其上再配设有方形的透明膜。在该微生物培养器中，通过向多孔质基体层上添加样品液，样品液被多孔质基体层保持。于是，由于该被保持着的样品液的水分，与多孔质基体层接触的水溶性高分子化合物层溶解，进而产生水溶性高分子化合物水溶液，由该高分子化合物水溶液和生长营养成分构成微生物能够生长发育的环境。此外，在该微生物培养器中，由于溶解的水溶性高分子化合物层为高粘度溶液，因而微生物不会侵入至水溶性高分子化合物层内部，在溶解的水溶性高分子化合物层与多孔质基体层一体化的工序中，微生物被上推到多孔质基体层的表面。因此，菌落形成在多孔质层的表面或者表面附近。通过以上述多孔质基体层为上方的方式使其粘结在粘合片上，再以与上述多孔质基体层接触的方式覆盖透明膜，从而该微生物培养器能够用作轻量而体积小且容易处理的片状微生物培养器。此外，作为上述水溶性高分子，公开了皂化度为75% 95%、分子量为25000 250000的聚乙烯醇。在专利文献4中，公开了一种微生物培养片，其在防水性的基片的整个面上涂布培养基混合物和吸水性树脂而形成培养层，在该培养层上形成有用于限定所要接种的被检液的扩散的疏水性油墨外框层。此外，在专利文献4的实施例中，将厚度100 μ m的透明的双轴延伸聚酯膜作为基片，在该基片上，利用逗号涂布机(二二一夕一)以干燥时的涂布量为30g/m2的方式涂布在聚氧化乙烯(聚乙烯氧化物)的甲苯溶液中混合了营养成分和氯化三苯基四唑(鐺)而得的培养层形成用涂布液，在形成的培养层上，通过疏水性油墨的丝网印刷而形成有成为外框层的、内径50mm、外径70mm的环形图案。现有技术文献专利文献专利文献1 日本专利特公平2-49705号公报专利文献2 日本专利特表2004-515236号公报专利文献3 国际公开WO 01/044437号公报专利文献4 日本专利特开平8480377号公报
技术实现思路
专利技术要解决的技术问题然而，由于微生物的培养材料昂贵，因而优选能够减少其使用量。但是，在专利文献4中，在基材膜上的整个区域上层积有培养层，在微生物的培养所必需的部分以外也形成有培养层，因而浪费了昂贵的材料。另外，在专利文献2、专利文献3中，在膜上全面涂布了培养液之后，将其一部分冲裁掉，将贴在基材上的部分作为培养层，在这一点上，仍然浪费材料。另外，微生物培养片优选制造时工序简便。在这一点上，上述专利文献1记载的培养装置通过粘合剂使作为凝胶化剂、营养成分的冷水可溶粉末均勻地粘合在基体上而形成培养层，虽然可以说是简便的方法，但是在该方法中，微生物容易与粘合剂成分接触。因此，粘合剂成分有可能会对微生物的生长发育带来影响，因而不能说优选。相反，在专利文献2记载的片状培养装置中，不使用粘合剂，而在包含聚酯膜的台座底部上，通过涂布作为凝胶化剂而含有瓜尔豆胶的肉汁溶液而形成培养层。然而，在专利文献2记载的片状培养装置中，如上所述，在膜上整面涂布了培养液之后，进行冲裁加工，再利用粘合剂将所得到的冲裁加工品贴合在基材上而形成培养层，因而制造工序繁杂。专利文献3中记载的微生物培养器由于也进行与专利文献2中记载的片状培养装置同样的操作，因而制造工序仍然夢芬糸 7Τ< ο在专利文献2记载的片状培养装置中，培养基溶液含有水，因而必须在高温条件下进行加热干燥，营养成分、凝胶化剂、显色指示剂、基质以及基材可能会由于加热而被分4解。因此，能够使用的营养成分或者凝胶化剂、显色指示剂、基质以及基材受到限制。这对于使用聚乙烯醇水溶液的专利文献3中记载的微生物培养器也是同样的。在专利文献4记载的微生物培养片中，作为培养基混合物使用了聚氧化乙烯的甲苯溶液，但甲苯也是超过 100°C的高沸点的有机溶剂，从这一点来看，所能够使用的材料仍然受到限制。而且，为了快速地进行，被检液的接种操作也优选简便。然而，在专利文献1记载的培养装置中，为了控制被检液的扩散，必须暂时将具有重量的环状轮样的型板放置在盖板上，将被检液限定在特定区域内，很难说操作简便。另外，在专利文献3记载的微生物培养器中，为了抑制被检液的扩散而包含了多孔质基体的培养层。因此，被检液的吸水时间变长，对于使用者来说，容易浪费操作时间。另外，在专利文献3记载的微生物培养器中，为了防止培养时的干燥，使盖板覆盖在被检液接种后的培养层上，但是由于上述培养层吸水而体积增加，如果不慎重地紧贴粘着片与盖板，有时会产生成为培养时干燥的原因的间隙。另夕卜，如果在吸水后按压培养层，则被检液有时会从多孔质基体渗出，操作者必须慎重地进行操作。在这一点上，也容易浪费操作时间。在专利文献4记载的微生物培养片中，为了限定所接种的被检液的扩散，设置有疏水性油墨外框层。由于该外框层形成在培养层上，因而随着被检液的滴下，外框层的下部含有本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】...

【专利技术属性】
技术研发人员：马场琢磨，木下麻衣，斋藤累，植木哲司，
申请(专利权)人：大日本印刷株式会社，
类型：发明
国别省市：