一种斑茅植物根尖分生区染色体标本的制备方法技术

本发明专利技术提出一种斑茅植物根尖分生区染色体标本的制备方法，该方法包括以下步骤：根尖培养、根尖取样及前处理、根尖酶解、染色体制片和镜检等步骤，其特点是桶栽整株培养根系；根尖处理采用0.002M 8‑羟基喹啉水溶液25~28℃处理3~4小时，采用酶解去壁低渗法制片。本发明专利技术可操作性强，容易获得高活性分生区的根尖，节约根尖培养的时间，节省人力物力，制片效率高，得到分生区细胞的中期分裂相多，获得的染色体形态清晰、分散均匀，特别适合斑茅属植物的染色体制片，本方法同样适用于甘蔗及其近缘属植物的染色体制片。

Method for preparing chromosome specimen of meristematic zone of root tip plant of spotted grass

The invention provides a preparation method of e.arundinaceus plant apical meristem chromosome, the method comprises the following steps: root culture, root sampling and pretreatment, enzymatic hydrolysis, root tip chromosome and microscopic steps, which is characterized by pot cultivation of whole plant root; root treatment with 0.002M 8 hydroxy quinoline 25~28 aqueous solution treatment for 3~4 hours, using enzyme WDH method. The invention has strong operability, easy to obtain high activity of root tip meristematic zone, saving root culture time, save manpower, production efficiency is high, by mid meristematic cell division phase, chromosome morphology obtained clear and uniform dispersion, especially suitable for the genus Erianthus chromosomes in plants, the the method is also applicable to sugarcane and its related genera of chromosome.

【技术实现步骤摘要】
一种斑茅植物根尖分生区染色体标本的制备方法
本专利技术涉及植物细胞遗传学中的植物染色体中期相标本的制备方法，尤其涉及斑茅植物根尖染色体的制备方法。技术背景染色体是遗传物质的载体，在不同的物种中染色体具有较为稳定的数目和形态。细胞染色体遗传研究在遗传育种具有重要的地位，染色体标本的制备是细胞遗传学研究的基本实验方法。植物染色体标本制备包括以下几个流程：根尖培养、取材、前处理、固定、酶解（或解离），制片及镜检。斑茅Erianthusarundinaceus(Retz.)Jeswiet.为多年生草本，直立丛生，无地下茎，分布极广，适应性极强。它具有抗旱、耐涝、耐瘠、抗病虫能力强、分蘖多、宿根性好、生长力旺盛等特点，具有甘蔗育种者所追求的能被甘蔗育种所利用的优异性状，所以倍受世界各国育种家青睐。目前国内外已经突破了甘蔗与斑茅的属间杂交获得了多代材料。斑茅及其与甘蔗杂交的后代对甘蔗遗传改良具有重要的意义。多数的斑茅的染色体数目2n=60条，研究人员也曾发现有2n=40条，但比水稻、玉米、高粱等作物染色体条数多，染色体制片难度大。特别是斑茅根尖的培养一直是个难点，传统的植物根尖培养的方法如水本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种斑茅植物根尖分生区染色体标本的制备方法，其特征在于包括如下步骤：（1） 根尖培养：初春，剪取斑茅幼嫩植株种植于培养桶内，培养桶的侧边及底部打孔透水，桶内底部为保水透气基质，通过正常的水、肥及除草等栽培管理，3~4个月后斑茅的根会盘绕于桶内的四周及底部；（2） 根尖取样及前处理：将整植株连同基质与培养桶分离，挑选活性高的根尖，用手术刀或手术剪取长度约为0.5cm的根尖，放置于蒸馏水中漂洗，漂洗后投入浓度为0.002M的8‑羟基喹啉水溶液、25~28℃处理3~4小时，处理后用蒸馏水洗净，再放置于卡诺氏固定液中、4℃冰箱处理24~48小时；（3）根尖酶解：从步骤（2）的冰箱中取出根尖，用蒸馏水漂...

【技术特征摘要】
1.一种斑茅植物根尖分生区染色体标本的制备方法，其特征在于包括如下步骤：（1）根尖培养：初春，剪取斑茅幼嫩植株种植于培养桶内，培养桶的侧边及底部打孔透水，桶内底部为保水透气基质，通过正常的水、肥及除草等栽培管理，3~4个月后斑茅的根会盘绕于桶内的四周及底部；（2）根尖取样及前处理：将整植株连同基质与培养桶分离，挑选活性高的根尖，用手术刀或手术剪取长度约为0.5cm的根尖，放置于蒸馏水中漂洗，漂洗后投入浓度为0.002M的8-羟基喹啉水溶液、25~28℃处理3~4小时，处理后用蒸馏水洗净，再放置于卡诺氏固定液中、4℃冰箱处理24~48小时；（3）根尖酶解：从步骤（2）的冰箱中取出根尖，用蒸馏水漂洗2~3次，洗净固定液后，放置于0.075MKCl溶液低渗1小时，后取出根尖并放置于含有纤维素...

【专利技术属性】
技术研发人员：王勤南，吴嘉云，常海龙，凌秋平，张伟，邱永生，陈俊吕，谢静，
申请(专利权)人：广东省生物工程研究所广州甘蔗糖业研究所，
类型：发明
国别省市：广东,44