一种血清葡萄糖标准物质的制备方法技术

一种血清葡萄糖标准物质的制备方法，其特征在于该制备方法包括以下步骤：(1)血清的制备：起始原料来源健康捐助者血液，每个捐助者抽取全血后，得到血清量为110‑170毫升；(2)血清的处理：将各捐助者的血清混合，添加纯葡萄糖物质至目标浓度5‑7mmol/L，离心以实现均一、澄清的“候选血清标准物质”；所述的“候选血清标准物质”经无菌过滤后分装于经灭菌干燥的棕色安培瓶中，每瓶1毫升，‑70℃冰冻储存；得到互通性良好、均一稳定、量值溯源可靠的、浓度水平为5‑7mmol/L人血清基质标准物质；它具有良好均匀性、稳定性及互通性，符合ISO的要求，采用新鲜血液制备，来源广泛，制备方法简单等特点。

Method for preparing serum glucose reference material

A preparation method of serum glucose standard material, which is characterized in that the preparation method comprises the following steps: (1) serum preparation: the raw material source of healthy donors blood donors, each extraction of whole blood, serum was 110 170 ml; (2) serum treatment: the donor serum mixed, add pure glucose to the target substance concentration of 5 7mmol/L, in order to achieve uniform and centrifugal clarification \candidate serum standard\; the \candidate serum standard material by sterile filtration and packed in sterilized dry brown ampere bottle, bottle of 1 ml, 70 C frozen storage; get interoperability good, uniform and stable quantity and concentration level of traceability of reliable, 5 7mmol/L human serum matrix reference material; it has good uniformity, stability and interoperability, meet the requirements of ISO, the The preparation of fresh blood has many advantages, such as wide source and simple preparation method.

【技术实现步骤摘要】
一种血清葡萄糖标准物质的制备方法
本专利技术涉及一种以人血清为基质的葡萄糖标准物质，具体说是涉及一种血清葡萄糖标准物质的制备方法。
技术介绍
我国糖尿病患病率呈迅速增加趋势，由糖尿病导致的微血管并发症(视网膜病变、糖尿病肾病、神经病变和糖尿病足)及大血管并发症(心、脑血管疾病)的发生率、致残率和致死率极高，严重威胁糖尿病患者的生存质量甚至生命，也给医疗资源和社会经济造成巨大的负担，因此，临床准确测定血清中葡萄糖的浓度，是糖尿病的早期诊断以及糖尿病患者血糖水平合理控制是关键所在。标准物质用于校准测量系统、评价测量程序或为材料赋值。随着临床实验室常规化学标本检测量的增加，标准物质的需要量也相应大量增加。标准物质的制备途径主要有：人工合成、自然界物质提纯、人或动物组织来源提纯品或者基因工程重组标准物质。作为质控物质，最好选用天然的物质，与待测标本具有尽可能的相似性，否则将不具有充分的代表性。因此研制临床检验用的人血清质冰冻混合血清标准物质势在必行。
技术实现思路
本专利技术的目的在于克服现有技术存在的不足，而提供一种有良好均匀性、稳定性及互通性，符合《一级标准物质技术规范》及ISOGuide35的要求，采用新鲜血液制备，来源广泛，制备方法简单的血清葡萄糖标准物质的制备方法。本专利技术的目的是通过以下技术方案来实现的：一种血清葡萄糖标准物质的制备方法，其特征在于该制备方法包括以下步骤：(1)血清的制备：起始原料来源健康捐助者血液，每个捐助者抽取全血后，得到血清量为110-170毫升；(2)血清的处理：将各捐助者的血清混合，添加纯葡萄糖物质至目标浓度5-7mmol/L，离心以实现均一、澄清的“候选血清标准物质”；所述的“候选血清标准物质”经无菌过滤后分装于经灭菌干燥的棕色安培瓶中，每瓶1毫升，-70℃冰冻储存；得到互通性良好、均一稳定、量值溯源可靠的、浓度水平为5-7mmol/L人血清基质标准物质。作为优选：所述的健康捐助者选择标准为年龄20-50岁、血脂水平适当、人类免疫缺陷病毒抗体和乙型、丙型肝炎表面抗原阴性；每个捐助者抽取300-400毫升全血，平均得到血清量为140毫升。作为优选：所述的健康捐助者在餐前抽血，收集于干燥的、不含任何添加剂的离子瓶中，放置在室温下凝血3-4小时，在2000～3000g下离心20分钟，从血块中分离出血清。血清混合后测定葡萄糖初浓度，添加纯葡萄糖物质至目标浓度，在6000～9000g下离心20分钟，取上清液以尽量去除血清样本中的凝血、纤维蛋白等成分，目测为清晰、淡黄色且无颗粒物质，紫外分光光度仪在波长710nm、比色皿1厘米条件下吸光度A不超过0.5，若不符合则继续在6000～9000g下离心20分钟。作为优选：所述的添加纯葡萄糖物质为编号GBW10062的标准物质；葡萄糖浓度的定值方法为气相色谱-同位素稀释质谱法。作为优选：所述“候选血清标准物质”在生物安全柜中进行负压抽吸过滤，血清依次经过0.45、0.22μm等亲水膜进行无菌过滤。本专利技术相对于现有技术存在如下技术效果：该标准物质具有良好的均匀性、稳定性及互通性，符合《一级标准物质技术规范》及ISOGuide35的要求；标准物质采用新鲜血液制备，来源广泛，制备简单，使用方便；在-70℃可长期储存，对于常规检测系统的溯源和质量评价以及协作研究分析中的质量保证都可发挥作用，具有很大的应用前景。具体实施方式下面将结合具体实施例对本专利技术作进一步的描述。本专利技术所述的一种血清葡萄糖标准物质的制备方法，该制备方法包括以下步骤：(1)血清的制备：起始原料来源健康捐助者血液，每个捐助者抽取全血后，得到血清量为110-170毫升；(2)血清的处理：将各捐助者的血清混合，添加纯葡萄糖物质至目标浓度5-7mmol/L，离心以实现均一、澄清的“候选血清标准物质”；所述的“候选血清标准物质”经无菌过滤后分装于经灭菌干燥的棕色安培瓶中，每瓶1毫升，-70℃冰冻储存；得到互通性良好、均一稳定、量值溯源可靠的、浓度水平为5-7mmol/L人血清基质标准物质。本专利技术所述的健康捐助者选择标准为年龄20-50岁、血脂水平适当、人类免疫缺陷病毒抗体和乙型、丙型肝炎表面抗原阴性；每个捐助者抽取300-400毫升全血，平均得到血清量为140毫升。本专利技术所述的健康捐助者在餐前抽血，收集于干燥的、不含任何添加剂的离子瓶中，放置在室温下凝血3-4小时，在2000～3000g下离心20分钟，从血块中分离出血清。血清混合后测定葡萄糖初浓度，添加纯葡萄糖物质至目标浓度，在6000～9000g下离心20分钟，取上清液以尽量去除血清样本中的凝血、纤维蛋白等成分，目测为清晰、淡黄色且无颗粒物质，紫外分光光度仪在波长710nm、比色皿1厘米条件下吸光度A不超过0.5，若不符合则继续在6000～9000g下离心20分钟。所述的添加纯葡萄糖物质为编号GBW10062的标准物质；葡萄糖浓度的定值方法为检验医学溯源联合委员会(JCTLM)认可公布的一级参考测量方法(气相色谱-同位素稀释质谱法)，可确保相关测量工作的溯源性。本专利技术所述的“候选血清标准物质”在生物安全柜中进行负压抽吸过滤，血清依次经过0.45、0.22μm等亲水膜进行无菌过滤。实施例：本专利技术所述的血清葡萄糖标准物质的制备方法包括以下步骤：(1).血清的制备：起始原料来源健康捐助者血液。健康捐助者选择标准为年龄20-50岁、血脂水平适当、人类免疫缺陷病毒抗体和乙型、丙型肝炎表面抗原阴性，共选取4名捐助者，每个捐助者在餐前抽取约300毫升全血，收集于干燥的离子瓶中(不含任何添加剂)，放置在室温下凝血3-4小时，在2000～3000g下离心20分钟，从血块中分离出血清；(2).血清的处理：将各捐助者的血清混合，约为550毫升，测定葡萄糖初浓度，添加纯葡萄糖物质(标准物质GBW10062)至目标浓度(5-7mmol/L)，该浓度为医学决定水平，保证检测质量，以减少糖尿病的漏诊率和误诊率。混合血清添加纯物质后在6000～9000g下离心20分钟，取上清液以尽量去除血清样本中的凝血、纤维蛋白等成分，目测为清晰、淡黄色且无颗粒物质，紫外分光光度仪在波长710nm、比色皿1厘米条件下吸光度A不超过0.5，若不符合则继续在6000～9000g下离心20分钟，以实现均一、澄清的“候选血清标准物质”。在生物安全柜中进行负压抽吸过滤，血清依次经过0.45、0.22μm等亲水膜进行无菌过滤后，分装于经灭菌干燥的棕色安培瓶中，每瓶1毫升，共450瓶，-70℃冰冻储存。(3).均匀性检验：均匀性是标准物质的重要属性之一，根据《一级标准物质技术规范》及ISOGuide35的要求，该血清标准物质是液体，属于均匀性良好的样品，从制备的450瓶样本中随机抽取10瓶，每瓶重复测定3次，进行均匀性检验。血清葡萄糖标准物质均匀性检验测量数据结果及统计结果见表1～3，在显著性水平a＝0.05下，采用F检验法对表1中数据进行统计分析。x11，x12，……x1n1，x21，x22，.……x2n2，………………………...，xm1，xm2，……xmnm，设组间平方和为组内平方和为v1＝m-1v2＝N-m作统计量F：根据自由度为(ν1，ν2)及给定的显著性水平α，可由表查得临界的F值，算得本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种血清葡萄糖标准物质的制备方法，其特征在于该制备方法包括以下步骤：(1)血清的制备：起始原料来源健康捐助者血液，每个捐助者抽取全血后，得到血清量为110‑170毫升；(2)血清的处理：将各捐助者的血清混合，添加纯葡萄糖物质至目标浓度5‑7mmol/L，离心以实现均一、澄清的“候选血清标准物质”；所述的“候选血清标准物质”经无菌过滤后分装于经灭菌干燥的棕色安培瓶中，每瓶1毫升，‑70℃冰冻储存；得到互通性良好、均一稳定、量值溯源可靠的、浓度水平为5‑7mmol/L人血清基质标准物质。

【技术特征摘要】
1.一种血清葡萄糖标准物质的制备方法，其特征在于该制备方法包括以下步骤：(1)血清的制备：起始原料来源健康捐助者血液，每个捐助者抽取全血后，得到血清量为110-170毫升；(2)血清的处理：将各捐助者的血清混合，添加纯葡萄糖物质至目标浓度5-7mmol/L，离心以实现均一、澄清的“候选血清标准物质”；所述的“候选血清标准物质”经无菌过滤后分装于经灭菌干燥的棕色安培瓶中，每瓶1毫升，-70℃冰冻储存；得到互通性良好、均一稳定、量值溯源可靠的、浓度水平为5-7mmol/L人血清基质标准物质。2.根据权利要求1所述的血清葡萄糖标准物质的制备方法，其特征在于所述的健康捐助者选择标准为年龄20-50岁、血脂水平适当、人类免疫缺陷病毒抗体和乙型、丙型肝炎表面抗原阴性；每个捐助者抽取300-400毫升全血，平均得到血清量为140毫升。3.根据权利要求1或2所述的血清葡萄糖标准物质的制备方法，其特征在于...

【专利技术属性】
技术研发人员：李海龙，程贝，蒋哲，孟凡国，
申请(专利权)人：嘉兴博泰生物科技发展有限公司，
类型：发明
国别省市：浙江,33