作为心脏疾病标志物的嗜苯胺蓝颗粒蛋白酶制造技术

本发明专利技术涉及用于检测和／或测定来自多形核嗜中性粒细胞的嗜苯胺蓝颗粒的蛋白酶或其与内源抑制剂的复合物的分析方法，用于患有心脏疾病或病症的患者的风险分层和／或预后和／或治疗控制和／或监测。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】作为心脏疾病标志物的嗜苯胺蓝颗粒蛋白酶本专利技术涉及用于检测和/或测定来自多形核嗜中性粒细胞的嗜苯胺蓝颗粒的蛋白酶或其与内源抑制剂的复合物的分析方法，用于患有心脏疾病或病症的患者的风险分层和/或预后和/或治疗控制和/或监测。动脉粥样硬化与血管壁的炎性变化有关(Libby等，Circulation 2005,111, 3481-3488)，包括巨噬细胞和淋巴细胞浸润。在嗜中性粒细胞计数与急性冠脉综合征的未来风险之间存在关联(Friedman等，N. Engl. J. Med. 1974 ；290,1275-8) 最近的证据证实了急性冠脉综合征中嗜中性粒细胞活性的升高(Naruko等，Circulation 2002，106， 2894-900 ；Buffon 等，N. Engl. J. Med. 2002，347，5-12)。髓过氧化物酶(MPO)是存在于嗜中性粒细胞的嗜苯胺蓝颗粒中的一种酶，其可以通过金属蛋白酶的活化刺激斑块的去稳定作用(Fu等，J Biol Chem 2001，276，41279-87)。 在冠状动脉疾病中MPO的血浆水平升高Oiang等，JAMA 2001，286，2136-42)，并预测患者出现胸痛(Brennan 等，N Engl J Med 2003，349，1595-604)和急性冠脉综合征(Baldus 等，Circulation 2003，108，1440-5)的结果。蛋白酶3(冊3)与其他丝氨酸蛋白酶例如弹性蛋白酶和组织蛋白酶G—起，是嗜中性粒细胞嗜苯胺蓝颗粒的另一种主要组分(Wmm 等，Nat Rev Immunol 2006,6,541-50) 嗜中性粒细胞对强烈刺激做出响应释放出嗜苯胺蓝颗粒，而刺激较弱时释放出分泌颗粒(其也含有PR3 (Witko-Sarsat等，Blood 1999， 94,2487-96))。PR3 也可以表达在内皮细胞上(Mayet 等，Blood 1993，82，1221-9)。嗜中性粒细胞丝氨酸蛋白酶可以降解细胞外基质；此外PR3具有其他有害效应，其可能与在韦格纳(Wegener’ s)肉芽肿中脉管炎的发病中的作用相关。这些包括通过内皮细胞上的胱天蛋白酶(caspase)样活性诱导凋亡(Pendergraft 等，Kidney Int. 2004，Jan,65(1), 75-84)，从TNF- α的初生膜结合前体形式释放活化的TNF- α (Robache-Gallea等，J Biol Chem. 1995，270，23688-92 ；Coeshott 等，PNAS 1999，96，6261-6)，活化前炎性介导物白介素-1β (Coeshott 等，PNAS 1999,96,6261-6)和白介素-18 (Sugawara 等，J Immunol. 2001 Dec 1,167(11) ,6568-75)，以及从血管紧张肽原产生血管紧张肽I和II (Ramaha等，Arch Biochem Biophys. 2002，397，77—83)。PR3通过与α-1-抗胰蛋白酶(丝氨酸蛋白酶抑制剂Al)的不可逆结合而快速失活(Baslund 等，J Immunol Methods 1994，175，215-25 ;Duranton 等，Am J Respir Cell Mol Biol. 2003，29，57-61)，其中丝氨酸蛋白酶与丝氨酸蛋白酶抑制剂(serpin)的反应性中心环反应，产生共价结合的中间体，导致蛋白酶的扭曲和失活(Stratikos等，PNAS, 1997，94，453-8)。因此，血浆中基本上不存在游离冊3，它主要作为冊3_丝氨酸蛋白酶抑制剂 Al 复合物存在(Baslund 等，J Immunol Methods 1994，175，215-25)。循环中PR3的来源可能部分来自于脱颗粒的活化的嗜中性粒细胞，其存在于嗜苯胺蓝颗粒和分泌颗粒两者中。已知在梗塞形成后，嗜中性粒细胞浸润心肌。可选地或此外， PR3可以从内皮细胞(Mayet等，Blood 1993，82，1221-9)或肺实质细胞(Brockmann等， Arthritis Res. 2002，4，220-5)分泌。已经证实，正常肺中的肺细胞表达PR3 (Brockmann 等，Arthritis Res. 2002，4，220-5)，尽管在韦格纳肉芽肿中表达被极大上调。活性PR3在4血浆中被丝氨酸蛋白酶抑制剂Al和α 2-巨球蛋白快速失活(Pham等，Nat Rev Immunol 2006，6，541-50)。在AMI后的情况中，通过释放活性形式的TNF- α、白介素-1 β、白介素-18 (Robache-Gallea 等，J Biol Chem.1995，270，23688-92 ;Coeshott 等，PNAS 1999， 96，6261-6 ；Sugawara 等，J Immunol. 2001 Dec 1，167 (11)，6568-75)和血管紧张肽 (Ramaha 等，Arch Biochem Biophys. 2002,397,77-83)，已经显示出 PR3 对细胞的破坏性作用，例如其前凋亡活性(Pendergraft等，2004 Jan, 65 (1), 75-84)及其前炎性效应。这些细胞因子可能与尽管使用了肾素_血管紧张肽系统的抑制剂的疗法但仍然发生的AMI后心力衰竭的发生特别相关。这种丝氨酸蛋白酶在心力衰竭的发生中的牵连正在讨论之中。例如，初步证据显示，一种丝氨酸蛋白酶抑制剂elafin能够在心脏移植的实验模型中减少血管和心肌损伤(Cowan 等，J Clin Invest. 1996，97，2452-68)。根据本专利技术，令人吃惊地发现来自多形核嗜中性粒细胞的嗜苯胺蓝颗粒的蛋白酶或其与内源抑制剂的复合物，可以在心脏疾病或病症中用作生物标志物。因此，本专利技术涉及检测和/或测定作为心脏疾病中的标志物 的来自多形核嗜中性粒细胞的嗜苯胺蓝颗粒的蛋白酶或其与内源抑制剂的复合物的水平的分析方法。通过该分析方法测量的被分析物水平，可以独立于已建立的常规风险因子以及其他生物标志物进行评估。但是，这样的常规风险因子和/或其他生物标志物可以与本专利技术的分析法或方法或应用组合使用。标志物提供了互补的、独立的预测，并且这种高风险患者的鉴定可以改进他们的后续管理。这种分析方法为预测不利后果例如死亡和心力衰竭提供信息，这些信息可以独立地或与已建立的常规风险因子例如肾功能和临床人口统计信息组合应用。这种来自多形核嗜中性粒细胞的嗜苯胺蓝颗粒的蛋白酶或其与内源抑制剂的复合物的测量，单独地或与已承认的预后标志物例如B型利尿钠肽或其前体(N-末端B型利尿钠肽原或NTproBNP)、氨基末端ANP原、肾上腺髓质素原或其片段、内皮素原或其片段、血管加压素原或其片段一起使用，提供了关于AMI后心力衰竭和死亡的预后信息。本专利技术的一个实施方案是对患有心脏疾病或病症的患者进行风险分层和/或预后和/或治疗控制和/或监测的方法，所述方法包含a)提供来自所述患有心脏疾病或病症的患者的样品，b)测定所述样品中来自多形核嗜中性粒细胞的嗜苯胺蓝颗粒的蛋白酶或其与内源抑制剂的复合物本文档来自技高网...

【技术保护点】
１．一种对患有心脏疾病或病症的患者进行风险分层和／或预后和／或治疗控制和／或监测的方法，所述方法包含：ａ）提供来自所述患有心脏疾病或病症的患者的样品，ｂ）测定所述样品中来自多形核嗜中性粒细胞的嗜苯胺蓝颗粒的蛋白酶或所述蛋白酶与内源抑制剂的复合物的水平，ｃ）将所述来自多形核嗜中性粒细胞的嗜苯胺蓝颗粒的蛋白酶或所述蛋白酶与内源抑制剂的复合物的水平，归因于所述患者的疾病或病症的预后或严重程度或不利后果的风险。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】...

【专利技术属性】
技术研发人员：安德烈亚斯·贝格曼，
申请(专利权)人：BRAHMS有限公司，
类型：发明
国别省市：DE