一种同时检测两种β-肾上腺受体激动剂快速检测卡制造技术

一种同时检测两种β-肾上腺受体激动剂快速检测卡，属于β-肾上腺受体激动剂检测技术领域。本实用新型专利技术一种同时检测两种β-肾上腺受体激动剂快速检测卡外壳内有测试条，测试条由支承背板上依次粘贴样品垫、胶体金膜、硝酸纤维素膜和吸水膜所组成；胶体金膜为含抗盐酸克伦特罗抗体胶体金标记物的玻璃纤维膜，硝酸纤维素膜上有两条显示印记带，一条为含盐酸克伦特罗蛋白质偶联物的检测带，另一条为含抗兔抗体或抗鼠抗体的质控带。本实用新型专利技术优点是应用免疫学的方法直接检测尿液、饲料、或动物组织、肉、肝脏样品中盐酸克伦特罗和/或沙丁胺醇的含量。本实用新型专利技术一种同时检测两种β-肾上腺受体激动剂快速检测卡易于制备，使用方便快速，结果准确。（*该技术在2021年保护过期，可自由使用*）

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及一种同时检测两种β-肾上腺受体激动剂快速检测卡，是一种检测 β -肾上腺受体激动剂盐酸克伦特罗和/或沙丁胺醇的检测器具，属于β -肾上腺受体激动剂检测

技术介绍
盐酸克伦特罗和沙丁胺醇都属于肾上腺受体激动剂，具有扩张支气管的作用，在临床上常用来防治哮喘、肺气肿等肺部疾病。在畜牧业生产中，由于它可明显增加瘦肉率，一些养猪户将其作为饲料添加剂使用，俗称“瘦肉精”。通常在肥猪出栏前20天左右添加，能起到促进动物肌肉生长，减少动物胴体脂肪的效果。人食用了饲喂盐酸克伦特罗或沙丁胺醇作为添加剂的动物所生产的禽畜产品后，会产生心跳过快，心慌，不由自主的颤抖、双脚站不住，心悸胸闷，四肢肌肉颤动，头晕乏力等神经中枢中毒后失控的现象，对心率失常、高血压、青光眼、糖尿病、甲状腺机能亢进等疾病的患者则有较大危害，甚至导致死亡，因此全球禁止将其作为饲料添加剂。在我国农业部早已发文，明令禁止在猪饲料中使用瘦肉精，但不法之徒被利益驱使，仍大量使用，致使中毒事件频发，老百姓谈肉色变。传统的盐酸克伦特罗和沙丁胺醇检测方法有高效液相色谱法(HPLC)、气-质联用法(GC-MQ以及酶联免疫吸附法，这些方法操作过程都比较繁琐，并且依赖仪器设备，不适用于现场快速检测。为此，本专利技术拟专利技术一种基于盐酸克伦特罗蛋白质偶联物抗原性的免疫学检测方法。盐酸克伦特罗和沙丁胺醇都属于肾上腺受体激动剂，结构类似，具有相似的化学结构，依据免疫制备的抗盐酸克伦特罗抗体可与沙丁胺醇进行反应，有些抗体交叉反应率达 100%。根据这一现象，采用抗盐酸克伦特罗抗体和盐酸克伦特罗蛋白质偶联物，采取免疫学竞争法的原理，结合胶体金标记技术和免疫层析法设计的一种快速检测卡，可快速特异地检测样品中的盐酸克伦特罗和/或沙丁胺醇。根据检测卡样品检测线(T)和质控线(C)的有无显色来判定样品中的盐酸克伦特罗和/或沙丁胺醇含量。反应是利用免疫反应而建立的一种检测方法，具有特异性强的优点，可避免其它检测方法的假阳性导致的误检问题。同时检测卡操作简单快速，无需特殊的仪器设备，既可以在实验室进行，也可在超市、家庭、车间等实地进行测定。由于样本量需要少、简便快速，适用于大量样本的筛查。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供一种同时检测两种β -肾上腺受体激动剂的检测器具，直接应用免疫学的方法直接检测尿液、饲料或动物组织、肉、肝脏样品中盐酸克伦特罗和/或沙丁胺醇的含量。本专利技术的技术方案一种同时检测两种β -肾上腺受体激动剂快速检测卡，在长条扁平薄壳状的检测卡外壳(1)中设置测试条(2)，检测卡外壳表面有检测窗孔(3)和加样孔(4)；测试条(2)是由支承背板(5)上通过不干胶在其上依次粘贴样品垫(8)、胶体金膜(7)、硝酸纤维素膜(6)、和吸水膜(9)所组成；支承背板中部叠置粘贴硝酸纤维素膜(6)，支承背板一端叠置粘贴吸水膜(9)，另一端叠置粘贴样品垫(8)，吸水膜内端与样品垫内端各自分别与硝酸纤维素膜搭接，在样品垫与硝酸纤维素膜的搭接部，两者之间夹置粘贴一段胶体金膜(7);胶体金膜为含抗盐酸克伦特罗抗体胶体金标记的玻璃纤维膜，硝酸纤维素膜上有一条检测带和一条质控带，依次是含盐酸克伦特罗蛋白质偶联物的检测带(10)，含抗兔抗体或抗鼠抗体的质控带(11 )，测试条置入检测卡外壳内，样品垫正对加样孔，硝酸纤维素膜正对检测窗孔。应用免疫学的方法直接检测样品中盐酸克伦特罗和/或沙丁胺醇的含量，检测样品为尿液、饲料或动物组织、肉、肝脏，对于各种不同的检测样品用不同的处理方法针对尿液样品的处理方法是尿液直接用作检测样品，若尿液呈浑浊状，需先经滤纸滤过，取上清液作测试样品；针对饲料样品的处理方法是称取0. 5g的饲料样品，加入2mL样品抽提液pH7. 0、 50mmol/L Tris-HCl，在试管中搅拌1分钟，静置10分钟后，取清亮上清液作测试样品；针对动物组织、肉、肝脏样品的处理方法是取Ig剪碎或勻浆过的动物组织、肉、 肝脏样品，置于含ImL样品抽提液pH7.0、50mmol/L Tris-HCl的试管中，扭紧管盖，振摇样品1分钟后，经100°C水浴5分钟，冷却至室温，取清亮的中间部分作测试样品。当检测带10和质控带11同时显现棕红色印迹带，检测结果为阴性，表示被检测样品中盐酸克伦特罗和/或沙丁胺醇含量未超过允许值。当检测带10不显示颜色，只有质控带11显现棕红色印迹，检测结果为阳性，表示被检测样品中盐酸克伦特罗和/或沙丁胺醇含量超过允许值3ppb。当检测带10和质控带11均不显色，则表明测试条已失效。本专利技术的优点是1、能检测尿液或饲料、动物组织、肉、肝脏等样品中含有的盐酸克伦特罗和/或沙丁胺醇。检测卡上的抗盐酸克伦特罗抗体标记的胶体金和盐酸克伦特罗蛋白质偶联物结合时具有很高的特异性，在实际检测中，可以同时检测盐酸克伦特罗和/或沙丁胺醇，其检测限见表1。表1交叉反应与检测限权利要求1. 一种同时检测两种β-肾上腺受体激动剂快速检测卡，其特征在于在长条扁平薄壳状的检测卡外壳(1)中设置测试条(2)，检测卡外壳表面有检测窗孔(3)和加样孔(4); 测试条(2)是由支承背板(5)上通过不干胶在其上依次粘贴样品垫(8)、胶体金膜(7)、硝酸纤维素膜(6)、和吸水膜(9)所组成；支承背板中部叠置粘贴硝酸纤维素膜(6)，支承背板一端叠置粘贴吸水膜(9)，另一端叠置粘贴样品垫(8)，吸水膜内端与样品垫内端各自分别与硝酸纤维素膜搭接，在样品垫与硝酸纤维素膜的搭接部，两者之间夹置粘贴一段胶体金膜 (7)；硝酸纤维素膜上有一条检测带和一条质控带，依次是含盐酸克伦特罗蛋白质偶联物的检测带(10)，含抗兔抗体或抗鼠抗体的质控带(11)，测试条置入检测卡外壳内，样品垫正对加样孔，硝酸纤维素膜正对检测窗孔。专利摘要一种同时检测两种β-肾上腺受体激动剂快速检测卡，属于β-肾上腺受体激动剂检测
本技术一种同时检测两种β-肾上腺受体激动剂快速检测卡外壳内有测试条，测试条由支承背板上依次粘贴样品垫、胶体金膜、硝酸纤维素膜和吸水膜所组成；胶体金膜为含抗盐酸克伦特罗抗体胶体金标记物的玻璃纤维膜，硝酸纤维素膜上有两条显示印记带，一条为含盐酸克伦特罗蛋白质偶联物的检测带，另一条为含抗兔抗体或抗鼠抗体的质控带。本技术优点是应用免疫学的方法直接检测尿液、饲料、或动物组织、肉、肝脏样品中盐酸克伦特罗和/或沙丁胺醇的含量。本技术一种同时检测两种β-肾上腺受体激动剂快速检测卡易于制备，使用方便快速，结果准确。文档编号G01N33/558GK202166652SQ20112026047公开日2012年3月14日 申请日期2011年7月22日 优先权日2011年7月22日专利技术者吴文晔, 周坚, 熊晓芳 申请人:无锡安迪生物工程有限公司本文档来自技高网...

【技术保护点】
１．一种同时检测两种β－肾上腺受体激动剂快速检测卡，其特征在于：在长条扁平薄壳状的检测卡外壳（１）中设置测试条（２），检测卡外壳表面有检测窗孔（３）和加样孔（４）；测试条（２）是由支承背板（５）上通过不干胶在其上依次粘贴样品垫（８）、胶体金膜（７）、硝酸纤维素膜（６）、和吸水膜（９）所组成；支承背板中部叠置粘贴硝酸纤维素膜（６），支承背板一端叠置粘贴吸水膜（９），另一端叠置粘贴样品垫（８），吸水膜内端与样品垫内端各自分别与硝酸纤维素膜搭接，在样品垫与硝酸纤维素膜的搭接部，两者之间夹置粘贴一段胶体金膜（７）；硝酸纤维素膜上有一条检测带和一条质控带，依次是：含盐酸克伦特罗蛋白质偶联物的检测带（１０），含抗兔抗体或抗鼠抗体的质控带（１１），测试条置入检测卡外壳内，样品垫正对加样孔，硝酸纤维素膜正对检测窗孔。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：周坚，吴文晔，熊晓芳，
申请(专利权)人：无锡安迪生物工程有限公司，
类型：实用新型
国别省市：32