一种提高黄芩毛状根抗低氧能力的方法技术

技术编号:7116502 阅读:282 留言:0更新日期:2012-04-11 18:40
本发明专利技术涉及一种提高黄芩毛状根抗低氧能力的方法。本发明专利技术是通过构建含血红蛋白基因的植物表达载体,经农杆菌介导转化黄芩外植体或毛状根获得转基因黄芩毛状根。本发明专利技术获得的整合有vgb的黄芩毛状根能够在低溶氧环境下正常生长,在工业化生产过程中间歇通气即可满足毛状根需求,降低生产耗电、节约生产成本,本发明专利技术对培养黄芩毛状根生产黄芩药用成分、推进毛状根生产次生代谢产物的工业化进程有着重要意义。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于黄芩的人工培育
,涉及。
技术介绍
毛状根培养周期较长,在生物量大量增殖后,其培养液中溶解氧成为限制性因素, 影响毛状根生长与次生代谢产物的合成,不利于工业化生产。气升式生物反应器与鼓泡式生物反应器是毛状根培养常用反应器,但较高的湍流剪切力是损害细胞、抑制毛状根生长的重要原因,因此寻求一种改善毛状根自身供氧状况,促进毛状根生长并提高次生代谢产物含量的方法,消除毛状根培养后期出现的溶解氧限制问题,将会有力推进毛状根生产次生代谢产物的工业化进程。透明颤菌中血红蛋白(VHb)是由透明颤菌产生的一种可溶性血红蛋白,这种血红蛋白能在贫氧条件下被大量诱导合成,使携带该血红蛋白基因的生物能在微氧条件下很好地生存。研究表明,透明颤菌血红蛋白基因(vgb)已在多种植物中表达成功,并表现出细胞生长和产物合成对溶氧的敏感度降低的性状;转的植物能够提高抗涝能力及促进水培植物生长。
技术实现思路
本专利技术在于提供,将Vgb基因在黄芩毛状根中表达,改善黄芩毛状根培养过程中对溶解氧需求。本专利技术是通过以下技术方案来实现,包括以下步骤1)将Vgb基因克隆到植物表达载体中,再将该植物表达载体转化本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种提高黄芩毛状根抗低氧能力的方法,其特征在于,包括以下步骤:1)将vgb基因克隆到植物表达载体中,再将该植物表达载体转化农杆菌,筛选获得整合了vgb的农杆菌菌株;2)将无菌的黄芩外植体或毛状根接种于MS固体培养基上,25~26℃黑暗条件下预培养2~3d;在预培养的黄芩外植体或毛状根上划痕,加入经活化的整合了vgb的农杆菌,并添加浓度为10~200mg/L乙酰丁香酮,感染10~30min后,将黄芩外植体或毛状根转移到含10~50mg/L乙酰丁香酮的MS固体培养基上,25~26℃黑暗培养2~3d,再转移到含抗菌素的MS固体培养基上,25~26℃黑暗培养,诱发毛状根;3)待经农杆菌感染的黄芩外...

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员:齐香君李雅钱卫东
申请(专利权)人:陕西科技大学
类型:发明
国别省市:87

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