CryIAc蛋白标准物质定值的方法技术

本发明专利技术提供一种CryIAc蛋白标准物质定值的方法，BT晶体蛋白具有高特异的杀虫活性，是近年来应用最为广泛的生物杀虫剂。在实际检测工作中，经常需要对待检测转基因作物进行CryIAc蛋白定性和定量检测，但是对于其标准物质定值是否准确的研究现在还很少。本发明专利技术所解决的技术问题是填补上述技术空白，提供一种CryIAc蛋白标准物质定值的方法，具有良好的准确性、可靠性和追溯性。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及一种标准物质的定值方法，尤其是涉及一种杀虫晶体蛋白CryIAc标准物质定值的方法。
技术介绍
对通过均勻性、稳定性检验合格样料的特性值进行测量，在标准物质
称为表征化(原文为characterize，即对材料特性进行测量)；由计量权威部门对表征化获得的样料特性的量值进行计量学溯源性(以下简称溯源性)确认和相应测量不确定度评定合理性确认，在标准物质
称为定值(原文为certify，即对测量获得的结果进行认证确认，在其它
一般称为认证)。因此，对有证标准物质的定值，实际上应分为两步 首先是对经过均勻性、稳定性检验合格的样料特性值进行测量，也就是表征化；然后是对测量结果的溯源性和测量不确定度评定的合理性进行有效性确认。苏云金芽胞杆菌(Bacillus thuringiensis，简称Bt)是一种革兰氏阳性菌，广泛存在于土壤、尘埃、水域、沙漠、植物、昆虫尸体中(贾士荣等，2001)。1901年，日本学者石渡从染病的家蚕体液中首次分离出Bt菌，并证明部分Bt对鳞翅目昆虫有杀虫活性。1915 年，Berliner注意到Bt在芽胞形成过程中，其一端出现小的包含物，本文档来自技高网...

【技术保护点】
１．一种ＣｒｙＩＡｃ蛋白标准物质定值的方法，其特征在于：包括以下步骤：（１）合成两条特异性肽段：ＬＩＧＮＹＴＤＹＡＶＲ、ＩＶＡＱＬＧＱＧＶＹＲ用于进行ＣｒｙＩＡｃ蛋白定量；（２）同时使用全氘标记的亮氨基合成对应的两条同位素标记肽段；（３）以亮氨酸、异亮氨酸、缬氨酸、脯氨酸和／或苯丙氨酸标准物质为标准，以同位素标记亮氨酸、异亮氨酸、缬氨酸、脯氨酸和／或苯丙氨酸为内标，采用同位素稀释质谱法对合成的两条标准肽段进行准确定量；（４）按４００μＬ溶液中所含ＣｒｙＩＡｃ蛋白质量，根据两条肽段的纯度计算酶切后所得两条目标肽段的质量，配制相应浓度标准肽段及同位素内标肽段；（５）准确称量４００μＬ　ＣｒｙＩＡｃ...

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：宋德伟，刘思谦，武利庆，毕佳明，王晶，杨彬，
申请(专利权)人：中国计量科学研究院，
类型：发明
国别省市：11